用于鉴别H9和H6亚型低致病性禽流感病毒的冻干微芯片、试剂盒及方法技术

技术编号:23509715 阅读:39 留言:0更新日期:2020-03-17 22:23
本发明专利技术“用于鉴别H9和H6亚型低致病性禽流感病毒的冻干微芯片、试剂盒及方法”,属于分子检测领域。所述冻干微芯片的特征是:将用于鉴别H9和H6亚型低致病性禽流感病毒的荧光PCR反应体系通过冻干被固定在所述微芯片上;所述荧光PCR反应体系包括:下述引物和探针:禽流感H9亚型病毒上游引物,禽流感H9亚型病毒下游引物,禽流感H9亚型病毒Taqman探针;禽流感H6亚型病毒上游引物,禽流感H6亚型病毒下游引物,禽流感H6亚型病毒Taqman探针。本发明专利技术同时检测H9和H6亚型低致病性禽流感病毒,所述检测试剂盒检测方法准确性、特异性和敏感性高,检测时间短。

Freeze dried microchips, kits and methods for the identification of H9 and H6 subtypes of low pathogenic avian influenza virus

【技术实现步骤摘要】
用于鉴别H9和H6亚型低致病性禽流感病毒的冻干微芯片、试剂盒及方法
本专利技术涉及病毒的分子生物学检测
,特别是涉及一种用于鉴别H9和H6亚型低致病性禽流感病毒的冻干微芯片、试剂盒及方法。
技术介绍
禽流感病毒感染全称禽类流行性感冒病毒感染,是由甲型流感病毒某些亚型的毒株引起的人的急性呼吸道传染病。基因组为分节段单股负链RNA。依据其外膜血凝素(H)/和神经氨酸酶(N)蛋白抗原性的不同,目前可分为17个H亚型(H1~H17)和9个N亚型(N1~N9)。禽流感病毒可分为高致病性禽流感病毒、低致病性禽流感病毒和无致病性禽流感病毒。低致病性禽流感又叫致病性禽流感、非高致病性禽流感和温和型禽流感,它是指某些致病性低的禽流感病毒毒株(如H9N2和H6N1亚型)感染家禽引起的以低死亡率和轻度的呼吸道感染或产蛋率下降等临床症候群,其本身并不一定造成禽群的大规模死亡。由于它们对家禽养殖和贸易的影响没有高致病性禽流感严重,因此没有被列为A类或B类疾病。但它感染后往往造成禽群的免疫力下降,对各产蛋鸡或严重应激的鸡,损伤主要发生在呼吸道、生殖道、肾或胰本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于鉴别H9和H6亚型低致病性禽流感病毒的冻干微芯片,其特征在于,用于鉴别H9和H6亚型低致病性禽流感病毒的荧光PCR反应体系通过冻干被固定在所述微芯片上;/n所述荧光PCR反应体系包括:下述引物和探针:/n禽流感H9亚型病毒上游引物:5'-CCACCCGCCGATGCT-3',/n禽流感H9亚型病毒下游引物:5'-TGTTGCCACACTCGTTGTTGT-3',/n禽流感H9亚型病毒Taqman探针:5'-AGATCTGTACACGAGAACC-3';/n禽流感H6亚型病毒上游引物:5'-GCCAGACTACTGAAGGAGTGATAAGA-3',/n禽流感H6亚型病毒下游引物:5'-...

【技术特征摘要】
1.用于鉴别H9和H6亚型低致病性禽流感病毒的冻干微芯片,其特征在于,用于鉴别H9和H6亚型低致病性禽流感病毒的荧光PCR反应体系通过冻干被固定在所述微芯片上;
所述荧光PCR反应体系包括:下述引物和探针:
禽流感H9亚型病毒上游引物:5'-CCACCCGCCGATGCT-3',
禽流感H9亚型病毒下游引物:5'-TGTTGCCACACTCGTTGTTGT-3',
禽流感H9亚型病毒Taqman探针:5'-AGATCTGTACACGAGAACC-3';
禽流感H6亚型病毒上游引物:5'-GCCAGACTACTGAAGGAGTGATAAGA-3',
禽流感H6亚型病毒下游引物:5'-CAATCCACAGAGGGCTCACA-3',
禽流感H6亚型病毒Taqman探针:5'-CCACCAAAACATTCCAG-3'。


2.根据权利要求1所述的冻干微芯片,其特征在于,所述荧光PCR反应体系还包括:Taq酶、反转录酶、海藻糖、Tris-Cl、dNTP、Mg2+;
优先地,所述H9和H6亚型低致病性禽流感病毒的Taqman探针的5`端标记有荧光报告基团;3`端标记有荧光淬灭基团。


3.根据权利要求1或2所述的冻干微芯片,其特征在于,所述荧光PCR反应体系包括:上游引物0.4μM;下游引物0.4μM;Taqman探针0.4μM;DNA聚合酶0.5U/μL;反转录酶0.5U/μL;dNTP0.3mM;Mg2+3mM;海藻糖5μM;Tris-Cl5mM,其余为灭菌去离子水,总体积为36μL,每孔体积为1.2μL;
优先地,所述禽流感H9亚型病毒的Taqman探针的5`端标记的荧光报告基团为FAM荧光报告基团;
所述禽流感H6亚型病毒的Taqman探针的5`端标记的荧光报告基团为ROX荧光报告基团;
所述H9和H6亚型低致病性禽流感病毒的Taqman探针3`端标记的荧光淬灭基团为MGB淬灭基团。


4.根据权利要求1-...

【专利技术属性】
技术研发人员:王新杰高姗姗孙晓明胡祥钰刘玉良韩焘王传彬杨林
申请(专利权)人:北京亿森宝生物科技有限公司中国动物疫病预防控制中心农业部屠宰技术中心
类型:发明
国别省市:北京;11

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