检测COVID-19的荧光免疫层析装置及其使用方法制造方法及图纸

本发明专利技术公开了一种检测新型冠状病毒COVID‑19的荧光免疫层析装置及其使用方法，本发明专利技术的荧光免疫层析装置实现了灵敏度高、特异性强，准确性高，检测灵敏度可达10pg/ml，而且检测速度快、操作简便，便于携带，对人员要求低，不需由专业人员操作，检测成本低，可应用于医院、机场、海关、疾控中心等多种场所的初步筛查，检测时间短（10‑15分钟），为疑似患者排查和无症状感染者筛查提供更简便、更快速的现场检测手段，从而及早预防疫情扩散。

Fluorescence Immunochromatography for covid-19 and its application

【技术实现步骤摘要】
检测COVID-19的荧光免疫层析装置及其使用方法
本专利技术涉及了生物检测
，特别是涉及了一种检测新型冠状病毒COVID-19的荧光免疫层析装置及其使用方法。
技术介绍
2019年12月中旬，在中国武汉首次发现了病因不明的非典型肺炎(atypicalpneumonia)，科学研究表明，其是由一种新型冠状病毒COVID-19引发的。新型冠状病毒COVID-19感染的肺炎以发热、乏力、干咳等为主要表现，少数患者伴有鼻塞、流涕、腹泻等上呼吸道和消化道症状。重症病例多在1周后出现呼吸困难，严重者快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍。迄今COVID-19还没有针对性的特效药。一些个案报道的治疗药物仍需更多的临床实践证明效果，相关疫苗的研发也在开展中，但距离临床应用尚需时间。当务之急是尽快研究有效的诊断试剂，早诊断、早隔离、切断传播途径，控制疫情蔓延。目前针对新型冠状病毒COVID-19的检测主要是以PCR为基础的病毒核酸检测，检测原理就是以病毒独特的基因序列为检测靶标，通过PCR扩增，使我们选择的这段靶标DNA序列指数级增加，每一个扩增出来的DNA序列，都可与预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号，扩增出来的靶基因越多，累积的荧光信号就越强。而没有病毒的样本中，由于没有靶基因扩增，因此就检测不到荧光信号增强。所以，核酸检测，其实就是通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有病毒核酸。新型冠状病毒COVID-19核酸检测有较高的特异性和灵敏度，但是该检测方法对技术要求高，标本需要特殊处理，要求具备PCR扩增仪及凝胶电泳等专业的仪器设备，对新型冠状病毒的检测用时长，需专业技术人员操作和判断检测结果，无法应用于社区医院、海关、疾控中心等基层的早期初步筛查。因此，亟需一种更早期、更灵敏、更快捷、更有效的检测新型冠状病毒COVID-19的诊断试剂，进行早期鉴别诊断。
技术实现思路
为了弥补已有技术的缺陷，本专利技术提供一种检测新型冠状病毒COVID-19的荧光免疫层析装置及其使用方法，实现了灵敏度高、特异性强，而且速度快、操作简便，可应用于社区医院、机场、海关、疾控中心等多种场所的初步筛查，能够在15分钟内判断结果，为疑似患者排查和无症状感染者筛查提供更简便、更快速的现场检测手段，从而及早预防疫情扩散。本专利技术所要解决的技术问题通过以下技术方案予以实现：根据本专利技术的一方面，提供了一种检测新型冠状病毒COVID-19的荧光免疫层析装置，包括试纸条，所述试纸条包括依次相连的样品垫、结合垫、反应垫和吸水垫；所述结合垫上包被有铕微球标记的新型冠状病毒NP蛋白单克隆抗体和铕微球标记的兔IgG抗体，所述铕微球标记中所采用的铕微球的粒径为550-650nm，所述新型冠状病毒NP蛋白单克隆抗体和兔IgG抗体之间的质量浓度之比为（1-3）：1；所述反应垫上沿样品流动方向依次设有检测线和质控线，所述检测线上包被有新型冠状病毒NP蛋白单克隆抗体。进一步地，所述反应垫为Millipore180硝酸纤维素膜。进一步地，所述试纸条还包括承载所述样品垫、结合垫、反应垫和吸水垫的底板；所述样品垫、结合垫、反应垫和吸水垫之间相互交叠连接；所述质控线上包被有羊抗兔IgG抗体。进一步地，所述新型冠状病毒NP蛋白单克隆抗体为SARS冠状病毒NP蛋白单克隆抗体。进一步地，所述荧光免疫层析装置还包括时间分辨荧光免疫分析仪。进一步地，所述样品垫是经过样品垫处理液浸渍处理的玻璃纤维膜或无纺布或滤纸，所述样品垫处理液含有如下组分：Tween20、Tritonx-405、Casein、BSA、PEG-20000和NaCl。进一步地，所述样品垫处理液含有如下质量分数的组分：0.05%-0.3%Tween20、0.4%-0.6%Tritonx-405、0.4%-0.6%Casein、0.4%-0.6%BSA、0.05%-0.2%PEG-20000和1%-3%NaCl。进一步地，所述样品垫处理液的pH为8.4-8.6。进一步地，所述荧光免疫层析装置还包括样品稀释液，所述样品稀释液为含有体积分数0.05%-0.2%Tween20和体积分数0.4%-0.6%Casein的0.1MPBS溶液。