HDAC抑制剂制造技术

本发明专利技术公开了HDAC抑制剂。本发明专利技术还具体公开了(E)‑N‑(2‑氨基‑苯基)‑3‑{1‑[4‑(1‑甲基‑1H‑吡唑‑4‑基)‑苯磺酰基]‑1H‑吡咯‑3‑基}‑丙烯酰胺的盐，所述盐选自氢溴酸盐、甲磺酸盐、半乙基‑1,2‑二磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐和2‑萘磺酸盐。

HDAC inhibitors

【技术实现步骤摘要】
HDAC抑制剂专利技术应用领域本专利技术涉及(E)-N-(2-氨基-苯基)-3-{1-[4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-1H-吡咯-3-基}-丙烯酰胺盐，其在制药工业中用于药物组合物的制备。技术背景细胞中的转录调节是复杂的生物过程。一个基本的原理是通过组蛋白即形成八聚体组蛋白核心复合体的组蛋白H2A/B、H3和H4的翻译后修饰的调节。这些通过乙酰化或甲基化作用在赖氨酸残基上及通过磷酸化作用在丝氨酸残基上进行的复杂的N-末端修饰构成了所谓的“组蛋白编码”的一部分(Strahl&Ellis,Nature403,41-45,2000)。在简单的模型中，带正电荷的赖氨酸残基的乙酰化作用降低了对带负电荷的DNA的亲和力，所述DNA就变得容易让转录因子进入。组蛋白的乙酰化作用和脱乙酰化作用是由组蛋白乙酰基转移酶(HAT)和组蛋白脱乙酰酶(HDAC)催化的。HDAC与转录抑制复合物缔合，将染色质转变成无转录活性的沉默结构(Marksetal.NatureCancerRev1,194-202,2001)。对立面适用于与转录激活因子复合物缔合的HAT。迄今为止已经描述了三种不同类型的HDAC，即Mr＝42-55kDa的I型(HDAC1-3,8)，主要位于细胞核中，并且对曲古霉素A(TSA)的抑制敏感，Mr＝120-130kDa且对TSA敏感的II型(HDAC4-7,9,10)，和III型(Sir2同源物)，其以对NAD+的依赖性和TSA的不敏感性而显得非常特别(Ruijteretal.Biochem.J.370,737-749,2003；Khochbinetal.CurrOpinGenDev11,162-166,2001；Verdinetal.TrendsGen19,286-293,2003)。最近克隆了Mr＝39kDa的HDAC11，其显示出与I型和II型家族成员的同源性(Gaoetal.JBiolChem277,25748-25755,2002)。HAT和HDAC与细胞中的转录因子和平台蛋白一起出现在大复合物中(Fischleetal.MolCell9,45-47,2002)。出人意料地，基于对340种基因和作为参照HDI的TSA的差异显示分析，估计所有基因中只有约2％通过组蛋白乙酰化作用调节(vonLintetal.GeneExpression5,245-253,1996)。用SAHA对多发性骨髓瘤细胞进行的新研究显示，能够将这些转录变化分成对例如细胞凋亡或增殖的调节起到重要作用的截然不同的功能基因种类(Mitsiadesetat.ProcNatlAcadSci101,pp540,2004)。存在不同于组蛋白的物质。对于HDAC，这些物质包括诸如p53和TFIIE/的转录因子或诸如Hsp90的伴侣分子(Johnstone&Licht,CancerCell4,13-18,2003)。因此HDAC的正确名称会是赖氨酸特异性蛋白脱乙酰酶。由于这些发现，HDAC的抑制剂通过总体上调节蛋白乙酰化作用不仅影响染色质结构和基因转录，还影响蛋白功能和稳定性。HDAC在蛋白乙酰化作用中的这种功能可能对理解用HDI处理而引起的即刻基因抑制也很重要(vonLintetal.GeneExpression5,245-253,1996)。在这点上，致癌性转化、细胞凋亡调节和恶性细胞生长中涉及的蛋白都特别重要。不同的出版物都强调了组蛋白乙酰化作用对于癌症发展的重要性(综述见Krameretal.TrendsEndocrinMetabol12,294-300,2001；Marksetal.NatureCancerRev1,194-202,2001)。这些疾病包括(i)与鲁宾斯坦-泰比综合征、癌症易染病体质相关的HATcAMP应答元件结合蛋白(CBP)的突变(Murataetal.HumMoIGenet10,1071-1076,2001)，(ii)急性前髓细胞性白血病(APL)中的PML-视磺酸受体α融合基因表达的转录因子引起的HDAC1活性的异常募集(Heetal.Natgenet18,126-135,1998)，(iii)非何杰金淋巴瘤中的过量表达的BCL6蛋白引起的HDAC活性的异常募集(Dhordainetal.NuceicAcidRes26,4645-4651,1998)，并且最终(iv)急性粒细胞性白血病中的AML-ETO融合蛋白引起的HDAC活性的异常募集(AMLM2亚型；Wangetal.ProcNatlAcadSciUSA95,10860-10865,1998)。在这种AML亚型中，HDAC1活性的募集因此导致基因沉默、分化受阻和致癌性转化。(v)小鼠中的HDAC1基因敲除显示，HDAC1通过抑制细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p21waf1和p27kip1在胚胎干细胞增殖方面具有强大功能(Laggeretal.EmboJ.21,2672-2681,2002)。由于在许多癌细胞系中p21waf1由HDI诱导，因此HDAC1可能也是癌细胞增殖中的决定性组分。以初始的siRNA为基础的在HeLa细胞中进行的基因敲低试验支持这种假说(Glaseretal.310,529-536,2003)。(vi)Zhu等人最近报道，当功能性结肠腺瘤样息肉(APC)蛋白的损失造成wnt/β-连接素/TCF信号通路的组成性活化时，HDAC2在结肠癌中过量表达(Cancercell5,455-463,2004)。在分子水平上，许多与诸如曲古霉素A(TSA)的各种HDAC抑制剂相关的公开数据显示，许多癌症相关基因被上调或下调。这些包括被上调的p21waf1、细胞周期蛋白E、转化生长因子β(TGFβ)、p53或希佩尔-林道(VHL)肿瘤抑制基因，而Bcl-XL、bcl2、缺氧诱导因子(HIF)1α、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和细胞周期蛋白A/D通过HDAC的抑制被下调(综述见Krameretal.TrendsEndocrinMetabol12,294-300,2001)。HDAC抑制剂在细胞周期内的G1和G2/M处阻滞细胞并使S期细胞耗竭，如作为实例的缩酚酸肽所示(Sandoretal.,BritishJCancer83,817-825,2000)。抑制HDAC的化合物诱导不依赖p53和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3/8的细胞凋亡并具有广谱抗肿瘤活性。还描述了抗血管形成活性，其可能与VEGF和HIF1α的下调有关。总之，HDAC抑制在不同的分子水平上影响肿瘤细胞，并靶向多种细胞蛋白。有意思的是，发现HDAC抑制剂诱导细胞分化并且该药理活性还可能导致其具有抗癌活性。例如，最近显示，辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)诱导乳腺癌细胞系的分化，例如乳脂肪膜球蛋白(MFMG)、乳脂肪球蛋白和脂质的再合成(Munsteretal.CancerRes.61,8492,2001)。HDAC抑制剂越来越显示出与化学治疗以及靶向特异性的癌症药物具有合理的协同作用。例如，SAHA与激酶/cdk抑制剂夫拉平度(Alemenaraetal.Leukemia16,1331-1343,2002)、LAQ-824与bcr-abl激酶抑制剂格列卫(Glive本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.(E)‑N‑(2‑氨基‑苯基)‑3‑{1‑[4‑(1‑甲基‑1H‑吡唑‑4‑基)‑苯磺酰基]‑1H‑吡咯‑3‑基}‑丙烯酰胺的盐，所述盐选自氢溴酸盐、甲磺酸盐、半乙基‑1，2‑二磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐和2‑萘磺酸盐。

