【技术实现步骤摘要】
地衣芽孢杆菌的深层发酵方法及其应用
本专利技术涉及生物发酵
,具体涉及一种地衣芽孢杆菌的深层发酵方法及其应用,尤其涉及一种地衣芽孢杆菌的深层发酵方法,以及该方法所得地衣芽孢杆菌制备可湿性粉剂的应用。
技术介绍
我国每年使用大量的化学农药制剂,但是大量化学农药的使用,极易造成农药残留超标,生物富集,不仅污染生态环境,还影响人类的健康。微生物农药,是指应用活体微生物及其代谢产物对农业病虫害进行防治,其具有选择性强,副作用小,对人、畜、农作物和自然环境无害,不易产生抗药性等特点,因此是一种具有广阔前景的绿色农药。目前市场上已经有较为成熟的微生物农药产品,例如枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌等。地衣芽孢杆菌是一种属于芽孢杆菌属的革兰氏阳性细菌,在自然界分布非常广泛。研究表明,它对多种植物土传病原菌有很强的抑制作用,如对植物疫霉病菌、结核病病菌、核盘菌、稻瘟病病菌等均具有较强的抑菌活性,在植物土传病害防治中具有较好的防治效果。近年来地衣芽孢杆菌已成为芽孢杆菌中较具应用潜力的菌种之一,并且其在医药、饲料加工、农药等行业均取得了较好的研究成果。地 ...
【技术保护点】
1.一种地衣芽孢杆菌的深层发酵方法,其特征在于,具体步骤如下:1)菌种活化:将地衣芽孢杆菌接种于营养琼脂培养基上进行培养;2)摇瓶一级种子液制备:将步骤1)中活化后的菌种接入摇瓶种子培养基中,进行摇瓶培养,得到一级种子液;3)种子罐二级种子液制备:将步骤2)中所得的种子液经镜检无杂菌污染后按1~5%的接种量接入二级种子罐中搅拌培养;4)发酵罐高密度发酵培养:将步骤3)中所得的种子液经镜检无杂菌污染后按体积比为1~5%的接种量接入发酵罐的发酵培养基中培养;当发酵液中90%以上菌体形态为芽孢时,停止发酵,得发酵液备用;步骤4)所述培养的条件:发酵温度控制:33~36℃;空气流量 ...
【技术特征摘要】
1.一种地衣芽孢杆菌的深层发酵方法,其特征在于,具体步骤如下:1)菌种活化:将地衣芽孢杆菌接种于营养琼脂培养基上进行培养;2)摇瓶一级种子液制备:将步骤1)中活化后的菌种接入摇瓶种子培养基中,进行摇瓶培养,得到一级种子液;3)种子罐二级种子液制备:将步骤2)中所得的种子液经镜检无杂菌污染后按1~5%的接种量接入二级种子罐中搅拌培养;4)发酵罐高密度发酵培养:将步骤3)中所得的种子液经镜检无杂菌污染后按体积比为1~5%的接种量接入发酵罐的发酵培养基中培养;当发酵液中90%以上菌体形态为芽孢时,停止发酵,得发酵液备用;步骤4)所述培养的条件:发酵温度控制:33~36℃;空气流量调整:0h~4h控制在0.4~0.6vvm,4h~8h控制在0.6~0.8vvm,8h~11h控制在0.8~0.9vvm,11h~36h控制在1.0~1.5vvm;搅拌调整:0h~7h控制在60~80rpm,7h~8h控制在90~110rpm,8h~11h控制在120~150rpm,11h~36h控制在160~200rpm;发酵罐罐压为0.05~0.06Mpa。2.根据权利要求1所述的地衣芽孢杆菌的深层发酵方法,其特征在于,步骤1)所述菌种活化具体过程为:将地衣芽孢杆菌接种于营养琼脂培养基平板上进行培养,36℃培养12h;然后挑取单菌落划线转接于营养琼脂斜面,36℃培养12h;培养后得活化菌种。3.根据权利要求1所述的地衣芽孢杆菌的深层发酵方法,其特征在于,步骤2)所述培养条件:温度36℃、摇床转速160r/min、通气量0.8vvm、罐压0.05Mpa、培养时间12h;所述种子培养基中含酵母膏5g/500mL、蛋白胨1g/500mL、葡萄糖1g/500mL,pH7.0±0.1。4.根据权利要求1所述的地衣芽孢杆菌的深层发酵方法,其特征在于,步骤3)中,所述二级种子罐中含有酵母膏500g/50L、蛋白胨1000g/50L、葡萄糖1000g/50L,pH7.0±0.1;所述培养条件:温度36℃、搅拌速率160r/min、种子罐体积100L、装液量50L、通气...
【专利技术属性】
技术研发人员:郑双凤,谭石勇,罗志威,谭武贵,文亚雄,
申请(专利权)人:湖南泰谷生态工程有限公司,
类型:发明
国别省市:湖南,43
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