一种解淀粉芽孢杆菌菌株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种解淀粉芽孢杆菌菌株及其应用。该解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)YB1701在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No.16003。本发明专利技术所提供的解淀粉芽孢杆菌YB1701来自于碱蓬根际土壤，可以有效拮抗玉米黑束病菌(Acremonium strictum)、黄色镰孢病菌(Fusarium culmorum)、辣椒疫病菌(Phytophthora capsici Leonian)、甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.melonis)等16种植物病原真菌，对水稻幼苗生长有显著促进作用，在生物农药和生物有机肥研制中具有广阔的应用前景。

A Bacillus amylolytica strain and its application

The invention discloses a Bacillus amylolytica strain and its application. The preservation number of the Bacillus amyloliquefaciens YB1701 is CGMCC No. 16003 in the General Microbial Center of the China Microbial Species Preservation and Management Committee. The amylolytic Bacillus YB1701 provided by the invention is from the rhizosphere soil of Suaeda salsa, which can effectively antagonize 16 plant pathogenic fungi, such as Acremonium strictum, Fusarium culmorum, Phytophthora capsici Leonian, Fusarium oxysporum f. sp. melonis, and can significantly promote the growth of rice seedlings. It has broad application prospects in the development of bio-pesticides and bio-organic fertilizers.

【技术实现步骤摘要】
一种解淀粉芽孢杆菌菌株及其应用
本专利技术属于菌株培育
，具体涉及一种解淀粉芽孢杆菌菌株YB1701及其应用，具体为一种能够产ACC脱氨酶、IAA生长素并对植物病原真菌具有广谱拮抗作用的解淀粉芽孢杆菌及其用途，可拮抗16种常见植物病原真菌，并对水稻幼苗具有明显促生长作用的细菌。
技术介绍
碱蓬(SuaedaglaucaBunge)，又名碱蒿子、盐蒿子，多生于海滩、河谷、路旁、田间等盐碱地上，属于黎科碱蓬属，是一种耐盐性极强的盐生植物，在我国新、蒙、辽等省区分布广泛。目前碱蓬已成为生物改良盐渍土的首选植物品种。研究表明植物根系土壤中含有丰富的微生物，有助于植物吸收养分，促进植物生长。袁野(2018)从盘锦红海滩碱蓬根系土壤中利用纯培养方法分离得到80株嗜盐碱细菌。解淀粉芽孢杆菌是一种具有广谱抑菌活性特点的细菌(吴一晶等，2012)，能够产生大量次生代谢产物和多种抑菌物质。邱思鑫等(2004)从烟草茎秆中分离出一株对丝状真菌具有很好抑制作用的内生解淀粉芽孢杆菌TB2；Arrebola等(2009)从水果表面分离出对7种不同柑橘采后的真菌病原体具有抗菌活性的解淀粉芽孢杆菌PPCB004；Wong等(2010)从解淀粉芽孢杆菌NK10中分离出对多种病菌具有抑制活性的抑菌蛋白。章淑艳等(2017)分离出一株在麻山药根腐病防治中具有显著抑制效果的解淀粉芽孢杆菌，其抑菌率达到89.6％，显著高于施用化学药剂敌克松可湿性粉剂的处理。李社增等(2017)分离出一株防治番茄灰霉病的解淀粉芽抱杆菌，可以防治由灰葡萄孢菌引起的果实腐烂、叶、茎和花腐烂的疾病，可以使番茄增产。微生物肥料在农业生产中具有重要作用，其中菌种是微生物肥料生产的应用基础。一方面微生物能够产生具有活性的、促进作物生长的代谢产物；另一方面，微生物能够拮抗植物病原菌，提高作物抗病性等。
技术实现思路
本专利技术提供一种解淀粉芽孢杆菌菌株YB1701及其应用，具有广谱抑菌效果、能够产生产ACC脱氨酶和IAA生长素的解淀粉芽孢杆菌，极具开发价值。本专利技术是这样实现的，提供一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)菌株，所述解淀粉芽孢杆菌菌株为YB1701，且所述解淀粉芽孢杆菌菌株YB1701保藏于中国微生物菌种保藏管理委员普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.16003。提供一种菌剂，所述菌剂的活性成分为上述解淀粉芽孢杆菌YB1701或解淀粉芽孢杆菌YB1701的发酵液或解淀粉芽孢杆菌YB1701的代谢产物。上述菌剂为下述任一一种菌剂：1)抑制植物病原真菌的菌剂；2)防治植物病原真菌病害的菌剂；3)促进植物生长的菌剂；4)提高植物抗逆性的菌剂；5)降低植物对逆境敏感性的菌剂；6)产生1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶(ACC)的菌剂；7)产生吲哚-3-乙酸(IAA)的菌剂；所述逆境为干旱、高温、病虫害侵袭或重金属污染。上述植物病原真菌为以下至少一种植物病原真菌：1)玉米黑束病菌(Acremoniumstrictum)；2)玉米大斑病菌(Exserohilumturcicum)；3)瓜果腐霉病菌(Pythiumaphanidermatum)；4)玉米腐霉病菌(PythiumgramincolaSubra)；5)玉米圆斑病菌(Bipolariszeicola)；6)辣椒疫病菌(PhytophthoracapsiciLeonian)；7)番茄灰霉病菌(BotrytiscinereaPers.)；8)苹果霉心病菌(Trichotheciumroseum))；9)稻瘟病菌(Pyriculariagrisea)；10)甜瓜枯萎病菌(Fusariumoxysporumf.sp.melonis)；11)高粱靶斑病菌(Bipolarissorghicola)；12)玉米弯孢叶斑病菌(Curvularialunata)；13)玉米穗腐病菌(Fusariumgraminearum)；14)黄色镰孢病菌(Fusariumculmorum)；15)玉米顶腐病菌(Frumentumsubglutinans)；16)向日葵核盘菌(Sclerotiniasclerotorium)。提供一种生物有机肥，所述生物有机肥的活性成分为权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌YB1701或解淀粉芽孢杆菌YB1701的发酵液或解淀粉芽孢杆菌YB1701的代谢产物。提供一种上述解淀粉芽孢杆菌菌株的培养方法，包括将解淀粉芽孢杆菌YB1701在用于培养解淀粉芽孢杆菌的培养基中培养的步骤。具体的，上述方法包括如下步骤：1)取新鲜采集的根际带有土壤的碱蓬草，抖落其根基土壤，并称取10g根基土壤；2)根基土壤风干后，将土壤样品置于带有玻璃珠并装有90mL无菌生理盐水的锥形瓶中，室温120rpmin振荡30min，制成土壤悬液；3)取1mL土壤悬液至装有9mL无菌生理盐水的试管中进行梯度稀释，分别取10-3，10-4，10-5稀释度0.1mL涂布至筛选培养基平板上，37℃培养24h，挑取单菌落进行分离纯化，得到解淀粉芽孢杆菌YB1701。上述筛选培养基成分为：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl5g，琼脂粉18-20g，水1000mL，pH7.2-7.4，121℃灭菌20min。具体的，解淀粉芽孢杆菌YB1701的发酵液的制备包括如下步骤：1)将纯化培养的解淀粉芽孢杆菌YB1701由斜面接种至牛肉膏蛋白胨固体培养基中，在37℃、180r/min下培养24h；2)将步骤1)活化的菌株接入LB液体培养基中，于37℃、180r/min摇床中振荡培养48h，获得种子液；3)将步骤2)所得的种子液按照5％接种量接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，于37℃180r/min摇床中振荡培养48h，获得解淀粉芽孢杆菌YB1701发酵液。所述解淀粉芽孢杆菌YB1701的发酵液中解淀粉芽孢杆菌YB1701菌体含量为1.0×106～1.0×108cfu/mL。本专利技术涉及的菌株保藏说明如下：菌种名称：解淀粉芽孢杆菌拉丁名：Bacillusamyloliquefaciens菌株编号：CGMCCNo.16003保藏机构：在中国微生物菌种保藏管理委员普通微生物中心保藏机构简称：CGMC地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号保藏日期：2018年6月25日保藏中心登记入册编号：CGMCCNo.16003与现有技术相比，本专利技术的优点在于：本专利技术提供的解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)YB1701是从碱蓬根际土壤中分离，该菌株可以产生1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)脱氨酶和IAA生长素，对供试16种植物病原真菌具有明显抑菌作用，在植物病菌病害生物防治方面和促生长方面有广阔的应用前景。附图说明图1解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)YB1701的菌落(a)和单染色照片(b)；图2解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)YB1701的解淀粉透明圈照片；图3解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)YB1701的16SrDNA的PCR扩增电泳图；图4基于16SrDNA构建的解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)YB1701系统发育树；图5解淀粉芽孢杆菌(B.a本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种解淀粉芽孢杆菌菌株，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌菌株为YB1701，且所述解淀粉芽孢杆菌菌株YB1701保藏于中国微生物菌种保藏管理委员普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.16003。

