VISTA抗原结合分子制造技术

公开了VISTA抗原结合分子。还公开了编码VISTA抗原结合分子的核酸和表达载体、包含VISTA抗原结合分子的组合物和其使用方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】VISTA抗原结合分子本申请要求于2018年3月29日提交的PCT/EP2018/058258、2018年9月7日提交的GB1814562.3和2018年11月5日提交的US16/180,949的优先权，其内容和要素出于所有目的通过引用合并于此。专利
本专利技术涉及分子生物学领域，更具体地涉及抗体技术。本专利技术还涉及医学药物治疗和预防方法。专利技术背景已在多种实体瘤和淋巴瘤中发现了髓源性抑制细胞(MDSC)介导的免疫反应抑制。MDSCs在进展期结直肠癌中升高(Toor等，FrontImmunol.2016；7:560)。在乳腺癌中也观察到了MDSCs，并且晚期乳腺癌患者外周血MDSCs的百分比升高(Markowitz等，BreastCancerResTreat.2013年7月；140(1)：13-21)。MDSC丰度还与实体瘤的不良预后相关(Charoentong等，CellRep.2017年1月3；18(1)：248-262)。MDSC通过多种机制抑制T细胞，包括产生活性氧、一氧化氮和精氨酸酶。这些最终导致DC、NK和T细胞活性受到抑制并增加了肿瘤负担(Umansky等人，Vaccines(Basel)(2016)4(4)：36)。MDSC还通过产生可溶性因子，例如基质金属蛋白酶、VEGF、bFGF、TGF-β和S100A8/A9来促进肿瘤的发展和转移，这些因子促进新血管形成、侵袭、增殖和转移。靶向含V型免疫球蛋白域的T细胞活化抑制剂(VISTA)一种解除MDSC介导的效应免疫细胞功能抑制的有效治疗策略，VISTA是一种主要在MDSCs上表达的免疫检查点分子。WO2017/137830A1公开了抗VISTA抗体VSTB174，例如在段落[00221]中公开，它包含了抗VISTA抗体VSTB112的可变区域。段落[00362]公开了VSTB123包含VSTB174的可变区。WO2017/137830A1的实施例25在段落[0417]和图42A公开了mIgG2a抗体VSTB123能够抑制MB49肿瘤模型中的肿瘤生长。段落[0418]和图42A公开显示，相反地，以IgG2aLALA形式提供的相同抗体VSTB124不抑制肿瘤生长；参见段落[0408]。基于这些结果，实施例25在段落[0419]中得出结论，抗VISTA抗体治疗的功效可能需要活性Fc。因此，提出的抗VISTA抗体的作用机制如图47所示(参见段落[0053]的图47的图例)，涉及NK细胞表达的Fc介导的FcγRIII的结合。LeMercier等人，CancerRes.(2014)74(7)：1933-44中公开了仓鼠单克隆抗VISTA抗体mAb13F3抑制B16OVA和B16-BL6黑色素瘤模型中的肿瘤生长。第1942页的左右两段分别教导VISTAmAb的免疫原性和FcR结合活性可能是实现最佳靶标中和作用和治疗功效的关键限制因素。
技术实现思路
