本发明专利技术公开了一株耐酸产乙偶姻的解淀粉芽孢杆菌，其分类命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，菌株号为NRCB005，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC NO.17214，保藏日期为2019年1月18日。本发明专利技术还公开了上述解淀粉芽孢杆菌的应用。本发明专利技术的解淀粉芽孢杆菌株NRCB005通过纯培养试验、实验室平板试验和温室盆栽实验证明其能够产生挥发性有机气体乙偶姻，能在pH7.0～4.2的土壤中显著促进番茄的生长，能有效抑制尖孢镰刀病原菌、玉米大斑病原菌、甜瓜枯萎病原菌，从而促进番茄的生长，具有良好的应用前景。
A Bacillus amyloliquefaciens strain resistant to acid and acetoin and its application
The invention discloses a Bacillus amyloliquefaciens resistant to acid and acetoin, which is classified as Bacillus amyloliquefaciens. The strain number is NRCB005. It has been stored in the General Microbial Center of the Chinese Committee for the Preservation of Microbial Species. The preservation number is CGMCC NO. 17214 and the preservation date is January 18, 2019. The invention also discloses the application of the aforementioned amylolytic bacillus. The Bacillus amylolytica strain NRCB005 of the invention has been proved by pure culture test, laboratory plate test and greenhouse pot experiment that it can produce volatile organic gas ethyl conjugate, can significantly promote the growth of tomatoes in soil with pH 7.0-4.2, can effectively inhibit Fusarium oxysporum, corn spot pathogen, Melon Fusarium wilt pathogen, thereby promoting the growth of tomatoes, and has good performance. Good application prospects.
【技术实现步骤摘要】
一株耐酸产乙偶姻的解淀粉芽孢杆菌及其应用
本专利技术属于微生物
，涉及解淀粉芽孢杆菌及其在促进作物生长和防止植物病害中的应用。
技术介绍
目前在农业生产内部，由于化肥等农业投入品长期不合理使用，不仅造成农田土壤酸化、板结、次生盐渍化等问题，还破坏了土壤根际微生物群落结构，使许多有益微生物从优势菌群变为次要菌群。我国土壤酸化呈现面积大、分布广、酸化程度高及危害大等特点，其中酸化土壤的总面积高达2.04×108hm2，约占全国土壤面积的22.7％(于天一等，2014)。近几十年来由于高强度人为活动的影响，土壤酸化的进程大大加速，对生态环境和农业生产的危害加重，在热带和亚热带地区情况尤为严重。因此，采取有效措施减缓土壤酸化进程并对严重酸化土壤进行改良和修复，对保护生态环境和保障农业的可持续发展具有重要意义(徐仁扣，2015)。番茄是我国设施蔬菜栽培面积最大的作物之一，其风味独特、营养丰富，深受消费者喜爱。然而，为了提高番茄的产量，番茄在肥料使用上过量施用化肥，造成番茄果实品质不高，农田土壤板结、酸化等问题，因此，如何提高番茄等经济作物的耐酸能力不仅是改良利用酸化土地的重要方法，也是扩大番茄等作物种植范围提高产量的根本途径。植物根际促生菌是指定殖植物根部并能够促进植物生长或抑制植物病害的细菌被称为促进植物生长的根际细菌(PGPR)，现在已经从水稻、小麦、玉米、花生等多种作物的根际分离得到了大量的PRPG菌株，并被广泛用于微生物肥料和微生物菌剂的领域。植物根际促生菌的出现为番茄绿色增产提供了一个新的思路。其中解淀粉芽孢杆菌是一种优良的促生菌，其不仅能促进植物生长，还能有效地防止植物病害的发生，例如，它通过产生抗生素、抗菌蛋白或多肽等活性物质来抑制植物病原细菌、真菌、病毒、线虫的生长；通过溶磷、解钾、分泌吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GAs)等来促进植物生长。但是，很少有人提及菌株产生挥发性化合物能促进作物生长并能抑制植物病原菌的生长，而挥发性物质可以在不接触根系的情况下发挥作用。如果能获得具备一般芽孢杆菌促生特征并且产生一定量挥发性物质的菌株，将有效扩大微生物肥料和微生物菌剂施用时距离根系的范围，具有高效、安全、施用方便的优点。专利CN200810088388.X公开了一种包含芽孢杆菌属和沙雷氏菌属复合生防菌剂AR156，其能防治多种蔬菜土传病害，并具有促生作用。专利CN201010518034.1公开了一株解淀粉芽孢杆菌Lx-11菌株，保藏编号为CGMCCNo.3789，对水稻细菌性条斑病有良好的防治效果。专利CN200910058487.8公开了一种防治作物土传病害的木霉菌制剂，并且其能显著增加烟草的产量，但是以上专利均未提及菌株分泌的挥发性物质对植物的促生作用，也未提及在酸性土壤中对番茄等作物的促生作用。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种耐酸产乙偶姻的解淀粉芽孢杆菌，该菌株具有优异的在酸化土壤中促进番茄等植物生长的能力，促进番茄在强酸土壤中生长。