一种用于降血脂的木犀草素衍生物制备制造技术

本发明专利技术提供了一种用于降血脂的木犀草素衍生物的制备；所述的木犀草素衍生物的合成步骤是在木犀草素5’位上连接异戊二烯基基团，然后在6’羟基上进行糖基化反应得到木犀草素糖基化衍生物，最后对木犀草素糖基化的衍生物上的糖基进行酰基化反应，可以制备出高溶解度和高生物活性的木犀草素衍生物；本发明专利技术的木犀草素衍生物在降低胆固醇引起的动脉粥样硬化，增强毛细血管的舒张作用等方面的应用优于木犀草素。

Preparation of luteolin derivative for lowering blood lipid

【技术实现步骤摘要】
一种用于降血脂的木犀草素衍生物制备
本专利技术涉及一种用于降血脂的木犀草素衍生物制备，以及作为降低胆固醇引起的动脉粥样硬化，增强毛细血管的舒张的药物，属于医药领域。技术背景木犀草素(luteolin)是一种具有代表性的四羟基天然黄酮类化合物，多以糖苷的形式存在于多种植物中，以全叶青兰、辣椒、野菊花、金银花、紫苏中含量较高。木犀草素具有良好的抗炎、抗过敏及抑制病毒的效果，可治疗咳嗽、咳痰、支气管哮喘等多种呼吸系统疾病，并能有效抑制PDE、SARS、HIV病毒。现有技术还发现木犀草素可有效减少心血管疾病的发生，并具有一定的脑保护作用。异戊二烯基，在生物合成中具有重要的作用。异戊烯基侧链的存在增加了黄酮类化合物的亲脂性和生物导向性，使其在生物体内更易透过细胞膜到达作用目标，大大提高了黄酮类化合物的药用价值。但因木犀草素在水中和缓冲溶液中的溶解度低，使木犀草素的生物利用度低，效果不明显。
技术实现思路
木犀草素具有上述多种药用价值，但其单体难溶于水，作为药物直接使用时，在人体内的生物利用度低，难以充分发挥其生物功能。因此本专利技术对木犀草素进行修饰，如：将木犀草素进行糖基化，引入羧基和氨基基团增加木犀草素与水的范德华力，增加木犀草素的溶解度和生物利用度。是未引入糖基和羧基的木犀草素的3000倍以上，显著增加木犀草素的疗效。本专利技术在木犀草素引入异戊二烯基基团，使木犀草素在降低胆固醇引起的动脉粥样硬化，增强毛细血管的舒张的治疗的功效显著增强。1)将2g木犀草素，2～4倍当量的TsCl，2～3倍的哌啶，溶剂为THF，于35～40℃反应2～12h，产物为Ⅱa，收率85～93％。2)将Ⅱa2g和1～3倍的苯硫酚，0.1～1倍的咪唑，以N～甲基吡咯烷酮为溶剂，在0℃，反应5～15h，产物为Ⅱb，收率95～97％。3)将Ⅱb和1～5倍的(2-甲基丁-3-烯-2-基)碳酸异丁酯，三苯基膦为催化剂，THF溶液中，-20～0℃反应12h得到Ⅱc，收率65～69％。4)将Ⅱc2g加入2倍当量的醋酸酐和8倍的醋酸铵，甲醇中回流20h得到产物Ⅱd，收率96～98％。进一步由Ⅱd经生物酶制备得到糖基化木犀草素Ⅱe；进一步由Ⅱe与酸酐反应得到木犀草素衍生物，其结构式为式(Ⅰ)：n为1，2，3。反应方程式为：n为1，2，3。本专利技术生物酶包括：鼠李糖苷酶，葡萄糖苷酶，葡萄糖苷转移酶，得到糖基化木犀草素。本专利技术的酸酐为丁二酸酐，戊二酸酐和己二酸酐及其衍生物。本专利技术的生物酶的反应条件：反应缓冲液质量分数为0.05～1％的磷酸氢二钾——柠檬酸钾缓冲液或质量分数为0.9％的KCl缓冲液，缓冲液的Ph8～10，添加酶的量是木犀草素的20～30％，反应温度控制35～75℃，反应时间控制1～24小时，反应完成之后，抽滤烘干得到木犀草素衍生物。本专利技术的木犀草素衍生物的原料由木犀草素，木犀草素-7-O-葡萄糖苷，木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷等植物提取物或/和转化物及其衍生物制得。本专利技术的木犀草素衍生物的制备步骤优选为：1)将2g木犀草素，2～4倍当量的TsCl，2～3倍的哌啶，溶剂为THF，于35～40℃反应2～12h，产物为Ⅱa。2)将Ⅱa2g和2～3倍的苯硫酚，0.3～0.5倍的咪唑，以N-甲基吡咯烷酮为溶剂，在0℃，反应5～15h，产物为Ⅱb。3)将Ⅱb和2～5倍的(2-甲基丁-3-烯-2-基)碳酸异丁酯，三苯基膦为催化剂，THF溶液中，0℃反应12h得到Ⅱc。4)将Ⅱc2g加入2倍当量的醋酸酐和8倍的醋酸铵，甲醇中回流20h得到产物Ⅱd。5)用生物酶处理Ⅱd制备糖基化木犀草素(Ⅱe)。6)(Ⅱe)与酸酐反应得到木犀草素衍生物(Ⅰ-1)。n为1，2。本专利技术的一个目的是提供一种木犀草素衍生物的制备方法。本专利技术的另一个目的是提供一种木犀草素衍生物在预防和治疗降压、降血脂方面的应用。本专利技术的另一个目的是提供一种木犀草素衍生物在增强毛细血管的舒张的应用与治疗。本专利技术提供了一种药物组合物，本专利技术的药物组合包括上述的化合物及药学上可接受的盐、载体、赋形剂、稀释剂、媒介物或它们的组合。本专利技术的主要优点在于：本专利技术的木犀草素衍生物，既解决了木犀草素溶解度差的问题，又增强了木犀草素的功效，提高了木犀草素衍生物的生物利用度，增加了木犀草素衍生物的疗效。说明书附图图1木犀草素衍生物Ⅱe的HPLC图。图2木犀草素衍生物降血糖曲线图。图3木犀草素衍生物胰岛素耐量曲线图。结合具体实施例子来具体说明本
技术实现思路
，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下面的实施例子。实施例1木犀草素衍生物Ⅱd的制备1)将2g木犀草素，2～4倍当量的TsCl，2～3倍的哌啶，溶剂为THF，于35～40℃反应2～12h，产物为Ⅱa，收率92.1％。2)将Ⅱa2g和1～3倍的苯硫酚，0.1～1倍的咪唑，以N～甲基吡咯烷酮为溶剂，在0℃，反应5～15h，产物为Ⅱb，收率96.5％。3)将Ⅱb和1～5倍的(2-甲基丁-3-烯-2-基)碳酸异丁酯，三苯基膦为催化剂，THF溶液中，-20～0℃反应12h得到Ⅱc，收率67.9％。4)将Ⅱc2g加入2倍当量的醋酸酐和8倍的醋酸铵，甲醇中回流20h得到产物Ⅱd，收率96.8％。反应方程式为：实施例2木犀草素衍生物Ⅱd的糖基化以木犀草素衍生物Ⅱd为原料，反应缓冲液为质量分数为0.05％的磷酸氢二钾——柠檬酸钾缓冲液，缓冲液的pH8.6，反应温度55～60℃，反应时间控制12～18h。在反应体系中加入葡萄糖基转移酶，酶的质量分数为投入木犀草素衍生物Ⅱd的25～30％。在该反应体系中，木犀草素衍生物Ⅱe的摩尔收率88.5％，反应完成之后，抽滤烘干得到木犀草素衍生物。木犀草素衍生物Ⅱe的HPLC见图1。实施例3木犀草素衍生物Ⅱe的酰基化将2g木犀草素衍生物Ⅱe溶解在25mL吡啶中。然后在室温搅拌下将1.5g丁二酸酐加入吡啶溶液中。4h后反应完全，加入100mL水，得到浅黄色固体，烘干得到固体质量1.56g。实施例4木犀草素衍生物对营养性肥胖C57BL/6J小鼠糖脂代谢的影响1.1实验材料1.1.1实验动物及饲养环境C57BL/6J小鼠，雄性，SPF级，4周龄50只，由中山大学实验动物中心提供。许可证号：SCXK(粤)2009～0004。饲养条件：温度20～25℃,湿度55±1％,12h/12h光照黑暗循环，24h自由饮食饮水。1.2实验方法1.2.l动物模型的制备、分组与给药C57BL/6J雄性小鼠，随机选取10只为正常对照组，喂以普通标准饲料(饲料配方：粗蛋白18.5％，粗脂肪4.5％，碳水化合物61％。能量比：粗蛋白21％，粗脂肪11％，碳本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于降血脂的木犀草素衍生物制备，其特征在于：所述木犀草素衍生物结构式，如式(Ⅰ)所示：/n

