CD47抗原结合分子制造技术

公开了CD47抗原结合分子。还公开了编码该CD47抗原结合分子的核酸和表达载体，包含该CD47抗原结合分子的组合物和使用该CD47抗原结合分子的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】CD47抗原结合分子本申请要求2017年11月1日提交的GB1718101.7、2017年12月7日提交的GB1720425.6和2017年12月7日提交的GB1720426.4的优先权，其中各自的内容和要素出于所有目的通过参考引入本文。专利
本专利技术涉及分子生物学领域，更具体地涉及抗体技术。本专利技术还涉及医学治疗和预防方法。专利技术背景CD47是“不要吃我”信号，并在正常细胞上普遍表达，在正常细胞上CD47与巨噬细胞上的SIRPα结合会抑制吞噬作用。CD47通常在肿瘤中过表达，在肿瘤中与免疫逃避和不良预后相关。阻断CD47-SIRPalpha相互作用可恢复巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬作用，抗CD47mAb在实体瘤和血液系统恶性肿瘤的小鼠模型中显示出抗肿瘤功效。WO2014/087248A2公开了对人CD47的亲和力高达～23.6nM的单特异性抗CD47抗体。其中公开的高亲和力CD47抗体诱导实质性血凝反应(参见例如WO2014/087248A2的实施例8)。专利技术概述在第一方面，本专利技术提供了能够结合CD47的任选分离的抗原结合分子。还提供了能够结合CD47的胞外区1的任选分离的抗原结合分子。在一些实施方式中，所述抗原结合分子能够结合CD47的V型Ig样结构域。在一些实施方式中，所述抗原结合分子能够结合包含SEQIDNO:9所示氨基酸序列或由SEQIDNO:9所示氨基酸序列组成的多肽。在一些实施方式中，所述抗原结合分子能够抑制CD47和SIRPα之间的相互作用。在一些实施方式中，所述抗原结合分子能够增加表达CD47的细胞的吞噬作用。在一些实施方式中，所述抗原结合分子能够结合包含SEQIDNO:21所示氨基酸序列或由SEQIDNO:21所示氨基酸序列组成的肽或多肽。在一些实施方式中，所述抗原结合分子包含：(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：具有SEQIDNO:169所示氨基酸序列的HC-CDR1具有SEQIDNO:170所示氨基酸序列的HC-CDR2具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3，或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：具有SEQIDNO:171所示氨基酸序列的LC-CDR1具有SEQIDNO:172所示氨基酸序列的LC-CDR2具有SEQIDNO:173所示氨基酸序列的LC-CDR3；或其变体，其中LC-CDR1、LC-CDR2或LC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代。在一些实施方式中，所述抗原结合分子包含：(a)(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：具有SEQIDNO:24所示氨基酸序列的HC-CDR1具有SEQIDNO:25所示氨基酸序列的HC-CDR2具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3，或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：具有SEQIDNO:32所示氨基酸序列的LC-CDR1具有SEQIDNO:33所示氨基酸序列的LC-CDR2具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；或其变体，其中LC-CDR1、LC-CDR2或LC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；或者(b)(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：具有SEQIDNO:137所示氨基酸序列的HC-CDR1具有SEQIDNO:138所示氨基酸序列的HC-CDR2具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3，或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：具有SEQIDNO:32所示氨基酸序列的LC-CDR1具有SEQIDNO:33所示氨基酸序列的LC-CDR2具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；或其变体，其中LC-CDR1、LC-CDR2或LC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；或者(c)(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：具有SEQIDNO:24所示氨基酸序列的HC-CDR1具有SEQIDNO:25所示氨基酸序列的HC-CDR2具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3，或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：具有SEQIDNO:139所示氨基酸序列的LC-CDR1具有SEQIDNO:141所示氨基酸序列的LC-CDR2具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；或其变体，其中LC-CDR1、LC-CDR2或LC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；或者(d)(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：具有SEQIDNO:137所示氨基酸序列的HC-CDR1具有SEQIDNO:138所示氨基酸序列的HC-CDR2具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3，或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：具有SEQIDNO:139所示氨基酸序列的LC-CDR1具有SEQIDNO:141所示氨基酸序列的LC-CDR2具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；或其变体，其中LC-CDR1、LC-CDR2或LC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；或者(e)(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：具有SEQIDNO:24所示氨基酸序列的HC-CDR1具有SEQIDNO:25所示氨基酸序列的HC-CDR2具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3，或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：具有SEQIDNO:140所示氨基酸序列的LC-CDR1具有SEQIDNO:141所示氨基酸序列的LC-CDR2具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种任选分离的抗原结合分子，其能够结合CD47的胞外区1。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171101 GB 1718101.7;20171207 GB 1720425.6;2017121.一种任选分离的抗原结合分子，其能够结合CD47的胞外区1。


