用于鉴别猪蓝耳病毒经典株与NADC30-Like株的冻干微芯片、试剂盒及方法技术

技术编号:23509712 阅读:38 留言:0更新日期:2020-03-17 22:23
本发明专利技术“用于鉴别猪蓝耳病毒经典株与NADC30‑Like株的冻干微芯片、试剂盒及方法”,属于分子检测领域。所述冻干微芯片的特征是:用于鉴别猪蓝耳病毒经典株与NADC30‑Like株的荧光PCR反应体系通过冻干被固定在所述微芯片上;所述荧光PCR反应体系包括:下述引物和探针:猪蓝耳病毒经典株上游引物,猪蓝耳病毒经典株下游引物,猪蓝耳病毒经典株Taqman探针序列;NADC30‑Like株上游引物,NADC30‑Like株下游引物,NADC30‑Like株Taqman探针。本发明专利技术同时检测猪蓝耳经典株和NADC30‑Like株病毒,所述检测试剂盒检测方法准确性、特异性和敏感性高,检测时间短。

Freeze-dried microchip, kit and method for identification of classical strains and nadc30 like strains of porcine blue ear virus

【技术实现步骤摘要】
用于鉴别猪蓝耳病毒经典株与NADC30-Like株的冻干微芯片、试剂盒及方法
本专利技术涉及病毒的分子生物学检测
,特别是涉及一种用于鉴别猪蓝耳病毒经典株与NADC30-Like株的冻干微芯片、试剂盒及方法。
技术介绍
猪繁殖与呼吸综合征(Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS)俗称“猪蓝耳病”。该病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus,PRRSV)引起猪发生繁殖与呼吸障碍的一种重要疫病。PRRSV主要感染猪,尤其是母猪,该病严重影响其生殖功能,临床主要特征为流产,产死胎、木乃伊胎、弱胎,呼吸困难,在发病过程中会出现短暂性的两耳皮肤紫绀,故又称为蓝耳病。它是近些年危害猪场的头号疾病,不仅会造成母猪出现流产、死胎、发情异常、免疫抑制,还会导致商品猪出现腹泻、呼吸道疾病,严重影响猪只生长速度与健康。猪蓝耳经典毒株具有一定的致病性,但毒力较低,是作为猪蓝耳活疫苗防治高致病猪蓝耳的最佳选择。NADC30本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于鉴别猪蓝耳病毒经典株与NADC30-Like株的冻干微芯片,其特征在于,用于鉴别猪蓝耳病毒经典株与NADC30-Like株的荧光PCR反应体系通过冻干被固定在所述微芯片上;/n所述荧光PCR反应体系包括:下述引物和探针:/n猪蓝耳病毒经典株上游引物:5'-TGTTGTGACTTGAGCGTCGAT-3',/n猪蓝耳病毒经典株下游引物:5'-CAAAAGGCCAGGAACCGTAA-3',/n猪蓝耳病毒经典株Taqman探针序列:5'-TTTGTGATGCTCGTCAGG-3';/nNADC30-Like株上游引物:5'-GCCTCGCTCAGAACTTCCT-3',/nNADC30-L...

【技术特征摘要】
1.用于鉴别猪蓝耳病毒经典株与NADC30-Like株的冻干微芯片,其特征在于,用于鉴别猪蓝耳病毒经典株与NADC30-Like株的荧光PCR反应体系通过冻干被固定在所述微芯片上;
所述荧光PCR反应体系包括:下述引物和探针:
猪蓝耳病毒经典株上游引物:5'-TGTTGTGACTTGAGCGTCGAT-3',
猪蓝耳病毒经典株下游引物:5'-CAAAAGGCCAGGAACCGTAA-3',
猪蓝耳病毒经典株Taqman探针序列:5'-TTTGTGATGCTCGTCAGG-3';
NADC30-Like株上游引物:5'-GCCTCGCTCAGAACTTCCT-3',
NADC30-Like株下游引物:5'-CACCACGATGTAGGCTTCAG-3',
NADC30-Like株Taqman探针序列:5'-AGCATCTCGTCTCC-3'。


2.根据权利要求1所述的冻干微芯片,其特征在于,所述荧光PCR反应体系还包括:Taq酶、反转录酶、海藻糖、Tris-Cl、dNTP、Mg2+;
优先地,所述猪蓝耳病毒经典株和NADC30-Like株的Taqman探针的5`端标记有荧光报告基团;3`端标记有荧光淬灭基团。


3.根据权利要求1或2所述的冻干微芯片,其特征在于,所述荧光PCR反应体系包括:上游引物0.4μM;下游引物0.4μM;Taqman探针0.4μM;DNA聚合酶0.5U/μL;反转录酶0.5U/μL;dNTP0.3mM;Mg2+3mM;海藻糖5μM;Tris-Cl5mM,其余为灭菌去离子水,总体积为36μL,每孔体积为1.2μL;
优先地,所述猪蓝耳病毒经典株的Taqman探针的5`端标记的荧光报告基团为FAM荧光报告基团;
所述猪蓝耳病毒NADC30-Like株的Taqman探针的5`端标记的荧光报告基团为ROX荧光报告基团;
所述猪蓝耳病毒经典株和NADC30-Like株的Taqman探针3`端标记的荧光淬灭基团为MGB淬灭基团。


4....

【专利技术属性】
技术研发人员:韩焘周智倪建强刘玉良王传彬杨林王新杰高姗姗孙晓明胡祥钰
申请(专利权)人:中国动物疫病预防控制中心农业部屠宰技术中心北京亿森宝生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:北京;11

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1