【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】蛋白质药物与P/A肽的缀合物本专利技术涉及蛋白质药物与两种或更多种P/A肽的缀合物，以及包含所述缀合物的药物组合物。本专利技术的缀合物表现出相比相应暴露的蛋白质药物而有利减少的免疫原性，以及有利的安全性和耐受性特性，这使得其特别适合用于治疗用途。所述缀合物还显示相比相应暴露的蛋白质药物的增加的血浆半衰期以及从而延长的作用持续时间，这允许减少给药频率以及因此减少副作用负担。本专利技术还提供了制备这样的缀合物的方法，以及用作制备所述缀合物中的合成中间体的活化的P/A肽。许多生物制剂如蛋白质药物的一个主要缺点是其经肾脏滤过而从血液循环中迅速清除，这极大地限制了其治疗功效。然而，通过将表观分子尺寸扩展到超过肾小球的孔径，治疗性蛋白质的血浆半衰期可以延长到医学上有用的几天的范围。实现这种效果的一种策略是将生物制剂与合成的聚合物聚乙二醇(PEG)进行化学缀合。这已导致产生了几种获批的药物，例如PEG-干扰素α2aPEG-G-CSFPEG化的抗TNFα-Fab片段以及最近的PEG化的干扰素β-1a然而，“PEG化”技术有几个缺点：尤其是PEG不是生物可降解的，这会引起副作用，如连续治疗后肾上皮的空泡化；参见例如，Gaberc-Porekar(2008)CurrOpinDrugDiscovDevel11:242-50；Knop(2010)AngewChemIntEdEngl49:6288-308；或Armstrongin:Veronese(Ed.),“PEGylatedProteinDrugs:BasicScienceandClinicalApplicati...
【技术保护点】
1.蛋白质药物与两种或更多种P/A肽的缀合物，/n其中每种P/A肽独立地为肽R
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170621 EP 17177256.91.蛋白质药物与两种或更多种P/A肽的缀合物，
其中每种P/A肽独立地为肽RN-(P/A)-RC，
其中(P/A)是由约7至约1200个氨基酸残基组成的氨基酸序列，其中(P/A)中至少80％数量的氨基酸残基独立地选自脯氨酸和丙氨酸，其中(P/A)包含至少一个脯氨酸残基和至少一个丙氨酸残基，
其中RN是与(P/A)的N端氨基连接的保护基团，或者RN不存在，并且
其中RC是氨基酸残基，其经由其氨基与(P/A)的C端羧基结合，且在其氨基和其羧基之间包含至少2个碳原子，
其中每种P/A肽经由所述P/A肽的C端氨基酸残基RC的羧基和所述蛋白质药物的游离氨基形成的酰胺键与所述蛋白质药物缀合，并且
其中与所述P/A肽缀合的游离氨基中的至少一个不是所述蛋白质药物的N端α-氨基。
2.如权利要求1所述的缀合物，其中(P/A)是由约8至约400个氨基酸残基组成的氨基酸序列，其中(P/A)中至少85％数量的氨基酸残基独立地选自脯氨酸和丙氨酸，其中(P/A)中至少95％数量的氨基酸残基独立地选自脯氨酸、丙氨酸、甘氨酸和丝氨酸，并且其中(P/A)包含至少一个脯氨酸残基和至少一个丙氨酸残基。
3.如权利要求1或2所述的缀合物，其中(P/A)是由10至60个独立地选自脯氨酸、丙氨酸、甘氨酸和丝氨酸的氨基酸残基组成的氨基酸序列，其中(P/A)中至少95％数量的氨基酸残基独立地选自脯氨酸和丙氨酸，并且其中(P/A)包含至少一个脯氨酸残基和至少一个丙氨酸残基。
4.如权利要求1-3中任一项所述的缀合物，其中(P/A)是由15至45个独立地选自脯氨酸和丙氨酸的氨基酸残基组成的氨基酸序列，其中(P/A)包含至少一个脯氨酸残基和至少一个丙氨酸残基。