2.如权利要求1所述的抗原结合分子，其特征在于，所述抗原结合分子能够结合CD47的V型Ig样结构域。


3.如权利要求1或2所述的抗原结合分子，其特征在于，所述抗原结合分子能够结合包含SEQIDNO:9所示氨基酸序列或由SEQIDNO:9所示氨基酸序列组成的多肽。


4.如权利要求1-3中任一项所述的抗原结合分子，其特征在于，所述抗原结合分子能够抑制CD47和SIRPα之间的相互作用。


5.如权利要求1-4中任一项所述的抗原结合分子，其特征在于，所述抗原结合分子能够增加表达CD47的细胞的吞噬作用。


6.如权利要求1-5中任一项所述的抗原结合分子，其特征在于，所述抗原结合分子能够结合包含SEQIDNO:21所示氨基酸序列或由SEQIDNO:21所示氨基酸序列组成的肽或多肽。


7.如权利要求1-6中任一项所述的抗原结合分子，其特征在于，所述抗原结合分子包含能够结合CD47的抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:169所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:170所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3，
或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:171所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:172所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:173所示氨基酸序列的LC-CDR3；
或其变体，其中LC-CDR1、LC-CDR2或LC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代。


8.如权利要求1-7中任一项所述的抗原结合分子，其特征在于，所述抗原结合分子包含：
(a)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:24所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:25所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3,
或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:32所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:33所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；
或其变体，其中LC-CDR1、LC-CDR2或LC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；
或者
(b)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:137所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:138所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3,
或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:32所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:33所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；
或其变体，其中LC-CDR1、LC-CDR2或LC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；
或者
(c)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:24所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:25所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3,
或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:139所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:141所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；
或其变体，其中LC-CDR1、LC-CDR2或LC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；
或者
(d)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:137所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:138所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3,
或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:139所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:141所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；
或其变体，其中LC-CDR1、LC-CDR2或LC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；
或者
(e)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:24所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:25所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3,
或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:140所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:141所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；
或其变体，其中LC-CDR1、LC-CDR2或LC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；
或者
(f)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:137所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:138所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3,
或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:140所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:141所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；
或其变体，其中LC-CDR1、LC-CDR2或LC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；
或者
(g)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:137所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:138所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3,
或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:32所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:141所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；
或其变体，其中LC-CDR1、LC-CDR2或LC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；
或者
(h)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:137所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:138所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3,
或其变体，其中HC-CDR1、HC-CDR2或HC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:32所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:33所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:142所示氨基酸序列的LC-CDR3；
或其变体，其中LC-CDR1、LC-CDR2或LC-CDR3的一个或多个中的1或2或3个氨基酸被另一氨基酸取代。


9.如权利要求1-8中任一项所述的抗原结合分子，其特征在于，所述抗原结合分子包含：
(a)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:24所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:25所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:32所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:33所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；
或者
(b)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:137所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:138所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:32所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:33所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；或者
(c)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:24所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:25所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3；and
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:139所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:141所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；或者
(d)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:137所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:138所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:139所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:141所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；或者
(e)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:24所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:25所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:140所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:141所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；
或者
(f)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:137所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:138所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:140所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:141所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；
或者
(g)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:137所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:138所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的HC-CDR3；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变(VL)区：
具有SEQIDNO:32所示氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO:141所示氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO:34所示氨基酸序列的LC-CDR3；
或者
(h)
(i)包含以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQIDNO:137所示氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO:138所示氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO:26所示氨基酸序列的...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·D·博伊德柯克普，D·萨克，P·英格拉姆，吴志浩，K·帕兹基维奇，P·布劳尔，关思宇，
申请(专利权)人：蜂鸟生物科技控股私人有限公司，
类型：发明
国别省市：新加坡;SG