The invention discloses an alginate lyase Alg7D, a preparation method and application thereof. According to the codon preference of Pichia pastoris, the alginate lyase coding gene of Saccharophagus degradans 2 40 was optimized, and the optimized nucleic acid sequence was shown as SEQ ID NO.2. Furthermore, the optimized alginate lyase gene was secreted and expressed by Pichia pastoris expression system, and the alginate lyase was obtained. The amino acid sequence of the alginate lyase was shown as SEQ ID NO.1. The alginate lyase obtained by the invention has high hydrolytic activity to the sodium alginate substrate, and the crude enzyme liquid produced by shaking flask fermentation has the ability to completely degrade 1 g sodium alginate by 0.1ml (protein content is about 0.03mg), which has good industrial application prospect.
【技术实现步骤摘要】
一种褐藻胶裂解酶Alg7D及其制备方法和应用
本专利技术属于褐藻胶裂解酶制备
，具体涉及一种褐藻胶裂解酶的高效制备方法及应用。
技术介绍
褐藻酸是由古洛糖醛酸及甘露糖醛酸通过β-1,4糖苷键连接形成的异多糖，是褐藻细胞壁的主要成分。褐藻酸及其盐类，因其具有高粘度及易形成凝胶等性能，已在食品、化工及制药等领域取得较广泛应用。然而，较高的分子量及有限的水溶性限制了褐藻酸及其盐类的应用。相对而言，其降解产物褐藻酸寡糖，因其较低的分子量及更好的生物活性，具有更广阔的应用前景。褐藻胶裂解酶可通过β消除方式裂解褐藻酸的糖苷键，产生含有不饱和双键的褐藻酸寡糖。目前，已有大量不同来源的褐藻胶裂解酶被克隆、表达及鉴定。现有技术中褐藻胶裂解酶的制备大多是通过质粒载体转入到大肠杆菌中进行表达获得，其存在一些技术缺陷，例如，游离的质粒载体表达不稳定，经多次传代后易丢失；大肠杆菌表达的褐藻胶裂解酶Alg2A在细胞内，必须经过细胞破碎才能获得目标酶，增加了大规模制备的难度。
技术实现思路
本专利技术的目的是，提供一种褐藻胶裂解酶Alg7D的制备方法及应用；旨在提供一种经济高效的特异性褐藻胶...
【技术保护点】
1.一种褐藻胶裂解酶Alg7D，其特征在于：所述褐藻胶裂解酶Alg7D的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
【技术特征摘要】
1.一种褐藻胶裂解酶Alg7D，其特征在于：所述褐藻胶裂解酶Alg7D的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.权利要求1所述的褐藻胶裂解酶Alg7D的编码基因，其特征在于：该基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。3.权利要求1所述的褐藻胶裂解酶Alg7D的制备方法，该方法为：将核苷酸序列如SEQIDNO.2所示的褐藻胶裂解酶基因构建至表达载体中，然后导入毕赤酵母细胞，诱导培养并获得分泌表达的褐藻胶裂解酶。4.如权利要求3所述的褐藻胶裂解酶Alg7D的制备方法，其特征在于：所述表达载体为pGBG1。5.如权利要求3所述的褐藻胶裂解酶Alg7D的制备方法，其特征在于：所述毕赤酵母为GS115。6.如权利要求3所述的褐藻胶裂解酶Alg7D的制...
【专利技术属性】
技术研发人员：杜昱光，程功，赵勇，焦思明，任立世，王颖，王倬，孙明，
申请(专利权)人：中科荣信苏州生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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