一种骨钙素在制备阿尔茨海默病药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种骨钙素在制备阿尔茨海默病药物中的应用，本发明专利技术发现OCN可改善AD小鼠的认知功能障碍和淀粉纤维样斑块沉积、可抑制胶质细胞的激活、可调控AKT/mTOR通路，为制备预防和/或治疗阿尔茨海默病的药物提供新的可能方向和分子靶点。

【技术实现步骤摘要】
一种骨钙素在制备阿尔茨海默病药物中的应用
本专利技术属于阿尔茨海默病治疗领域，特别涉及一种骨钙素在制备阿尔茨海默病药物中的应用。
技术介绍
机体在衰老过程中通常伴随不同程度的骨密度下降和神经退行性变。阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)是最常见的神经退行性疾病，同时也是痴呆的主要发病原因，病因尚不明确，表现为记忆、思维、行为和情绪等多方面的异常，严重影响患者的生活质量。流行病学调查研究显示AD患者具有较高的骨质疏松症风险，而骨质疏松症患者也存在较高的AD患病风险，提示二者存在共患。原发性骨质疏松和AD的共同特点是没有地域、种族、社会经济地位的界限，均随年龄增长而发生率增加，严重影响患者的生活质量，防治任务艰巨。目前针对AD的药物治疗只能部分缓解患者症状，对疾病本身的作用非常有限。若能从这两种老年退行性疾病中找到某种内在联系或共同信号通路，将为二者的治疗提供新的方向。近年来，骨作为内分泌器官的功能在不断被挖掘。骨钙素(osteocalcin,OCN)作为成骨细胞分泌的主要激素之一，不再单纯地被认为是一个经典的骨形成标记物，更是全身能量代谢的重要调节物质，能增强胰岛素分泌、改善胰岛素抵抗、改善糖耐量和血脂谱，调控棕色脂肪组织分化，影响雄性生殖腺功能和发育。来自横断面的和部分纵向的临床研究也表明循环中OCN水平与血糖水平、胰岛素抵抗和脂肪量存在负相关，与正常个体、1型或2型糖尿病、妊娠糖尿病、代谢综合征、多囊卵巢综合症等患者的非脂肪含量呈正相关，也可预测糖尿病风险。但目前有关骨对中枢神经系统调控的研究较为缺乏，且多数并不是骨特异性分泌物质。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种骨钙素在制备阿尔茨海默病药物中的应用，在此之前并没有骨钙素用于制备预防和/或治疗阿尔茨海默病药物的相关研究。本专利技术提供了一种骨钙素在制备阿尔茨海默病药物中的应用。进一步的，所述药物以骨钙素为活性成分，配以药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成制剂使用。进一步的，所述骨钙素的活性形式为非羧化骨钙素ucOCN。进一步的，所述制剂选自注射液、皮下埋植剂、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、缓释剂中的一种。本专利技术免疫组化结果表明：无论是腹腔注射还是中枢注射ucOCN均可明显减轻淀粉纤维样斑块在小鼠海马和皮质的沉积，中枢注射ucOCN的保护效果尤其显著，可减少近72％的纤维样斑块沉积。OCN不仅可用于改善AD小鼠的认知障碍症状，还可治疗AD的病理改变，揭示了OCN的相关药物可以成为治疗早发性AD的一种有效手段。有益效果本专利技术发现OCN可改善AD小鼠的认知功能障碍和淀粉纤维样斑块沉积、可抑制胶质细胞的激活、可调控AKT/mTOR通路，为制备预防和/或治疗阿尔茨海默病的药物提供新的可能方向和分子靶点。附图说明图1为腹腔注射骨钙素改善AD小鼠焦虑相关行为的示意图；其中，A为AD小鼠进入开放场的时间；B为AD小鼠进入开放场的次数；C为高架十字迷宫开臂的时间；D为高架十字迷宫开臂的次数；E为AD小鼠进入明箱的时间；F为AD小鼠进入明箱的次数。图2为腹腔注射骨钙素改善AD小鼠的空间学习记忆能力障碍的示意图；其中，A为AD小鼠在水迷宫训练阶段找到水下平台的时间，B为在原平台所在象限的游动时间，C为穿过原平台的次数。图3为腹腔注射骨钙素减轻AD小鼠海马和皮质的淀粉样斑块沉积的示意图；其中，A为WT小鼠，B为WT+10ug/kgOCN小鼠，C为AD小鼠，D为腹腔注射1ug/kgucOCN的AD小鼠，E为腹腔注射10ug/kgucOCN的AD小鼠，F为免疫组化Aβ染色定量分析结果，G为WesternBlot检测结果。图4为侧脑室注射骨钙素改善AD小鼠焦虑相关行为的示意图；其中，A为AD小鼠进入开放场的时间；B为AD小鼠进入开放场的次数；C为高架十字迷宫开臂的时间；D为高架十字迷宫开臂的次数；E为AD小鼠进入明箱的时间；F为AD小鼠进入明箱的次数。