一种用于清除自由基的异槲皮素衍生物的制备制造技术

本发明专利技术提供了一种用于清除自由基的异槲皮素衍生物的制备；本发明专利技术的异槲皮素衍生物的制备方法：在异槲皮素5’位上连接异戊二烯基，然后用生物酶处理异戊二烯基异槲皮素，可以制备出高纯度、高溶解度、高生物利用度的异槲皮素衍生物；本发明专利技术的异槲皮素衍生物在清除自由基、抗炎、抑菌是异槲皮素的3‑5倍；在心血管保护、降血脂和降压方面效果也优于异槲皮素。

【技术实现步骤摘要】
一种用于清除自由基的异槲皮素衍生物的制备
本专利技术涉及一种用于清除自由基的异槲皮素衍生物的制备，以及用于清除自由基，心血管保护和降血脂，属于生物医药领域。技术背景目前的研究表明，利用异槲皮素可作为抗氧化剂的特异性质，在减缓人体衰老和疾病发生等方面都具有广泛的应用。异槲皮素在抗氧化、降血压、抗炎、抗癌和抑制血小板聚集等方面具有与芦丁(Rutin)和槲皮素(Quercetin)更高效的生物活性和生物利用度，在延缓人体老化和防治疾病方面具有重要作用。相关药理实验结果表明，异槲皮素的药用价值极高，其药理活性远高于芦丁(王侃，鱼红闪，金凤燮芦丁-α-鼠李糖苷酶分离提纯及其酶性质。大连工业大学学报，2004,23(1):30)。因此，异槲皮苷是目前药学界的热点新药化合物，一直也是国际上各大医药食品公司竞相开发的高级食品添加剂、辅助药物或药物有效成分。异戊二烯基在生物合成中具有重要的作用。异戊烯基侧链的存在增加了黄酮类化合物的亲脂性和生物导向性，使其在生物体内更易透过细胞膜到达作用目标，大大提高了黄酮类化合物的药用价值。但因异槲皮素在水中和缓冲溶液中的溶解度低，使异槲皮素的生物利用度低，效果不明显。因此，在异槲皮素上连接易溶于水的基团增加异槲皮素的溶解性，连接脂溶性基团增加异槲皮素在生物体中的应用，提高异槲皮素的生物利用度。
技术实现思路
异槲皮素具有上述多种药用价值，但其单体难溶于水，作为药物直接使用时，在人体内的生物利用度低，难以充分发挥其生物功能。为了解决以上存在的不足，本专利技术通过在异槲皮素上添加异戊二烯基基团，增加异槲皮素黄酮化合物在降低胆固醇引起的动脉粥样硬化，增强毛细血管的舒张的治疗的功效增强。之后在生物酶的作用下，给已经异戊二烯基化的异槲皮素添加糖基基团，得到高纯度、高质量、高生物活性的异槲皮素衍生物。异槲皮素衍生物的溶解度比槲皮素、芦丁提高100倍以上，可以广泛的应用在食品、医药、化妆品等领域中。本专利技术的异槲皮素衍生物(Ⅰ)的合成步骤为：1)将2g异槲皮素，2～2.4倍当量的醋酸酐，2～4倍的哌啶，于100～140℃反应2-24h，产物为Ⅱa，收率为92.4％；2)将Ⅱa2g和1-5倍的苯硫酚，0.1-1倍的咪唑，以N-甲基吡咯烷酮为溶剂，在0℃，反应5-25h，产物为Ⅱb产率为89.2％；3)将Ⅱb和1-5倍的(2-甲基丁-3-烯-2-基)碳酸异丁酯，三苯基膦为催化剂，THF溶液中，-20～0℃反应12h得到Ⅱc产率为95.6％；4)将Ⅱc2g加入2倍当量的醋酸酐和10倍的醋酸铵，甲醇中回流24小时得到产物Ⅱd产率为93.1％。反应方程式为：进一步由Ⅱd经生物酶制备得到异槲皮素衍生物(Ⅰ)，结构式如式如(Ⅰ)所示：其中：n＝1～5；R＝Glu、Rha。本专利技术的酶法包括：葡萄糖基转移酶和鼠李糖基转移酶中的一种或组合；添加的糖基为葡萄糖，UDP-葡萄糖，鼠李糖，UDP-鼠李糖。本专利技术的反应条件：反应缓冲液质量分数为0.05～1％的磷酸氢二钠——柠檬酸钠缓冲液或质量分数为0.9％的NaCl缓冲液；缓冲液的pH6～10，反应温度控制35～75℃，反应时间控制3～15小时，反应完成之后，抽滤烘干得到异槲皮素衍生物。本专利技术的异槲皮素衍生物的制备步骤优选为：1)将2g异槲皮素，2～3倍当量的醋酸酐，2～3倍的哌啶，于100～110℃反应10～15h，产物为Ⅱa。2)将Ⅱa2g和3～5倍的苯硫酚，0.5～1倍的咪唑，以N-甲基吡咯烷酮为溶剂，在0℃，反应5～15h，产物为Ⅱb。3)将Ⅱb和3～5倍的(2-甲基丁-3-烯-2-基)碳酸异丁酯，三苯基膦为催化剂，THF溶液中，-5～0℃反应12h得到Ⅱc。4)将Ⅱc2g加入2倍当量的醋酸酐和10倍的醋酸铵，甲醇中回流24小时得到产物Ⅱd。5)用生物酶处理Ⅱd制备异槲皮素衍生物的结构式如式(Ⅰ-1)所示：其中：n＝1～3；R＝Glu。本专利技术的异槲皮素衍生物原料由芦丁、槲皮素和异槲皮素植物提取物或/和生物酶转化衍生物。本专利技术的异槲皮素衍生物，既解决了芦丁和槲皮素溶解度差的问题，提高了异槲皮素衍生物的生物利用度，增加了异槲皮素衍生物的的疗效。本专利技术的一个目的是提供一种异槲皮素衍生物的制备方法。本专利技术的另一个目的是提供一种异槲皮素衍生物的衍生物在预防和治疗降压、舒张血管方面的应用。本专利技术的另一个目的是异槲皮素衍生物在心血管保护和降血脂方面的应用。本专利技术的另一个目的是提供一种异槲皮素衍生物的衍生物在抑菌方面的应用。本专利技术提供了一种药物组合物，本专利技术的药物组合包括上述的化合物及药学上可接受的盐、载体、赋形剂、稀释剂、媒介物或它们的组合。有益效果：本专利技术在异槲皮素上添加异戊二烯基后，在糖基转移酶作用下给异戊二烯基化异槲皮素增加糖基基团，得到了异槲皮素衍生物，增加了异槲皮素衍生物的溶解性。本专利技术的异槲皮素衍生物，既解决了异槲皮素溶解度差的问题，又增强了异槲皮素的功效，在清除自由基、抗炎、抑菌是异槲皮素的3-5倍，提高了异槲皮素衍生物的生物利用度。说明书附图图1HPLC法测定异槲皮素衍生物在水中的溶解度。图2异槲皮素衍生物的衍生物清除自由基的能力。图3异槲皮素衍生物的HPLC图。结合具体实施例子来具体说明本
技术实现思路
，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下面的实施例子。实施例16-异戊二烯基取代异槲皮素衍生物的制备1)将2g异槲皮素，3-4倍当量的醋酸酐，1-2倍的吡啶，于100-140℃反应15h，产物为Ⅲa，收率为90.5％；2)将Ⅲa2g和3倍的苯硫酚，0.1-1倍的咪唑，以N-甲基吡咯烷酮为溶剂，在0℃，反应4-20h，产物为Ⅲb产率为85.1％；3)将Ⅲb和2-4倍的(2-甲基丁-3-烯-2-基)碳酸异丁酯，三苯基膦为催化剂，THF溶液中，-5-0℃反应12h得到Ⅲc产率为92.1％；4)将Ⅲc2g加入2倍当量的醋酸酐和10倍的醋酸酐，甲醇中回流24小时得到产物Ⅲd产率为88.0％。实施例2异戊二烯基化异槲皮素衍生物糖基化以6-异戊二烯基取代异槲皮素衍生物为原料，反应缓冲液为质量分数为0.05％的磷酸氢二钠——柠檬酸钠缓冲液，缓冲液的pH8，反应温度65℃，反应时间控制18～24小时。在反应体系中加入葡萄糖基转移酶，酶的质量分数为投入6-异戊二烯基取代异槲皮素衍生物的25～30％，得到异槲皮素衍生物。在该反应体系中，异槲皮素衍生物的摩尔收率95.8％，反应完成之后，抽滤烘干得到异槲皮素衍生物。异槲皮素衍生物HPLC见图3。实施例3异槲皮素衍生物的溶解度和溶出速率测定1、溶解度的测定化合物溶解能力的大小直接影响到药物在溶液体系和细胞体系的应用。因为异槲皮素衍生物在水溶液中稳定，所以我们利用紫外分光光度法对饱和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于清除自由基的异槲皮素衍生物的制备，其特征在于：所述异槲皮素衍生物的结构式如式(Ⅰ)所示：/n

