用于抑制皮肤炎症和确定癌症易感性的方法和组合物技术

本文公开了在有需要的受试者中治疗或预防自身免疫性皮肤病症和/或炎症性皮肤病症、皮肤肿瘤以及肥胖的方法，所述方法是通过施用能够抑制炎性体NLRP1激活的抑制剂、NLRP1突变体、防止皮肤中应激响应性分泌因子、已知的促炎性细胞因子、角质形成细胞分化标志物、炎性体依赖性细胞因子以及生长因子分泌的制剂以及降低炎性体依赖性细胞因子的作用的制剂来实现的。本发明专利技术涵盖了NLRP1激活剂，如塔拉博斯塔特的用途，特别是用于治疗皮肤肿瘤的用途。本文还包括确定受试者患自身免疫性皮肤病症和/或炎症性皮肤病症的可能性的方法，所述方法包括在从所述受试者获得的样品中检测NLRP1突变。还公开了炎性体感受蛋白NLRP1突变体和用于治疗的组合物。

Methods and compounds for suppressing skin inflammation and determining cancer susceptibility

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于抑制皮肤炎症和确定癌症易感性的方法和组合物对相关申请的交叉引用本申请要求2016年9月21日提交的新加坡临时申请号10201607886X的优先权权益，该新加坡临时申请的内容在此以引用的方式整体并入本文用于所有目的。
本专利技术一般性涉及分子生物学领域。具体来说，本专利技术涉及使用生物标志物检测和诊断癌症。
技术介绍
先天免疫应答的及时激活和消退对于宿主防御、组织稳态以及肿瘤免疫监视来说是必要的。一个关键的先天免疫途径依赖于炎性体复合物，其由一系列例如配体感受性含核苷酸结合结构域、富含亮氨酸重复序列(NLR)蛋白、衔接蛋白ASC以及胱天蛋白酶-1组成。NLR蛋白巡视胞质并且在配体结合后引发炎性体组装、焦亡性细胞死亡以及促炎性细胞因子释放。虽然炎性体复合物在生理条件下对于病原体清除来说是必要的，但是它们的异常激活可能是有害的。这例如在由炎性体感受蛋白中的种系激活突变所引起的一组自身炎症性病症中是明显的，包括隐热蛋白相关周期性综合征(CAPS)、家族性地中海热综合征(FMF)以及某些形式的巨噬细胞激活综合征(MAS)。这些患者由于自发巨噬细胞激活和致热性细胞因子的释放而经历诸如周期性发热和无菌性炎症的诊断症状。炎性体复合物充当响应于病原体相关信号和危险相关信号而触发炎症的关键的先天免疫效应子。已经证实，例如，炎性体感受蛋白NLRP1是人类皮肤中最突出的炎性体感受蛋白，并且所有病原性NLRP1突变都易于导致炎性体激活并且易于导致癌症。在机制上，已经证实NLRP1突变通过破坏PYD结构域和LRR结构域来引起自低聚化增加，所述PYD结构域和LRR结构域对于维持NLRP1作为无活性单体是必要的。来自患者的原代角质形成细胞被证实经历了自发炎性体激活和旁分泌IL-1信号传导，这足以引起症状，如皮肤炎症和表皮增生。尽管NLR蛋白在全身性炎症中的功能是公认的，但是关于它们在器官特异性免疫应答和组织稳态中的作用知之甚少，特别是在例如皮肤的上皮组织中。除了形成结构屏障之外，人类皮肤还积极地与免疫系统相互作用以防止入侵的病原体和组织损伤。另一方面，慢性未消退的皮肤炎症可能导致多种皮肤疾病并且促进良性和恶性上皮皮肤病变的发展。因此，需要用于治疗或预防皮肤病症和确定癌症易感性的方法和制剂。
技术实现思路
在一个方面，本专利技术涉及一种在有需要的受试者中治疗或预防自身免疫性皮肤病症和/或炎症性皮肤病症的方法，其包括施用治疗有效量的抑制剂，所述抑制剂能够抑制炎性体感受蛋白NLRP1(含核苷酸结合结构域、富含亮氨酸重复序列(NLR)家族、含热蛋白结构域蛋白1-NLPR1)的激活。在另一个方面，本专利技术涉及一种在有需要的受试者中治疗或预防自身免疫性皮肤病症和/或炎症性皮肤病症的方法，其包括施用治疗有效量的防止皮肤中应激响应性分泌因子、已知的促炎性细胞因子、角质形成细胞分化标志物、炎性体依赖性细胞因子以及生长因子分泌的制剂。在又另一个方面，本专利技术涉及一种在有需要的受试者中治疗或预防自身免疫性皮肤病症和/或炎症性皮肤病症的方法，其包括施用治疗有效量的降低炎性体依赖性细胞因子的作用的制剂。