作为可替代的抗微生物剂的噬菌体裂解酶制造技术

本发明专利技术涉及来自噬菌体CP26F和CP39O的分离的产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体裂解酶、以及在控制产气荚膜梭状芽孢杆菌中用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】本专利技术涉及来自噬菌体CP26F和CP39O的分离的产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体裂解酶、以及在控制产气荚膜梭状芽孢杆菌中用途。【专利说明】作为可替代的抗微生物剂的噬菌体裂解酶
本专利技术涉及用于控制产气荚膜梭状芽孢杆菌{Clostridium perfringens)细菌的噬菌体裂解酶或其功能性片段以及所述裂解酶的用途，包括但不限于治疗由产气荚膜梭状芽孢杆菌所致的疾病的组合物和方法。
技术介绍
产气荚膜梭状芽孢杆菌是梭状芽胞杆菌属的革兰氏阳性、杆状、厌氧的产孢细菌。产气荚膜梭状芽孢杆菌在自然界普遍存在，通常可作为腐烂植物、海洋沉积物、人和其他脊椎动物的肠道、昆虫和土壤的成分而发现。尽管普遍存在，并且通常为良性，但产气荚膜梭状芽孢杆菌也是许多动物和人的严重感染的原因。的确，已知产气荚膜梭状芽孢杆菌是食物中毒、气性坏疽(梭菌性肌坏死)、坏死性肠炎、和非食物传播的胃肠感染的原因。因此，产气荚膜梭状芽孢杆菌是人和动物的病原体(Songer，1997)。尽管所有家畜均可被感染，但产气荚膜梭状芽孢杆菌尤其是养禽业的忧虑。的确，在禽类中，产气荚膜梭状芽孢杆菌导致最具破坏性的损失。在鸡中，产气荚膜梭状芽孢杆菌导致坏死性肠炎，在现代肉用鸡群中最常见和具经济破坏力的细菌疾病。尽管临床疾病通常非常短暂，但在未经保护的禽群中死亡率可具破坏力。的确，通常在群体中坏死性肠炎的唯一迹象是死亡率的突然增加。除了增加死亡率之外，坏死性肠炎可存在于抑郁、起皱的羽毛和深色腹泻的禽类中。通常，在群体中疾病持续介于约5-10天之间，其具有介于约2-50%之间的死亡率。通常，通过在水或饲料中预防给药施用的抗微生物药物来控制坏死性肠炎。然而，对在动物饲料中使用抗生素的公众反对声日益增加。例如，在欧洲，已经禁止在动物饲料中使用抗生素(参见例如，van Immerseel等人,2004，2008)。很快美国也会如此。如果没有用于预防坏死性肠炎和由产气荚膜梭状芽孢杆菌导致的其他疾病的传统抗生素，则这些疾病可能成为养禽业的 极大问题。因此，本领域需要对预防和治疗由产气荚膜梭状芽孢杆菌(特别是影响家禽的产气荚膜梭状芽孢杆菌)所导致疾病有效的传统抗生素的替代选择。幸运地，如从以下公开明显可见，本专利技术提供这些和其他需求。
技术实现思路
在一个实施方案中，本专利技术提供分离的产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体裂解酶，其中噬菌体裂解酶是选自CP26F溶素和CP390溶素的成员，以及其中，噬菌体裂解酶活性导致产气荚膜梭状芽孢杆菌细菌细胞的裂解。在一示例性实施方案中，分离的产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体裂解酶包含具有与SEQ ID NO:1有至少约90%同一性的氨基酸序列的肽。在另一示例性实施方案中，分离的产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体裂解酶具有根据SEQ IDNO:1的序列。在另一示例性实施方案中，分离的产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体裂解酶包含具有与SEQ ID NO:3有至少约90%同一性的氨基酸序列的肽。在又一示例性实施方案中，分离的产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体裂解酶具有根据SEQ ID NO:3的序列。在又一示例性实施方案中，分离的产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体裂解酶由产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体分离，该产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体是选自具有ATCC保藏名称PTA-11081的产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体CP390以及具有ATCC保藏名称PTA-11080的产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体CP26F的成员。