【技术特征摘要】
1.一种用于清除自由基的异槲皮素衍生物的制备，其特征在于：所述异槲皮素衍生物的结构式如式(Ⅰ)所示：



其中：n＝1～5；R＝Glu、Rha；
所述异槲皮素衍生物制备原料为芦丁、槲皮素和异槲皮素植物提取物；
所述的异槲皮素衍生物的反应步骤为：
1)将2g异槲皮素，2-5倍当量的醋酸酐，2-4倍的哌啶，于100-120℃反应2-24h，产物为Ⅱa；
2)将Ⅱa2g和1-5倍的苯硫酚，0.1-1倍的咪唑，以N-甲基吡咯烷酮为溶剂，在0℃，反应5-25h，产物为Ⅱb；
3)将Ⅱb和1-5倍的(2-甲基丁-3-烯-2-基)碳酸异丁酯，三苯基膦为催化剂，THF溶液中，-20-0℃反应12h得到Ⅱc；
4)将Ⅱc2g加入2倍当量的醋酸酐和10倍的醋酸铵，甲醇中回流24小时得到产物Ⅱd；
5)用生物酶处理Ⅱd制备异槲皮素衍生物；
所述生物酶包括：鼠李糖苷酶，葡萄糖苷酶，葡萄糖苷转移酶。


2.根据权利要求1所述的一种用于清除自由基的异槲皮素衍生物的制备，其特征在于：所述的异槲皮素衍生物的制备步骤优选为：
1)将2g异槲皮素，2～3倍当量的醋酸酐，2～3倍的哌啶，于100～110℃反应10～15h，产物为Ⅱa；
2)将Ⅱa2g和3～5倍的苯硫酚，0.5～1...

【专利技术属性】
技术研发人员：张才来，
申请(专利权)人：张才来，
类型：发明
国别省市：广东;44