根据本专利技术的另一方面，提供了上述荧光免疫层析装置的使用方法，包括如下步骤：将样品加入到样品稀释液中进行处理，得到样品溶液；将适量样品溶液添加到试纸条的样品垫上，用时间分辨荧光免疫分析仪进行检测。进一步地，所述样品包括鼻咽拭子、痰液、肺泡灌洗液、血液、尿液中的至少一种。进一步地，所述样品包括鼻咽拭子、痰液、肺泡灌洗液、血液、尿液中的至少两种。本专利技术具有如下有益效果：本专利技术中，通过在铕微球标记中采用粒径为550-650nm的铕微球，所述新型冠状病毒NP蛋白单克隆抗体和兔IgG抗体之间的质量浓度之比为（1-3）：1，可以增加抗原抗体的结合效率，有效提高荧光免疫层析检测新型冠状病毒COVID-19的灵敏度，可实现新型冠状病毒COVID-19的现场快速鉴别。本专利技术中，设计了样品垫处理液方案及样品稀释液方案，实现了对鼻咽拭子、痰液、肺泡灌洗液、血液、尿液等多种样品类型的检测；将各种样品分别用本申请特定的样品稀释液进行处理，同时样品垫采用本申请中特定样品垫处理液进行处理，可以使得滴加到试纸条上的各样品溶液成分相对一致，容易和试纸条的反应系统匹配，有效降低了样品对检测的干扰，实现同种试纸条检测多样本类型，可以让检测时间延长，可以有效检出3-10天发病的病人，可有助于提高新型冠状病毒的检出率，避免“假阴性”结果，进一步提升检查准确率。本专利技术的荧光免疫层析装置实现了灵敏度高、特异性强，准确性高，检测灵敏度可达10pg/ml，而且检测速度快、操作简便，便于携带，对人员要求低，不需由专业人员操作，检测成本低，可应用于医院、机场、海关、疾控中心等多种场所的初步筛查，检测时间短（10-15分钟），为疑似患者排查和无症状感染者筛查提供更简便、更快速的现场检测手段，从而及早预防疫情扩散。具体实施方式本专利技术中所用原料、设备，若无特别说明，均为本领域的常用原料、设备；本专利技术中所用方法，若无特别说明，均为本领域的常规方法。如无特殊说明，本说明书中的术语的含义与本领域技术人员一般理解的含义相同，但如有冲突，则以本说明书中的定义为准。本文中“包括”、“包含”、“含”、“含有”、“具有”或其它变体意在涵盖非封闭式包括，这些术语之间不作区分。术语“包含”是指可加入不影响最终结果的其它步骤和成分。术语“包含”还包括术语“由…组成”和“基本上由…组成”。本专利技术的组合物和方法/工艺包含、由其组成和基本上由本文描述的必要元素和限制项以及本文描述的任一的附加的或任选的成分、组分、步骤或限制项组成。在说明书和权利要求书中使用的涉及组分量、工艺条件等的所有数值或表述在所有情形中均应理解被“约”修饰。涉及相同组分或性质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测新型冠状病毒COVID-19的荧光免疫层析装置，包括试纸条，所述试纸条包括依次相连的样品垫、结合垫、反应垫和吸水垫；其特征在于，所述结合垫上包被有铕微球标记的新型冠状病毒NP蛋白单克隆抗体和铕微球标记的兔IgG抗体，所述铕微球标记中所采用的铕微球的粒径为550-650nm，所述新型冠状病毒NP蛋白单克隆抗体和兔IgG抗体之间的质量浓度之比为（1-3）：1；所述反应垫上沿样品流动方向依次设有检测线和质控线，所述检测线上包被有新型冠状病毒NP蛋白单克隆抗体；所述新型冠状病毒NP蛋白单克隆抗体为SARS冠状病毒NP蛋白单克隆抗体。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测新型冠状病毒COVID-19的荧光免疫层析装置，包括试纸条，所述试纸条包括依次相连的样品垫、结合垫、反应垫和吸水垫；其特征在于，所述结合垫上包被有铕微球标记的新型冠状病毒NP蛋白单克隆抗体和铕微球标记的兔IgG抗体，所述铕微球标记中所采用的铕微球的粒径为550-650nm，所述新型冠状病毒NP蛋白单克隆抗体和兔IgG抗体之间的质量浓度之比为（1-3）：1；所述反应垫上沿样品流动方向依次设有检测线和质控线，所述检测线上包被有新型冠状病毒NP蛋白单克隆抗体；所述新型冠状病毒NP蛋白单克隆抗体为SARS冠状病毒NP蛋白单克隆抗体。


2.如权利要求1所述的荧光免疫层析装置，其特征在于，所述反应垫为Millipore180硝酸纤维素膜。


3.如权利要求1所述的荧光免疫层析装置，其特征在于，所述试纸条还包括承载所述样品垫、结合垫、反应垫和吸水垫的底板；所述样品垫、结合垫、反应垫和吸水垫之间相互交叠连接；所述质控线上包被有羊抗兔IgG抗体。


4.如权利要求1所述的荧光免疫层析装置，其特征在于，所述荧光免疫层析装置还包括时间分辨荧光免疫分析仪。


5.如权利要求1所述的荧光免疫层析装置，其特征在于，所述样品垫是经过样品垫处理液浸...

【专利技术属性】
技术研发人员：周宏伟，吴玉章，温坤，陈嘉慧，王佑春，赵晨燕，黄维金，梁昊宇，聂建辉，颜文豪，陈奕耀，陈立，许稳健，禄亚峰，潘晓妹，王云燕，赵晋，冯舒婷，袁克湖，魏世塨，
申请(专利权)人：深圳市易瑞生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44