【技术特征摘要】
1.一种用于降血脂的木犀草素衍生物制备，其特征在于：所述木犀草素衍生物结构式，如式(Ⅰ)所示：



n为1，2，3；
所述的木犀草素衍生物制备原料为：木犀草素，木犀草素-7-O-葡萄糖苷，木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷；
所述的木犀草素衍生物制备步骤为：
1)将2g木犀草素，1～6倍当量的TsCl，2～5倍的哌啶，溶剂为THF，于35～40℃反应2～12h，产物为Ⅱa；
2)将Ⅱa2g和1～3倍的苯硫酚，0.1～1倍的咪唑，以N-甲基吡咯烷酮为溶剂，在-5～0℃，反应5～15h，产物为Ⅱb；
3)将Ⅱb和1～5倍的(2-甲基丁-3-烯-2-基)碳酸异丁酯，三苯基膦为催化剂，THF溶液中，-20～0℃反应12h得到Ⅱc；
4)将Ⅱc2g加入2倍当量的醋酸酐和8倍的醋酸铵，甲醇中回流20h得到产物Ⅱd；
5)用生物酶处理Ⅱd制备糖基化木犀草素(Ⅱe)；
6)(Ⅱe)与酸酐反应得到木犀草素衍生物，其结构式为式(Ⅰ)；
所述的生物酶包括：鼠李糖苷酶，葡萄糖苷酶，葡萄糖苷转移酶；
所述的酸酐为丁二酸酐，戊二酸酐和己二酸酐及其衍生物。


2.根据权利要求1所述的一种用于降血脂的木犀草素衍生物制备，其特征在于：所述木犀草素衍生物的制备步骤优选为：
1)将2g木犀草素，2～4倍当量的TsCl，2～3倍的哌啶，溶剂为THF，于35～40℃反应2～12h，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张才来，
申请(专利权)人：张才来，
类型：发明
国别省市：广东;44