【技术特征摘要】
2008.03.12 EP 0800456851.(E)-N-(2-氨基-苯基)-3-{1-[4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-1H-吡咯-3-基}-丙烯酰胺的盐，所述盐选自氢溴酸盐、甲磺酸盐、半乙基-1，2-二磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐和2-萘磺酸盐。2.权利要求1所述的(E)-N-(2-氨基-苯基)-3-{1-[4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-1H-吡咯-3-基}-丙烯酰胺甲磺酸盐，其为A晶型，其特征在于粉末X-射线衍射峰包括但不限于3.9、16.4和16.9±0.1(°2θ)。3.权利要求1所述的(E)-N-(2-氨基-苯基)-3-{1-[4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-1H-吡咯-3-基}-丙烯酰胺半乙基-1，2-二磺酸盐，其为A晶型，其特征在于粉末X-射线衍射峰包括但不限于16.0、22.7和25.1±0.1(°2θ)。4.权利要求1所述的(E)-N-(2-氨基-苯基)-3-{1-[4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-1H-吡咯-3-基}-丙烯酰胺苯磺酸盐，其为A晶型，其特征在于粉末X-射线衍射峰包括但不限于19.1、20.4和22.7±0.1(°2θ)。5.权利要求1所述的(E)-N-(2-氨基-苯基)-3-{1-[4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-1H-吡咯-3-基}-丙烯酰胺甲苯磺酸盐，其为A多晶型，其特征在于粉末X-射线衍射峰基本上总结如下：7.0、9.7、9.9、12.8、13.9、14.7、15.0、15.5、17.8、18.0、18.5、18.9、19.6、19.9、20.5、20.7、21.0、22.7、22.9、23.5、24.5、27.0、28.1和28.6±0.1(°2θ)。6.权利要求1所述的(E)-N-(2-氨基-苯基)-3-{1-[4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-1H-吡咯-3-基}-丙烯酰胺甲苯磺酸盐，其为A多晶型，其特征在于基本上如图10所示的X-射线粉末衍射图。7.权利要求1所述的(E)-N-(2-氨基-苯基)-3-{1-[4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯磺酰基]-1H-吡咯-3-基}-丙烯酰胺甲苯磺酸盐，其为任一下述晶型：A晶型，其特征在于粉末X-射线衍射峰包括但不限于7.0、19.6和19.9±0.1(°2θ)；B晶型，其特征在于粉末X-射线衍射峰包括但不限于18.1、21.2和22.9±0.1(°2θ)；C晶型，其特征在于粉末X-射线衍射峰包括但不限于8.9、11.7和20.3±0.1(°2θ)；D晶型，其特征在于粉末X-射线衍射峰包括但不限于17.1、18.7和22.5±0.1(°2θ)；E晶型，其特征在于粉末X-射线衍射峰包括但不限于6.9、13.0和19.8±0.1(°2θ)；F晶型，其特征在于粉末X-射线衍射峰包括但不限于5.3、10.5和18.6+0.1(°2θ)；G晶型，其特征在于粉末X...

【专利技术属性】
技术研发人员：于尔根·沃尔兹，马丁·费斯，罗尔夫彼得·胡梅尔，马蒂亚斯·穆勒，托马斯·梅艾尔，波恩德·穆勒，
申请(专利权)人：四SC股份公司，
类型：发明
国别省市：德国,DE