5.如权利要求1-4中任一项所述的缀合物，其中(P/A)中包含的脯氨酸残基数量与(P/A)中包含的氨基酸残基总数量的比例为≥10％且≤70％，优选≥20％且≤50％，更优选≥25％且≤40％。
6.如权利要求1-5中任一项所述的缀合物，其中(P/A)由以下组成：(i)两个或更多个独立地选自AAPA和APAP的部分序列，和(ii)任选地一个、两个或三个独立地选自脯氨酸和丙氨酸的其他氨基酸残基。
7.如权利要求1-6中任一项所述的缀合物，其中(P/A)由以下组成：(i)一个或多个部分序列AAPAAPAP，(ii)任选地一个或两个部分序列AAPA，和(iii)任选地一个、两个或三个独立地选自脯氨酸和丙氨酸的其他氨基酸残基。
8.如权利要求1所述的缀合物，其中(P/A)由以下组成：(i)序列ASPAAPAPASPAAPAPSAPA，(ii)序列APASPAPAAPSAPAPAAPSA，(iii)序列AASPAAPSAPPAAASPAAPSAPPA，(iv)任何上述序列的片段，或(v)两个或更多个上述序列的组合。
9.如权利要求1-8中任一项所述的缀合物，其中RN选自：甲酰基、-CO(C1-4烷基)、焦谷氨酰基和高焦谷氨酰基，其中所述-CO(C1-4烷基)中包含的烷基部分任选地被一个或两个独立地选自-OH、-O(C1-4烷基)、-NH(C1-4烷基)、-N(C1-4烷基)(C1-4烷基)和-COOH的基团取代，或者RN不存在。
10.如权利要求1-9中任一项所述的缀合物，其中RN选自：甲酰基、乙酰基、羟乙酰基、甲氧乙酰基、乙氧乙酰基、丙氧乙酰基、丙二酰基、丙酰基、2-羟丙酰基、3-羟丙酰基、2-甲氧丙酰基、3-甲氧丙酰基、2-乙氧丙酰基、3-乙氧丙酰基、琥珀酰基、丁酰基、2-羟丁酰基、3-羟丁酰基、4-羟丁酰基、2-甲氧丁酰基、3-甲氧丁酰基、4-甲氧丁酰基、甘氨酸甜菜碱酰基、戊二酰基、焦谷氨酰基和高焦谷氨酰基。
11.如权利要求1-9中任一项所述的缀合物，其中RN不存在。
12.如权利要求1-11中任一项所述的缀合物，其中RC是H2N-(C2-12烃基)-COOH，其中优选地，RC选自：H2N-(CH2)3-10-COOH、H2N-苯基-COOH和H2N-环己基-COOH，并且其中更优选地，RC选自：H2N-(CH2)4-COOH、H2N-(CH2)5-COOH、H2N-(CH2)6-COOH、H2N-(CH2)7-COOH、H2N-(CH2)8-COOH、
13.如权利要求1-11中任一项所述的缀合物，其中RC是丙氨酸或脯氨酸。
14.如权利要求1-13中任一项所述的缀合物，其中所述缀合物中包含的P/A肽采用无规卷曲构象。
15.如权利要求1-14中任一项所述的缀合物，其中所述缀合物中包含的所有P/A肽都是相同的。
16.如权利要求1-15中任一项所述的缀合物，其中与所述P/A肽缀合的游离氨基中的至少一个是所述蛋白质药物的赖氨酸残基的ε-氨基。
17.如权利要求1-16中任一项所述的缀合物，其中与所述P/A肽缀合的游离氨基选自：所述蛋白质药物的任何赖氨酸残基的ε-氨基、所述蛋白质药物或所述蛋白质药物的任何亚基的N端α-氨基，以及以上的任意组合。
18.如权利要求1-17中任一项所述的缀合物，其中所述缀合物由所述蛋白质药物和所述P/A肽以采用0.1-50的值的m(P/A肽)/m(蛋白质药物)比率组成，其中m(P/A肽)是所述缀合物中包含的所有P/A肽的部分(P/A)中的氨基酸残基的合并总数，并且其中m(蛋白质药物)是所述缀合物中包含的蛋白质药物中的氨基酸残基的总数。
19.如权利要求18所述的缀合物，其中m(P/A肽)/m(蛋白质药物)的比率采用0.5-5的值。