在另一实施方案中，本专利技术提供编码产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体裂解酶的分离的核酸分子，其中噬菌体裂解酶是选自CP26F溶素和CP390溶素的成员，以及其中，噬菌体裂解酶活性导致产气荚膜梭状芽孢杆菌细菌细胞的裂解。在一示例性实施方案中，分离的核酸分子是选自编码具有与SEQ ID NO:1有至少约90%同一性的氨基酸序列的肽的分离的核酸以及编码具有与SEQ ID NO: 3有至少约90%同一性的氨基酸序列的肽的分离的核酸的成员。在另一示例性实施方案中，分离的核酸分子编码具有根据SEQ ID N0:1的氨基酸序列的肽。在另一示例性实施方案中，分离的核酸分子编码具有根据SEQ ID N0:3的氨基酸序列的肽。在另一实施方案中，本专利技术提供有效针对产气荚膜梭状芽孢杆菌的抗微生物组合物，该抗微生物组合物包含产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体裂解酶，其中噬菌体裂解酶是选自CP26F溶素和CP390溶素的成员，以及其中，噬菌体裂解酶活性导致产气荚膜梭状芽孢杆菌细菌细胞的裂解。在一示例性实施方案中，抗微生物组合物包含具有与SEQ ID NO:1有至少约90%同一性的氨基酸序列的肽。在另一示例性实施方案中，抗微生物组合物包含具有根据SEQ ID NO:1的序列的肽。在另一示例性实施方案中，抗微生物组合物包含具有与SEQ ID N0:3有至少约90%同一性的氨基酸序列的肽。在又一示例性实施方案中，抗微生物组合物包含具有根据SEQ ID N0:3的序列的肽。在另一示例性实施方案中，抗微生物组合物包含由产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体分离的噬菌体裂解酶，该产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体是选自具有ATCC保藏名称PTA-11081的产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体CP390以及具有ATCC保藏名称PTA-11080的产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体CP26F的成员。在另一实施方案中，本专利技术提供包含产气荚膜梭状芽孢杆菌噬菌体裂解酶的动物饲料，其中噬菌体裂解酶是 选自CP26F溶素和CP390溶素的成员，以及其中噬菌体裂解酶在家畜中以有效地控制产气荚膜梭状芽孢杆菌感染的量存在。在一示例性实施方案中，动物饲料适合饲养鸡类。本专利技术的其他特征、目的和优势由以下详细描述显而易见。【专利附图】【附图说明】图1.SEQ ID NO:1:噬菌体CP26F溶素氨基酸序列。图2.SEQ ID NO: 2:编码噬菌体CP26F溶素的示例性核酸序列。下划线序列是各自基因的“起始”和“终止”位点。图3.SEQ ID NO: 3:噬菌体CP390溶素氨基酸序列。图4.SEQ ID NO:4:编码噬菌体CP390溶素的示例性核酸序列。下划线序列是各自基因的“起始”和“终止”位点。图5.CP26F溶素和CP390溶素的氨基酸序列的比较比对。【具体实施方式】定义如本文所使用的术语“家畜”是指在农业环境中饲养的一种或多种驯养家畜，通常但不必要地用于生产食品、纤维或者提供劳力。示例性家畜种类包括但不限于牛、猪、羊和家禽。如本文所使用的术语“家禽”是指封闭培养或保存以用于繁殖、生产肉或蛋、或者补充猎物供应的家用禽类，例如，鸡；火鸡；珍珠鸡；鸭；鹅；鹌鹑；鸽子；诸如野鸡、鹧鸪、平胸鸟的猎鸟等。如本文所使用的术语“抗微生物剂”、“杀微生物剂”或任意其他语法等同表达形式是指有效地控制诸如细菌(例如，产气荚膜梭状芽孢杆菌)的微生物的任意组合物和/或物质。在示例性实施方案中，“抗微生物剂”是包含有效地控制产气荚膜梭状芽孢杆菌的噬菌体裂解酶的抗微生物组合物。如本文所使用，如在诸如短语产气荚膜梭状芽孢杆菌的“控制”、“使控制”产气荚膜梭状芽孢杆菌、“使控制产气荚膜梭状芽孢杆菌种群”、或者“使控制产气荚膜梭状芽孢杆菌感染”或者任意语法等同表达形式中的术语“控制”或者“使控制”是指用于预防感染或本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：布鲁斯·S·希尔，格雷戈里·R·希拉古萨，伊本·穆斯塔法·A·西蒙斯，乔娜·K·加利什，大卫·M·多诺万，
申请(专利权)人：美利坚合众国，由农业部长代表，
类型：
国别省市：