本专利技术还要解决的技术问题是提供上述耐酸产乙偶姻的解淀粉芽孢杆菌的应用。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案如下：一株耐酸产乙偶姻的解淀粉芽孢杆菌，其分类命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)，菌株号为NRCB005，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCCNO.17214，保藏日期为2019年1月18日。保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮政编码100101。本专利技术的解淀粉芽孢杆菌NRCB005是本专利技术人于2018年8月从江苏省宜兴市大铺镇水稻根际土中分离得到，通过16SrDNA序列分析，经NCBI中BLAST比对后与解淀粉芽孢杆菌同源较高，相似度为100％，再根据其外形以及生理生化特性，初步鉴定菌株NRCB005为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)。所述菌株解淀粉芽孢杆菌NRCB005是乙偶姻分泌菌株，所述的解淀粉芽孢杆菌NRCB005是耐酸芽孢杆菌，其耐酸度为pH7～pH3.5，所述的解淀粉芽孢杆菌NRCB005菌落呈圆形，不透明，罕见半透明，淡黄色白色和凸起，边缘不规则，易挑起。该菌能够生成吲哚乙酸、溶解无机磷、溶解不溶性钾，这与大多数芽孢杆菌相同。此外，该菌还可以生成挥发性气体乙偶姻，在菌体不接触作物根系的时候发挥作用，有效扩大微生物肥料和微生物菌剂施用时距离根系的范围，具有高效、安全、施用方便的优点。本专利技术菌株的其他特征将在后面的具体实施部分予以详细说明。其中，所述的解淀粉芽孢杆菌具有较好的耐酸特性，在液体培养基中，其能在pH7～pH3.5的环境中正常生长。其中，所述的解淀粉芽孢杆菌在pH7.0～pH4.2(优选pH6.0～pH4.2)的酸化土壤中正常生长。上述耐酸产乙偶姻的解淀粉芽孢杆菌在发酵生产乙偶姻中的应用也在本专利技术的保护范围之内。上述耐酸产乙偶姻的解淀粉芽孢杆菌在酸化土壤中促进植物生长中的应用也在本专利技术的保护范围之内。其中，所述的植物优选为番茄。其中，所述的酸化土壤是指pH7.0～pH4.2(优选pH6.0～pH4.2)的土壤。上述耐酸产乙偶姻的解淀粉芽孢杆菌在抑制尖孢镰刀病原菌、玉米大斑病原菌或甜瓜枯萎病原菌中的应用也在本专利技术的保护范围之内。有益效果：本专利技术提供的解淀粉芽孢杆菌NRCB005能显著提高番茄等作物的耐酸能力，在未酸化土壤和酸化土壤中，接种解淀粉芽孢杆菌NRCB005番茄的鲜重分别较空白增加52％和45％。本专利技术的解淀粉芽孢杆菌株NRCB005通过纯培养试验、实验室平板试验和温室盆栽实验证明其能够产生挥发性有机气体乙偶姻，能有效抑制尖孢镰刀病原菌、玉米大斑病原菌、甜瓜枯萎病原菌，从而促进番茄的生长，具有良好的应用前景。附图说明图1为解淀粉芽孢杆菌NRCB005在固氮培养基上的菌落形态。图2为NRCB005乙偶姻色谱检测结果，其中，A是3g/L乙偶姻标样，B为1/30的酸度为pH7的48h发酵液。图3为实施例4中解淀粉芽孢杆菌NRCB005对尖孢镰刀病原菌的拮抗作用图4为实施例4中解淀粉芽孢杆菌NRCB005对玉米大斑病原菌的拮抗作用。图5为实施例4中解淀粉芽孢杆菌NRCB005对甜瓜枯萎病原菌的拮抗作用。图6为实施例11中解淀粉芽孢杆菌NRCB005在酸化土壤中盆栽促生效果图。图7为实施例11中解淀粉芽孢杆菌NRCB005在未酸化土壤中盆栽促生效果图。图8为实施例3中解淀粉芽孢杆菌NRCB005耐酸特性。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术的技术方案作进一步详细的说明。实施例仅用以说明本专利技术的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本专利技术进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例进行修改，或者对其中部分进行替换；而这些修改或替换，并不使相应的技术方案脱离本专利技术所要求保护的技术方案的范围。实施例1菌株NRCB005的分离及筛选取10g水稻根际土放入装有90mL盐溶液的锥形瓶中，在28℃、200r/min条件下，振荡1h，制成10-1的土壤悬液，取10-1的土壤悬液10mL，放入装有90mL盐溶液的瓶中，配成10-2的稀释液，以此类推。分本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株耐酸产乙偶姻的解淀粉芽孢杆菌，其分类命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，菌株号为NRCB005，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC NO.17214，保藏日期为2019年1月18日。
【技术特征摘要】
1.一株耐酸产乙偶姻的解淀粉芽孢杆菌，其分类命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)，菌株号为NRCB005，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCCNO.17214，保藏日期为2019年1月18日。2.根据权利要求1所述的耐酸产乙偶姻的解淀粉芽孢杆菌，其特征在于，所述的解淀粉芽孢杆菌具有较好的耐酸特性，在液体培养基中，其能在pH7～pH3.5的环境中正常生长。3.根据权利要求1所述的耐酸产乙偶姻的解淀粉芽孢杆菌，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：应汉杰，朱志玉，高南，陈晓春，陈勇，牛欢青，柳东，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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