【技术特征摘要】
1.一种解淀粉芽孢杆菌菌株，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌菌株为YB1701，且所述解淀粉芽孢杆菌菌株YB1701保藏于中国微生物菌种保藏管理委员普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.16003。2.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂的活性成分为权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌YB1701或解淀粉芽孢杆菌YB1701的发酵液或解淀粉芽孢杆菌YB1701的代谢产物。3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂为下述任一一种菌剂：1)抑制植物病原真菌的菌剂；2)防治植物病原真菌病害的菌剂；3)促进植物生长的菌剂；4)提高植物抗逆性的菌剂；5)降低植物对逆境敏感性的菌剂；6)产生1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶的菌剂；7)产生吲哚-3-乙酸的菌剂；所述逆境为干旱、高温、病虫害侵袭或重金属污染。4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于，所述植物病原真菌为以下至少一种植物病原真菌：1)玉米黑束病菌；2)玉米大斑病菌；3)瓜果腐霉病菌；4)玉米腐霉病菌；5)玉米圆斑病菌；6)辣椒疫病菌；7)番茄灰霉病菌；8)苹果霉心病菌；9)稻瘟病菌；10)甜瓜枯萎病菌；11)高粱靶斑病菌；12)玉米弯孢叶斑病菌；13)玉米穗腐病菌；14)黄色镰孢病菌；15)玉米顶腐病菌；16)向日葵核盘菌。5.一种生物有机肥，其特征在于，所述生物有机肥的活性成分为权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌YB1701或解淀粉芽孢杆菌YB1701的发酵液或解淀粉芽孢杆菌YB1701的代谢产物。6.一种如权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌菌株的培养方法，其特征在于，包括将解淀粉芽孢杆菌YB1701在用于培养解淀粉...

【专利技术属性】
技术研发人员：马莲菊，卜宁，张丹雨，刘莹莹，李玥莹，李雪梅，王兰兰，
申请(专利权)人：沈阳师范大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21