在另一个方面，本专利技术涉及一种确定受试者的皮肤炎症是否是炎症性皮肤病症和/或自身免疫性皮肤病症的方法，其包括在从所述受试者获得的样品中检测NLRP1突变。在另一个方面，本专利技术涉及一种确定受试者患炎症性皮肤病症和/或自身免疫性皮肤病症的可能性(或易感性)的方法，其包括在从所述受试者获得的样品中检测NLRP1突变。在又另一个方面，本专利技术涉及一种在受试者中治疗皮肤炎症的方法，其包括在从所述受试者获得的样品中检测NLRP1突变；确定所述受试者是否具有NLRP1突变；并且其中当所述受试者具有NLRP1突变时，通过向有需要的受试者施用选自由以下各项组成的组中的任一种在所述受试者中治疗所述皮肤炎症：治疗有效量的抑制剂，所述抑制剂能够抑制炎性体感受蛋白NLRP1(含核苷酸结合结构域、富含亮氨酸重复序列(NLR)家族、含热蛋白结构域蛋白1-NLPR1)的激活；治疗有效量的防止皮肤中应激响应性分泌因子、已知的促炎性细胞因子、角质形成细胞分化标志物、炎性体依赖性细胞因子以及生长因子分泌的制剂；治疗有效量的降低炎性体依赖性细胞因子的作用的制剂；以及治疗有效量的炎性体感受蛋白NLRP1突变体。在另一个方面，本专利技术涉及一种在有需要的受试者中治疗或预防皮肤肿瘤的方法，其包括向有需要的受试者施用治疗有效量的炎性体感受蛋白NLRP1突变体。在另一个方面，本专利技术涉及一种分离的多肽或其片段，所述多肽与突变型NLRP1的多肽具有至少70％的序列同一性。在又另一个方面，本专利技术涉及一种分离的核酸或其片段，所述核酸与突变型NLRP1的核酸具有至少70％的序列同一性。在另一个方面，本专利技术涉及一种载体，其包含如本文所公开的核酸。在另一个方面，本专利技术涉及一种宿主细胞，其包含如本文所公开的载体。在一个方面，本专利技术涉及一种细胞培养系统，其包含如本文所公开的宿主细胞。在另一个方面，本专利技术涉及一种在有需要的受试者中治疗肥胖和/或代谢紊乱的方法，其包括向有需要的受试者施用治疗有效量的炎性体感受蛋白NLRP1突变体。在又另一个方面，本专利技术涉及一种在有需要的受试者中治疗或预防癌症的方法，其包括施用治疗有效量的能够激活炎性体感受蛋白NLRP1的激活剂。附图说明在结合非限制性实施例和附图考虑时，通过参考详细说明将更好地理解本专利技术，在所述附图中：图1示出了炎性体感受蛋白如何导致对皮肤癌的易感性增加以及炎性体中涉及的调节自身抑制的图示。图2示出了家谱图，显示了MSPC家族和FKLC家族的谱系和临床特征。(A)MSPC家族(MSPC-TN-1、MSPC-RO-1以及MSPC-FR-1)和FKLC家族(FKLC-EG-1)的谱系。通过桑格测序(Sangersequencing)验证所有加下划线的个体的NLRP1基因型。(B-L)MSPC和FKLC的主要临床症状。(B)脚跟上伴有上覆痂皮的硬结溃疡和周围角化过度症。(C)右脚外部上坚硬的鳞屑性结节和小趾上的甲下病变。(D)手掌和手指上多个离散的、自愈的、疣状角化棘皮瘤(一个病变在插图中详细说明)。(E)脚跟上的“溃疡性鳞状细胞增生性”斑块和脚底上的另一个更小的病变。(F)左手掌和手指上的多个离散的疣状丘疹和结节(一个病变在插图中详细说明)，这与角化棘皮瘤一致。(G)脚跟上伴有表面溃疡的鳞状细胞增生性角化棘皮瘤。(H)左眼显示伴有充血的结膜和角膜瘢痕形成。(I)闭塞性角膜瘢痕形成和周围的结膜炎症。(J)上臂上的多个离散的和半融合的苔藓样丘疹。(K)前臂上的多个离散的和半融合的苔藓样丘疹。(L)鱼际隆起和手指的掌侧面上的角化过度性丘疹(更详细示于插图中)。图3示出了数据，显示了MSPC和FKLC是由NLRP1(人类皮肤中的主要炎性体感受蛋白)中的种系突变引起的。(A)NLRP1基因组基因座(顶部)和NLRP1蛋白质结构域结构(底部)。所有MSPC病例都在NLRP1外显子1中携带种系杂合错义突变，所述NLRP1外显子1编码热蛋白结构域(PYD)。FKLC-EG-1V:3和FKLC-EG-1V:5对于去除外显子5的框内缺失(p.F787_R843del)是纯合的。