20.如权利要求1-19中任一项所述的缀合物，其中所述蛋白质药物是酶。
21.如权利要求1-20中任一项所述的缀合物，其中所述蛋白质药物选自：尿酸氧化酶、腺苷脱氨酶、嘌呤核苷磷酸化酶、L-苯丙氨酸降解酶、苯丙氨酸羟化酶、苯丙氨酸解氨酶、抗氧化剂酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、硫氰酸酶、有机磷酸酯降解酶、磷酸三酯酶、有机磷脱水酶、醇氧化性酶、醇脱氢酶、醇氧化酶、乙醛降解酶、醛脱氢酶、L-谷氨酰胺降解酶、谷氨酰胺酶、L-精氨酸降解酶、精氨酸酶、精氨酸脱亚胺酶、纤溶酶原激活酶、组织纤溶酶原激活剂、瑞替普酶、链激酶、尿激酶、纤溶酶原酶、安克洛酶、巴曲酶、胱硫醚-β-合成酶、高半胱氨酸硫内酯降解酶、对氧磷酶1、博来霉素水解酶、人血清HTase、人联苯水解酶样蛋白质、甲硫氨酸降解酶、甲硫氨酸酶、针对甲硫氨酸特异性工程化的胱硫醚-γ-裂解酶、高半胱氨酸降解酶、半胱氨酸降解酶、胱氨酸降解酶、透明质酸酶、α-葡糖苷酶、β-葡糖醛酸酶、β-半乳糖苷酶、α-半乳糖苷酶A、葡糖脑苷脂酶、伊米苷酶、针对P/A肽没有活性的广谱蛋白酶、ananain、comosain、奥克纤溶酶、乙酰胆碱降解酶、丁酰胆碱酯酶、乙酰胆碱酯酶、可卡因降解酶、可卡因酯酶、软骨素酶、胶原酶、N-乙酰基半乳糖胺-4-硫酸酯酶、艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶、α-L-艾杜糖醛酸酶、胆色素原、DNA酶、链道酶α、草酸降解酶、草酸脱羧酶、N-磺基葡糖胺磺基水解酶、乙酰辅酶Aα-氨基葡糖苷乙酰基转移酶、N-乙酰葡糖胺-6-硫酸酯酶、N-α-乙酰氨基葡糖苷酶、N-乙酰半乳糖胺-6-硫酸盐硫酸酯酶、三肽基肽酶1、磷酸甘油酸激酶、凝血因子IX、凝血因子VIII、凝血因子VIIa、凝血因子Xa、凝血因子IV、凝血因子XIII、对补体途径中的蛋白质具有特异性的蛋白酶、针对因子C3特异性工程化的膜型丝氨酸蛋白酶1形式、对VEGF或VEGF受体具有特异性的蛋白酶、膜型丝氨酸蛋白酶1的工程化形式、人血管紧张素转化酶2、RNA酶、豹蛙抗瘤酶、豹蛙酶、牛精液RNA酶、RNA酶T1、帚曲霉素、RNA酶P、肌动蛋白结合体、RNA酶T2、碱性磷酸酶、人组织非特异性碱性磷酸酶、asfotasealfa、天冬氨酰氨基葡糖苷酶、天冬氨酸酰化酶、α-甘露糖苷酶、半乳糖神经酰胺酶、谷氨酸草酰乙酸氨基移转酶1、颗粒酶B、溶菌素、内溶素、ectolysin、N-乙酰胞壁质酶、N-乙酰基-β-D-氨基葡糖苷酶、N-乙酰基胞壁酰基-L-丙氨酸酰胺酶、L-丙氨酰基-D-谷氨酸肽链内切酶、半胱氨酸/组氨酸依赖性酰胺水解酶/肽酶、溶葡球菌酶、噬菌体尾部相关的胞壁质水解酶、由金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)噬菌体-K来源的尾部相关的胞壁质水解酶催化结构域和溶葡球菌酶的细胞壁结合的SH3b结构域组成的融合蛋白、外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶-1、内β-N-乙酰基-氨基葡糖苷酶、来自酿脓链球菌(Streptococcuspyogenes)的EndoS或EndoS2、免疫球蛋白降解酶、酿脓链球菌的IdeS、淋病奈瑟菌(Neisseriagonorrhoeae)的...
【专利技术属性】
技术研发人员：拉尔斯·弗里德里希，尤里·宾德尔，
申请(专利权)人：XL蛋白有限责任公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。