一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与基因缺失株的LAMP检测引物及试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与MGF360‑505R基因缺失株LAMP检测引物及其试剂盒，所述LAMP检测引物包含两套引物，分别针对非洲猪瘟病毒野毒株保守的衣壳蛋白基因P72(B646L)序列和非洲猪瘟MGF360‑505R基因缺失株第27942‑35500位缺失区两侧，能特异性的检测出该非洲猪瘟MGF360‑505R基因缺失株。本方法采用恒温反应的检测手段，仅需加热即可实现整个反应，检测结果可以直接目测，适合现场检测；所述方法检测灵敏度高、特异性强、重复性好、检测速度快，可以作为有效鉴别非洲猪瘟病毒野毒株与MGF360‑505R基因缺失株的基层检测手段。

A lamp detection primer and kit for distinguishing between African classical swine fever virus wild strain and gene deletion strain

【技术实现步骤摘要】
一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与基因缺失株的LAMP检测引物及试剂盒
本专利技术属于生物
，更具体地，涉及一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与基因缺失株的LAMP检测引物及试剂盒。
技术介绍
非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒感染家猪和各种野猪(如非洲野猪、欧洲野猪等)引起一种急性、出血性、烈性传染病。患猪临床表现为发热(达40～42℃)，心跳加快，呼吸困难，部分咳嗽，眼、鼻有浆液性或粘液性脓性分泌物，皮肤发绀，淋巴结、肾、胃肠粘膜明显出血，最急性和急性感染死亡率高达100％。家猪、野猪与软蜱是非洲猪瘟自然宿主，非洲猪瘟可在家猪与野猪之间直接传播，也可由软蜱叮咬传播，还可以通过病毒污染的泔水、饲料及各种猪肉制品跨国家和地区传播。发现疫情必须扑杀进行无害化处理，其广泛危害全球猪群，是我国重点防范的外来动物传染病。尚无有效的商品化预防疫苗及特效药。目前CN110093324A公开了一种可作为疫苗的基因缺失减毒非洲猪瘟病毒及疫苗以及构建方法，采用非洲猪瘟中国流行株Pig/CN/HLJ/2018，经基因工程技术，将非洲猪瘟病毒的毒力基因缺失，获得MGF本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与MGF360-505R基因缺失株的LAMP检测引物组，包括以下A、B两组引物，每组引物包括：一对外引物、一对内引物和一对环引物，/nA组：/n外引物：/nP72-F3：TACTGTAACGCAGCACAG(SEQ ID NO:1)；/nP72-B3：CGATAAATTTCCATCAAAGTTCTG(SEQ ID NO:2)；/n内引物：/nP72-FIP：TAACGTATCCAGAGCAAGAGAATTTGAAAGTTAATAGCAGATGCCG(SEQ ID NO:3)；/nP72-BIP：ATGACCACTGGGTTGGTATTCCAATGCGATTAAAA...

【技术特征摘要】
1.一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与MGF360-505R基因缺失株的LAMP检测引物组，包括以下A、B两组引物，每组引物包括：一对外引物、一对内引物和一对环引物，
A组：
外引物：
P72-F3：TACTGTAACGCAGCACAG(SEQIDNO:1)；
P72-B3：CGATAAATTTCCATCAAAGTTCTG(SEQIDNO:2)；
内引物：
P72-FIP：TAACGTATCCAGAGCAAGAGAATTTGAAAGTTAATAGCAGATGCCG(SEQIDNO:3)；
P72-BIP：ATGACCACTGGGTTGGTATTCCAATGCGATTAAAACCCCCG(SEQIDNO:4)；
环引物：
P72-LF：CACTACGGCTGATCTTGTGGTAT(SEQIDNO:5)；
P72-LB：CCGTGGCTTCAAAGCAAAGGTAATC(SEQIDNO:6)；
B组：
外引物：
MGF360-505RQS-F3：GGATTATACTGGGAAAACCAT(SEQIDNO:7)；
MGF360-505RQS-B3：GCTGATATTTTTTAGCCAGAGTT(SEQIDNO:8)；
内引物：
MGF360-505RQS-FIP：
CAGGGCTTCATTTACGGGAATGATTTTCGAGCAGGAAACAACTGT(SEQIDNO:9)；
MGF360-505RQS-BIP：
GCAGCGAGACGTTTCAATAAAAGTTTTCTATCTCCTTGCTTCCACC(SEQIDNO:10)；
环引物：
MGF360-505RQS-LF：CAACTGTGTGCTTATACAGCAAC(SEQIDNO:11)；
MGF360-505RQS-LB：GGCTTCTACCCTTTGTAATCAAAAC(SEQIDNO:12)。


2.一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与MGF360-505R基因缺失株的LAMP检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包含权利要求1中所述的引物组。


3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括BstDNA聚合酶、LAMP反应液、甜菜碱、阳性对照和阴性对照。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈永义，王瑞晨，陈瑞爱，杨柔，
申请(专利权)人：华南农业大学，肇庆大华农生物药品有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44