(B)哺乳动物中NLRP1PYD的保本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种在有需要的受试者中治疗或预防自身免疫性皮肤病症和/或炎症性皮肤病症的方法，所述方法包括施用治疗有效量的能够抑制炎性体感受蛋白NLRP1激活的抑制剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.09.21 SG 10201607886X1.一种在有需要的受试者中治疗或预防自身免疫性皮肤病症和/或炎症性皮肤病症的方法，所述方法包括施用治疗有效量的能够抑制炎性体感受蛋白NLRP1激活的抑制剂。2.如权利要求1所述的方法，其中所述抑制剂防止NLRP1的蛋白水解切割。3.如权利要求3所述的方法，其中所述蛋白水解切割的位置在NLRP1的FIIND结构域内。4.如权利要求2或3所述的方法，其中所述蛋白水解切割的位置在位置1212处的苯丙氨酸与位置1213处的丝氨酸之间。5.如权利要求2至4中任一项所述的方法，其中所述蛋白水解切割的抑制剂选自由小分子、抗体、多肽以及核酸组成的组。6.一种在有需要的受试者中治疗或预防自身免疫性皮肤病症和/或炎症性皮肤病症的方法，所述方法包括施用治疗有效量的防止皮肤中应激响应性分泌因子、已知的促炎性细胞因子、角质形成细胞分化标志物、炎性体依赖性细胞因子以及生长因子分泌的制剂。7.一种在有需要的受试者中治疗或预防自身免疫性皮肤病症和/或炎症性皮肤病症的方法，所述方法包括施用治疗有效量的降低炎性体依赖性细胞因子的作用的制剂。8.如权利要求6或7所述的方法，其中所述炎性体依赖性细胞因子是选自由以下各项组成的组中的至少一种或两种或更多种：IL-1α(白细胞介素-1α)、IL-1β(白细胞介素-1β)以及IL-18(白细胞介素-18)。9.如权利要求6至8中任一项所述的方法，其中所述制剂选自由小分子、抗体、多肽以及核酸组成的组。10.如权利要求9所述的方法，其中所述制剂是抗体(如中和抗体)。11.一种确定受试者的皮肤炎症是否是炎症性皮肤病症和/或自身免疫性皮肤病症的方法，所述方法包括在从所述受试者获得的样品中检测NLRP1突变。12.一种确定受试者患炎症性皮肤病症和/或自身免疫性皮肤病症的可能性(或易感性)的方法，所述方法包括在从所述受试者获得的样品中检测NLRP1突变。13.一种在受试者中治疗皮肤炎症的方法，所述方法包括：-在从所述受试者获得的样品中检测NLRP1突变；-确定所述受试者是否具有NLRP1突变；以及其中当所述受试者具有NLRP1突变时，通过向所述受试者施用选自由以下各项组成的组中的任一种来在所述受试者中治疗所述皮肤炎症：-治疗有效量的抑制剂，所述抑制剂能够抑制炎性体感受蛋白NLRP1(含核苷酸结合结构域、富含亮氨酸重复序列(NLR)家族、含热蛋白结构域蛋白1-NLPR1)的激活；-治疗有效量的防止皮肤中应激响应性分泌因子、已知的促炎性细胞因子、角质形成细胞分化标志物、炎性体依赖性细胞因子以及生长因子分泌的制剂；-治疗有效量的降低炎性体依赖性细胞因子的作用的制剂；以及-治疗有效量的炎性体感受蛋白NLRP1突变体。14.如权利要求13所述的方法，其中所述NLRP1突变位于PYD(热蛋白结构域)和/或LRR(富含亮氨酸重复序列)结构域处。15.如权利要求13至14中任一项所述的方法，其中所述PYD结构域处的所述突变是错义突变。16.如权利要求13至15中任一项所述的方法，其中所述突变处于所述PYD结构域处，所述突变引起选自由以下各项组成的组的至少一个或两个或所有氨基酸取代：A54T、M77T以及A66V。17.如权利要求14至16中任一项所述的方法，其中所述LRR结构域处的所述突变是(框内缺失)。18.如权利要求14至17中任一项所述的方法，其中所述突变处于所述LRR结构域处，所述突变引起位置787处的氨基酸苯丙氨酸至位置843处的精氨酸的缺失(F787至R843或F787_R843del)。19.如权利要求14至18中任一项所述的方法，其中通过与野生型(非病变或非突变)NLRP1相比，所述样品中低聚化的NLRP1的...

【专利技术属性】
技术研发人员：B·勒韦萨德，钟雷，O·马迈，
申请(专利权)人：新加坡科技研究局，细胞遗传学分子遗传学和人类繁殖实验室，
类型：发明
国别省市：新加坡,SG