【技术实现步骤摘要】
CdTe标记抗体的制备方法、应用及检测四氯联苯的方法
本专利技术涉及四氯联苯检测领域,具体涉及一种CdTe标记抗体的制备方法、应用及检测四氯联苯的方法。
技术介绍
四氯联苯是众所周知的持久性有毒污染物,多氯联苯的监测分析、迁移转化和污染控制是国内外环境科学技术研究领域的热点课题。现有检测方法有气相色谱-质谱法、高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法等,其中,最常用的是气相色谱-质谱法。由于GC和GC-MS分析方法灵敏度较低,都易产生假阳性,HRGC-HRMS的仪器设备贵、对环境条件和人员要求高,不适于方法的推广。而使用GC-MS/MS进行检测时,二级质谱扫描的母离子一般选择一级质谱上丰度最高的离子,母离子再通过四极杆后产生特征子离子,形成离子对,通过监测一个或多个离子对,使化合物分析的准确度和精确度进一步提高但也存在都存在同时分析和色谱柱容易污染等问题。以上方法存在的问题是前处理步骤复杂,操作费时,分析成本高,需要熟练的技术人员及较长的分析周期,对大批复杂试样不能及时报出结果。因此,建立选择性更强、更灵敏、检出限更低的 ...
【技术保护点】
1.一种CdTe标记抗体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:/n对硝基四氯联苯还原后,再与牛血清白蛋白进行偶联,制成四氯联苯抗原,最后对四氯联苯抗原进行动物免疫实验,制得四氯联苯抗体;/n向CdTe量子点溶液中加入交联剂,并静置,然后再向其中加入四氯联苯抗体,于3-5℃反应40-60h,用磷酸盐缓冲溶液透析后,制得CdTe标记抗体。/n
【技术特征摘要】
1.一种CdTe标记抗体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
对硝基四氯联苯还原后,再与牛血清白蛋白进行偶联,制成四氯联苯抗原,最后对四氯联苯抗原进行动物免疫实验,制得四氯联苯抗体;
向CdTe量子点溶液中加入交联剂,并静置,然后再向其中加入四氯联苯抗体,于3-5℃反应40-60h,用磷酸盐缓冲溶液透析后,制得CdTe标记抗体。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述四氯联苯抗原的制备具体为使半抗原、二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺在N,N-二甲基甲酰胺搅拌反应6-10h,在3-5℃过夜,然后将反应产物离心分离得到上清液,与牛血清白蛋白在pH值为7-8的磷酸盐缓冲溶液中,冰浴条件下反应3-5h,之后使用生理盐水透析5-7d,得到四氯联苯抗原,其中半抗原、二环己基碳二亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺和牛血清白蛋白的摩尔比为1:0.5-1:0.5-1:0.5-1;
所述动物免疫实验为选择成年健康雄性新西兰白兔,将四氯联苯抗原经过与弗氏完全佐剂充分混合后,对大白兔进行颈部和背部点状注射免疫,经过加强免疫后,采用试管法和双白琼脂扩散试验考察其抗血清效价,获得四氯联苯抗体,其中四氯联苯抗原和弗氏完全佐剂的摩尔比是1:0.5-1。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,所述CdTe量子点溶液的摩尔浓度为1×10-3-2×10-3mol/L;四氯联苯抗体的浓度为0.5-2.0g/L;
CdTe量子点溶液、四氯联苯抗体和交联剂的体积比为5-10:10-20:0.5-1;
优选地,所述交联剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶液和N-羟基丁二酰亚胺溶液的混合溶液,所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐与所述N-羟基丁二酰亚胺摩尔比为1:(0.5-2),所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶液与所述N-羟基丁二酰亚胺溶液的摩尔浓度均为0.05-0.2mol/L。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的制备方法,其特征在于,CdTe量子点溶液中CdTe量子点的制备方法,包括如下步骤:将CdCl2·2.5H2O和巯基乙酸在惰性气氛下溶于水中,调节pH值至11.5-12.5,然后加入NaHTe溶液,控制CdCl2·2.5H2O、NaHTe溶液和巯基乙酸的比例为0.02-0.6g:20-50μL:25-50μL,得到CdTe量子点前躯体;
将所述的CdTe量子点前驱体于140-160℃加热5-60min后,在依次进行冷却、洗涤和离心,制得CdTe量子点。
5.权利要求1-4所述的任一项所述的制备方法制得的CdTe标记抗体在检测四氯联苯中的应用。
6.一种利用权利要求1-4所述的任一项所述的制备方法制得的CdTe标记抗体检测四氯联苯的方法,其...
【专利技术属性】
技术研发人员:张金艳,魏益华,严寒,熊艳,李伟红,刘廷强,邱素艳,庄惠生,陈庆隆,
申请(专利权)人:江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所,
类型:发明
国别省市:江西;36
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