一种活性增强的酮还原酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种活性增强的酮还原酶突变体及其应用，属于生物技术领域，其源于Lactobacillus parabuchneri的野生型酮还原酶，表现出使底物(例如3‑二甲胺基‑1‑(2‑噻吩基)‑1‑丙酮盐酸盐)向产物(例如S‑3‑二甲胺基‑1‑(2‑噻吩基)‑1‑丙醇)转化速率增加的酮还原酶。所述酮还原酶突变体，与SEQ ID NO.7的野生型酮还原酶相比表现出更强的催化活性。本发明专利技术突变体可以通过使编码该酶的体外重组、多核苷酸诱变、DNA改组、易错PCR和定向进化方法等获得。

An activity enhanced keto reductase mutant and its application

【技术实现步骤摘要】
一种活性增强的酮还原酶突变体及其应用
本专利技术涉及一种酶、生物催化方法及其应用，特别是涉及一种活性增强的酮还原酶突变体及其应用，属于生物

技术介绍
酮还原酶是一种多用途催化剂，通过醛或酮的对映体选择性还原成对应醇；(R)特异性酮还原酶与(S)特异性酮还原酶具有不同特性，并且这些催化剂在光学活性醇的工业合成中被越来越频繁地用到；旋光性是许多医药和农药活性化合物选择性作用的必要条件，在一些情况下，一个对映体具有有益的药物活性，另一个对映体却具有基因毒性作用；因此，在药用和农药用活性化合物的合成中，需要使用具有所要求的立体特异性的催化剂合成光学活性醇。度洛西汀是一种药物活性化合物，旨在用于抑郁症和尿失禁的适应症领域；S-3-二甲胺基-1-(2-噻吩基)-1-丙醇是一种重要的手性醇，是度洛西汀合成中的组成单元；一些文献和专利中描述了度洛西汀的合成路线；这些合成路线的缺点是先合成产生外消旋醇混合物，需要随后通过与光学活性抗衡离子形成盐，将外消旋物转化成非对映体混合物来拆分外消旋物，然后将非对映体物理分离；由于固体和液体的重复分离，这导本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种活性增强的酮还原酶突变体，其特征在于，其源于Lactobacillusparabuchneri的野生型酮还原酶，能将3-二甲胺基-1-(2-噻吩基)-1-丙酮盐酸盐转化生成S-3-二甲胺基-1-(2-噻吩基)-1-丙醇，与野生型序列相比具有更高的醇脱氢酶活性，与SEQID NO.8具有90％以上相似性且具有以下特征中的一个或多个突变：K49R，A68T，E101D，F147E，T152A，S169V，A235S，其序列为SEQ ID NO.6。/n

【技术特征摘要】
1.一种活性增强的酮还原酶突变体，其特征在于，其源于Lactobacillusparabuchneri的野生型酮还原酶，能将3-二甲胺基-1-(2-噻吩基)-1-丙酮盐酸盐转化生成S-3-二甲胺基-1-(2-噻吩基)-1-丙醇，与野生型序列相比具有更高的醇脱氢酶活性，与SEQIDNO.8具有90％以上相似性且具有以下特征中的一个或多个突变：K49R，A68T，E101D，F147E，T152A，S169V，A235S，其序列为SEQIDNO.6。


2.根据权利要求1所述的一种活性增强的酮还原酶突变体，其特征在于，其酮还原酶活性比野生型酮还原酶的活性至少增强2-10倍。


3.一种多核苷酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁雪峰，李佳松，
申请(专利权)人：南京朗恩生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32