图5为侧脑室注射骨钙素改善AD小鼠的空间学习记忆能力障碍的示意图；其中，A为AD小鼠在水迷宫训练阶段找到水下平台的时间，B为在原平台所在象限的游动时间，C为穿过原平台的次数。图6为侧脑室注射骨钙素减轻AD小鼠海马和皮质的淀粉样斑块沉积的示意图；其中，A为WT小鼠，B为AD小鼠，C为侧脑室注射20ng/hucOCN的AD小鼠，D为免疫组化Aβ染色定量分析结果，E为WesternBlot检测结果。图7A为不同浓度老化Aβ1-42干预PC12细胞的示意图；图7B为给予ucOCN孵育改善Aβ1-42造成的细胞活性损伤的示意图。图8A-D为骨钙素调控AD小鼠和PC12细胞的AKT/mTOR通路的示意图。具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。此外应理解，在阅读了本专利技术讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本专利技术作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。本实施例选用7月龄APP/PS1雄性小鼠以及同窝阴性对照雄鼠作为实验动物，购买自南京大学模式动物研究所。实施例1(1)OCN干预首先采取腹腔注射ucOCN的方式干预APP/PS1小鼠。整个干预时长为4周，每日固定时间点腹腔注射ucOCN一次，剂量分别为1ug/kg和10ug/kg。因此，通过腹腔注射的小鼠分组分别为：WT、WT+10ug/kgOCN、AD、AD+1ug/kgOCN和AD+10ug/kgOCN，每组15只，共75只小鼠。ucOCN的配置方法为1mgucOCN粉末溶解于1ml的无菌N.S.中，平均分装并存储在-80℃冰箱备用，使用时可用无菌N.S.稀释到相应的浓度。鉴于ucOCN在外周参与促进胰岛素分泌、改善胰岛素抵抗、改善糖耐量和血脂等一系列生理功能的调节，为了明确ucOCN是直接入脑在中枢发挥保护作用还是通过改善外周组织功能而间接参与对AD病理生理过程的调节，同时采用侧脑室直接给予ucOCN的方式进行干预。侧脑室ucOCN干预方式为微量渗透压泵持续注射2周，微量渗透压泵的释放速度为0.5ul/h，释放剂量为20ng/h。因此，侧脑室注射动物分组为WT、AD、AD+20ng/h三组，每组8只，共24只小鼠。两种方式干预结束后分别依次进行开放场、高架十字迷宫和明暗穿梭实验检测小鼠焦虑样行为，水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力；行为学检测完成后取材，石蜡切片免疫组化染海马和皮质淀粉纤维状斑块，WesternBlot检测Aβ相关蛋白和AKT/mTOR通路蛋白表达。体外采用老化Aβ1-42损伤PC12细胞24h，并提前2h采用不同浓度ucOCN干预，观察ucOCN对细胞的保护作用和AKT/mTOR通路蛋白表达。(2)实验结果①首先采用腹腔注射的方式观察ucOCN干预是否可改善AD小鼠的焦虑相关行为以及学习记忆能力障碍。焦虑相关行为通过开放场、高架十字迷宫和明暗穿梭3个实验相互印证反映。在开放场实验的5min内，相对于WT小鼠，AD小鼠在开放场中心区域所处时间有降低趋势(F(4,65)＝1.880,P＝0.125,posthoc:WTvsAD,P＝0.078,图1A)，而腹腔注射ucOCN28天的AD小鼠在开放场中心区域时间有增加趋势，尤其是1ug/kg本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种骨钙素在制备阿尔茨海默病药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.一种骨钙素在制备阿尔茨海默病药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述药物以骨钙素为活性成分，配以药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成制剂使用。3.根据权利要求2所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘建民，单畅，李胜天，侯艳芳，王淑敏，宁光，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属瑞金医院，上海市内分泌代谢病研究所，
类型：发明
国别省市：上海,31