在第一方面，本专利技术提供了一种任选分离的抗原结合分子，其能够结合VISTA并抑制VISTA介导的信号转导，而不依赖于Fc介导的功能。还提供了一种任选分离的抗原结合分子，其能够与VISTA结合并抑制VISTA介导的信号转导，其中所述抗原结合分子不能诱导Fc介导的抗体效应子功能。在一些实施方式中，抗原结合分子不能诱导抗体依赖的细胞毒性(ADCC)，和/或不能诱导抗体依赖的细胞介导吞噬(ADCP)，和/或不能诱导补体依赖的细胞毒性(CDC)。还提供了一种任选分离的抗原结合分子，其能够与VISTA结合并抑制VISTA介导的信号传导，其中所述抗原结合分子不与Fcγ受体结合和/或所述抗原结合分子不与C1q结合。在一些实施方式中，抗原结合分子能够在Ig样V型结构域中结合VISTA。在一些实施方式中，抗原结合分子能够结合包含或由SEQIDNO：6的氨基酸序列组成的多肽。在一些实施方式中，抗原结合分子能够结合包含或由SEQIDNO：31的氨基酸序列组成的多肽。在一些实施方式中，抗原结合分子不与IGN175A竞争结合VISTA(例如，通过表位结合分析所确定的，例如如实施例8中所述)。在一些实施方式中，抗原结合分子不能够结合由SEQIDNO：275的氨基酸序列组成的肽。在一些实施方式中，抗原结合分子包含：(i)包含以下CDR的重链可变区(VH)：具有SEQIDNO：305的氨基酸序列的HC-CDR1具有SEQIDNO：306的氨基酸序列的HC-CDR2具有SEQIDNO：307的氨基酸序列的HC-CDR3；和(ii)包含以下CDR的轻链可变区(VL)：具有SEQIDNO：41的氨基酸序列的LC-CDR1具有SEQIDNO：308的氨基酸序列的LC-CDR2具有SEQIDNO：43的氨基酸序列的LC-CDR3。在一些实施方式中，抗原结合分子包含：(i)包含以下CDR的重链可变区(VH)：具有SEQIDNO：244的氨基酸序列的HC-CDR1具有SEQIDNO：34的氨基酸序列的HC-CDR2具有SEQIDNO：35的氨基酸序列的HC-CDR3；和(ii)包含以下CDR的轻链可变区(VL)：具有SEQIDNO：41的氨基酸序列的LC-CDR1具有SEQIDNO：245的氨基酸序列的LC-CDR2具有SEQIDNO：43的氨基酸序列的LC-CDR3。在一些实施方式中，抗原结合分子包含：(i)包含以下CDR的重链可变区(VH)：具有SEQIDNO：290的氨基酸序列的HC-CDR1具有SEQIDNO：291的氨基酸序列的HC-CDR2具有SEQIDNO：278的氨基酸序列的HC-CDR3；和(ii)包含以下CDR的轻链可变区(VL)：具有SEQIDNO：41的氨基酸序列的LC-CDR1具有SEQIDNO：309的氨基酸序列的LC-CDR2具有SEQIDNO：43的氨基酸序列的LC-CDR3。在一些实施方式中，抗原结合分子包含：(i)包含以下CDR的重链可变区(VH)：具有SEQIDNO：290的氨基酸序列的HC-CDR1具有SEQIDNO：291的氨基酸序列的HC-CDR2具有SEQIDNO：278的氨基酸序列的HC-CDR3；和(ii)包含以下CDR的轻链可变区(VL)：具有SEQIDNO：41的氨基酸序列的LC-CDR1具有SEQIDNO：295或SEQIDNO：300的氨基酸序列的LC-CDR2具有SEQIDNO：43的氨基酸序列的LC-CDR3。在一些实施方式中，抗原结合分子包含：(i)包含以下CDR的重链可变区(VH)：具有SEQIDNO：290的氨基酸序列的HC-CDR1具有SEQIDNO：291的氨基酸序列的HC-CDR2具有SEQID本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种任选分离的抗原结合分子，其能够与VISTA结合并抑制VISTA介导的信号传导，而不依赖于Fc介导的功能。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180329 EP PCT/EP2018/058258;20180907 GB 1814562.1.一种任选分离的抗原结合分子，其能够与VISTA结合并抑制VISTA介导的信号传导，而不依赖于Fc介导的功能。


