一种RFF2细胞的构建方法技术

本发明专利技术公开提供了一种RFF2细胞的构建方法，属于生物技术领域。本发明专利技术公开用于构建一种攻防兼顾、具有特异性杀伤作用的特异性T细胞，即一种用于细胞免疫治疗的RFF2细胞，精准性好、杀伤率高。所述构建方法包括以下步骤：PBMC细胞负载致肿瘤突变的多肽，而后对负载多肽后的PBMC细胞进行多肽冲击；冲击后扩大培养，以得到FF细胞；以致肿瘤突变的多肽作为抗原直接刺激该FF细胞以筛选精准多肽；以精准多肽负载PBMC细胞，而后培养，并在培养过程中，用精准多肽进行多次冲击；冲击后继续培养，得到RFF细胞；用PD1等抗体对所得RFF细胞进行免疫抑制性信号分子体外封闭，以得到RFF2细胞。所述构建方法可用于细胞免疫治疗技术。

A Method of Constructing RFF2 Cells

【技术实现步骤摘要】
一种RFF2细胞的构建方法
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种RFF2细胞的构建方法。
技术介绍
肿瘤细胞免疫治疗是一种新兴的肿瘤治疗模式，它从病人体内采集免疫细胞，然后进行体外培养和扩增，再回输到病人体内，来激发以及增强机体的自身免疫功能以治疗肿瘤。肿瘤细胞免疫治疗是继手术、放疗和化疗之后的第四种肿瘤治疗方法。正常或生物工程改造过的人体细胞移植或输入患者体内，新输入的细胞可以替代受损细胞、或者具有更强的免疫杀伤功能，从而达到治疗疾病的目的。生物工程改造过的细胞用特殊方法在体外培养过程中加以改造，可提高其杀伤性，有效杀除患者体内肿瘤细胞。如，中国专利申请CN201210194280.5提供了一种人细胞因子诱导的杀伤细胞。中国专利申请CN201510034781.0提供一种肿瘤细胞特异性多克隆T细胞。中国专利申请CN201510013987.5提供一种抗肿瘤T细胞及其制备方法。中国专利申请CN201711060030.1提供一种治疗艾滋病合并淋巴瘤的CAR-T细胞及其制备方法和应用。中国专利申请CN201610824893.0提供一种抗体调控的双抗原特异性T细胞及其制备方法和应用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种RFF2细胞的构建方法，其特征在于，所述构建方法用于构建一种用于细胞免疫治疗的RFF2细胞，所述方法包括以下步骤：S1)PBMC细胞负载致肿瘤突变的多肽，而后对负载多肽后的PBMC细胞进行一次多肽冲击；其中，所述致肿瘤突变的多肽由以下方法合成得到：对肿瘤细胞进行全外显子测序；将全外显子测序结果与正常细胞的基因组相比，筛选出突变的氨基酸位点；以突变的氨基酸位点为中心预测抗原表位；采用多肽固相合成法合成突变多肽；S2)冲击后扩大培养，以得到FF细胞；S3)以致肿瘤突变的多肽作为抗原直接刺激所述FF细胞以筛选精准多肽；S4)以步骤S3筛选的精准多肽负载PBMC细胞，而后培养，并在培养过程中，...

【技术特征摘要】
2018.09.30 CN 20181115325221.一种RFF2细胞的构建方法，其特征在于，所述构建方法用于构建一种用于细胞免疫治疗的RFF2细胞，所述方法包括以下步骤：S1)PBMC细胞负载致肿瘤突变的多肽，而后对负载多肽后的PBMC细胞进行一次多肽冲击；其中，所述致肿瘤突变的多肽由以下方法合成得到：对肿瘤细胞进行全外显子测序；将全外显子测序结果与正常细胞的基因组相比，筛选出突变的氨基酸位点；以突变的氨基酸位点为中心预测抗原表位；采用多肽固相合成法合成突变多肽；S2)冲击后扩大培养，以得到FF细胞；S3)以致肿瘤突变的多肽作为抗原直接刺激所述FF细胞以筛选精准多肽；S4)以步骤S3筛选的精准多肽负载PBMC细胞，而后培养，并在培养过程中，以精准多肽进行多次多肽冲击；S5)冲击后继续培养，得到RFF细胞；S6)用单抗药对步骤S5所得RFF细胞进行免疫抑制性信号分子的封闭，以得到RFF2细胞，所述免疫抑制性信号...

【专利技术属性】
技术研发人员：焦顺昌，张嵘，周子珊，解佳森，王海燕，李营营，
申请(专利权)人：北京鼎成肽源生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11