一种转座酶突变体、融合蛋白、其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种转座酶突变体、融合蛋白、其制备方法和应用，涉及生物技术领域，所述转座酶突变体相较于野生型转座酶具有至少一种突变形式，所述野生型转座酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，该转座酶突变体的稳定性高，能长期于‑20℃的条件下储存，可以显著降低储存成本，使转座酶或其构建的融合蛋白的使用更方便，简化实验流程。

A transposase mutant, fusion protein, its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种转座酶突变体、融合蛋白、其制备方法和应用
本专利技术涉及生物
，具体而言，涉及一种转座酶突变体、融合蛋白、其制备方法和应用。
技术介绍
随着体外转座相关技术的大量应用，新型转座酶的开发和相关应用也越来越多，用转座酶介导的各种新型技术来替代旧技术的案例层出不穷。转座酶不仅可以应用于一般的二代测序建库过程，而且在多组学研究中的应用也越来越广泛。但现有的转座酶蛋白存在一些缺陷，其蛋白稳定性较差，于-20℃存放时，容易出现活性显著降低或丧失的情况，需要相对苛刻的保存条件，通常将其与经过专门设计序列的核酸共孵育形成复合体来提高其稳定性，这种使用条件上的限制通常提高了实验本身的成本，并且增加了实验整体流程的复杂程度。鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供转座酶突变体、融合蛋白、分离的核酸、载体、宿主细胞、融合蛋白的制备方法、用于构建测序文库的试剂盒、转座酶突变体或融合蛋白在DNA建库中的应用以及融合蛋白在染色质共沉淀中的应用。本专利技术是这样实现的：>第一方面，实施例提本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种转座酶突变体，其特征在于，所述转座酶突变体相较于野生型转座酶具有如下突变中的至少一种或多种的组合：R27T、M56G、Y41R、E190A、K120Q以及E146N；所述野生型转座酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；/n优选地，所述转座酶突变体相较于所述野生型转座酶具有如下(1)～(3)所示突变组合中的任意一种；/n(1)R27T和M56G；/n(2)Y41R和M56G；/n(3)K120Q和E146N。/n

【技术特征摘要】
1.一种转座酶突变体，其特征在于，所述转座酶突变体相较于野生型转座酶具有如下突变中的至少一种或多种的组合：R27T、M56G、Y41R、E190A、K120Q以及E146N；所述野生型转座酶的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示；
优选地，所述转座酶突变体相较于所述野生型转座酶具有如下(1)～(3)所示突变组合中的任意一种；
(1)R27T和M56G；
(2)Y41R和M56G；
(3)K120Q和E146N。


2.根据权利要求1所述的转座酶突变体，其特征在于，所述转座酶突变体相较于野生型转座酶还具有突变E54K和/或K120L；
优选地，所述转座酶突变体相较于野生型转座酶具有如下(4)和/或(5)所示突变组合：
(4)Y41R、E54K和M56G；
(5)K120L和E190A。


3.一种融合蛋白，其特征在于，其包括权利要求1或2所述的转座酶突变体；
优选地，所述融合蛋白还包括用于结合免疫球蛋白Fc段的结合蛋白，所述结合蛋白与所述转座酶突变体相连；
优选地，所述结合蛋白包括金黄色葡萄球菌A蛋白或其变体、链球菌G蛋白或其变体和链球菌L蛋白或其变体中的至少一种；
优选地，所述结合蛋白包括金黄色葡萄球菌A蛋白或其变体；
优选地，所述结合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNo.2或3所示；
优选地，所述结合蛋白位于所述融合蛋白的氨基酸序列的N端，所述转座酶突变体位于所述融合蛋白的氨基酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：张志毅，章瑞程，贺婷，杜翔斐，钟淑瑶，
申请(专利权)人：广东菲鹏生物有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44