2.根据权利要求1所述的抗原结合分子，其中，所述抗原结合分子包括：
(i)包含以下CDR的重链可变区(VH)：
具有SEQIDNO：305的氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO：306的氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO：307的氨基酸序列的HC-CDR3；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变区(VL)：
具有SEQIDNO：41的氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO：308的氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO：43的氨基酸序列的LC-CDR3。


3.根据权利要求1或2所述的抗原结合分子，其中，所述抗原结合分子包括：
(i)包含以下CDR的重链可变区(VH)：
具有SEQIDNO：290的氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO：291的氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO：278的氨基酸序列的HC-CDR3；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变区(VL)：
具有SEQIDNO：41的氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO：309的氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO：43的氨基酸序列的LC-CDR3。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的抗原结合分子，其中，所述抗原结合分子包括：
(i)包含以下CDR的重链可变区(VH)：
具有SEQIDNO：290的氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO：291的氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO：278的氨基酸序列的HC-CDR3；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变区(VL)：
具有SEQIDNO：41的氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO：295的氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO：43的氨基酸序列的LC-CDR3。


5.根据权利要求1至3中任一项所述的抗原结合分子，其中，所述抗原结合分子包括：
(i)包含以下CDR的重链可变区(VH)：
具有SEQIDNO：290的氨基酸序列的HC-CDR1
具有SEQIDNO：291的氨基酸序列的HC-CDR2
具有SEQIDNO：278的氨基酸序列的HC-CDR3；和
(ii)包含以下CDR的轻链可变区(VL)：
具有SEQIDNO：41的氨基酸序列的LC-CDR1
具有SEQIDNO：300的氨基酸序列的LC-CDR2
具有SEQIDNO：43的氨基酸序列的LC-CDR3。


6.根据权利要求1至5中任一项所述的抗原结合分子，其中，所述抗原结合分子包括：
包含与SEQIDNO：289的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列的VH区；和
包含与SEQIDNO：310的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列的VL区。


7.根据权利要求1至6中任一项所述的抗原结合分子，其中，所述抗原结合分子包括：
包含与SEQIDNO：289的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列的VH区；和
包含与SEQIDNO：294的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列的VL区。


8.根据权利要求1至6中任一项所述的抗原结合分子，其中，所述抗原结合分子包括：
包含与SEQIDNO：289的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列的VH区；和
包含与SEQIDNO：297的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列的VL区。


9.根据权利要求1至6中任一项所述的抗原结合分子，其中，所述抗原结合分子包括：
包含与SEQIDNO：289的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列的VH区；和
包含与SEQIDNO：299的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列的VL区。


10.一种任选分离的抗原结合分子，其包含(i)根据权利要求1至9中任一项所述的抗原结合分子，和(ii)能够结合除VISTA以外的抗原的抗原结合分子。


11.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含根据权利要求1至10中任一项所述的抗原结合分子。


12.一种或多种任选分离的核酸，其编码根据权利要求1至10中任一项所述的抗原结合分子或根据权利要求11所述的CAR。


13.一种或多种表达载体，其包含根据权利要求12所述的一种或多种核酸。


14.一种细胞，其包含根据权利要求1至10中任一项所述的抗原结合分子，根据权利要求11所述的CAR，根据权利要求12所述的一种或多种核酸，或根据权利要求13所述的一种或多种表达载体。


15.一种方法，其包括在适合从核酸或表达载体表达抗原结合分子或CAR的条件下，培养包含根据权利要求12所述的一种或多种核酸，或根据权利要求13所述的一种或多种表达载体的细胞。


16.一种组合物，其包含根据权利要求1至10中任一项所述的抗原结合分子，根据权利要求11所述的CAR，根据权利要求12所述的一种或多种核酸，根据权利要求13所述的一种或多种表达载体或根据权利要求14所述的细胞。


17.根据权利要求16所述的组合物，其还包含能够抑制由VISTA以外的免疫检查点分子介导的信号传导的试剂，其中除了VISTA以外的免疫检查点分子任选地选自：PD-1、CTLA-4、LAG-3、TIM-3、TIGIT和BTLA。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·D·博伊德柯克普，P·英格拉姆，D·萨克，吴志浩，K·帕兹基维奇，V·桑塞农，关思宇，
申请(专利权)人：蜂鸟生物科技控股私人有限公司，
类型：发明
国别省市：新加坡;SG