T细胞调节性多聚体多肽及其使用方法技术

本公开提供了包含两种不同的免疫调节多肽的T细胞调节性多聚体多肽，所述免疫调节多肽中的至少一种是变体免疫调节多肽。本公开提供了包含编码所述T细胞调节性多聚体多肽的核苷酸序列的核酸，以及包含所述核酸的宿主细胞。本公开提供了调节T细胞的活性的方法；所述方法包括使所述T细胞与本公开的T细胞调节性多聚体多肽接触。

T-cell regulatory polypeptide and its application

The present disclosure provides T cell regulatory polypeptide containing two different immunoregulatory polypeptides, at least one of which is a variant immunoregulatory polypeptide. The present disclosure provides a nucleic acid comprising a nucleotide sequence encoding the regulatory polypeptide of the T cell, and a host cell comprising the nucleic acid. The present disclosure provides a method for regulating the activity of T cells; the method includes contacting the T cells with the T cell regulatory polymer polypeptide of the present disclosure.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】T细胞调节性多聚体多肽及其使用方法交叉引用本申请要求2016年5月18日提交的美国临时专利申请号62/338,410的权益，所述临时专利申请以引用的方式整体并入本文。引言适应性免疫应答涉及存在于T细胞表面上的T细胞受体(TCR)与抗原呈递细胞(APC)表面上非共价呈递的小肽抗原通过主要组织相容性复合物(MHC；在人类中也称为人白细胞抗原(HLA)复合物)接合。这种接合代表了免疫系统靶向机制，并且是T细胞调节(活化或抑制)和效应子功能的必需分子相互作用。在表位特异性细胞靶向后，通过APC上发现的共刺激蛋白与T细胞的对应物共刺激蛋白的接合而活化靶向的T细胞。两种信号–表位/TCR结合和APC共刺激蛋白与T细胞共刺激蛋白的接合–均是驱动T细胞特异性和活化或抑制所必需的。TCR对给定表位具有特异性；然而，共刺激蛋白不是表位特异性的，而是通常在所有T细胞或大T细胞亚群上表达。
技术实现思路
本公开提供了包含两种不同的免疫调节多肽的T细胞调节性多聚体多肽，所述免疫调节多肽中的至少一种是变体免疫调节多肽。本公开提供了包含编码所述T细胞调节性多聚体多肽的核苷酸序列的核酸，以及包含所述核酸的宿主细胞。本公开本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种T细胞多聚体多肽，其包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N末端至C末端依次包含：i)表位；和ii)第一主要组织相容性复合物(MHC)多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N末端至C末端依次包含：i)第二MHC多肽；和ii)任选的免疫球蛋白(Ig)Fc多肽或非Ig支架，其中所述T细胞多聚体多肽至少包含第一和第二免疫调节结构域，其中所述第一免疫调节结构域和所述第二免疫调节结构域各自独立地：A)在所述第一多肽的所述C末端；B)在所述第二多肽的所述N末端；C)在所述第二多肽的所述C末端；或D)在所述第一多肽的所述C末端且在所述第二多肽的所述N末端，其中所述第一免疫调节多肽和所述第二免疫调节多肽结...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.05.18 US 62/338,4101.一种T细胞多聚体多肽，其包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N末端至C末端依次包含：i)表位；和ii)第一主要组织相容性复合物(MHC)多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N末端至C末端依次包含：i)第二MHC多肽；和ii)任选的免疫球蛋白(Ig)Fc多肽或非Ig支架，其中所述T细胞多聚体多肽至少包含第一和第二免疫调节结构域，其中所述第一免疫调节结构域和所述第二免疫调节结构域各自独立地：A)在所述第一多肽的所述C末端；B)在所述第二多肽的所述N末端；C)在所述第二多肽的所述C末端；或D)在所述第一多肽的所述C末端且在所述第二多肽的所述N末端，其中所述第一免疫调节多肽和所述第二免疫调节多肽结合不同的共免疫调节多肽，并且其中所述第一免疫调节结构域和所述第二免疫调节结构域中的一个结合第一共免疫调节多肽和第二共免疫调节多肽，并且是结合至所述第一共免疫调节多肽的亲和力比结合至所述第二免疫调节多肽的亲和力更高的变体。2.如权利要求1所述的T细胞多聚体多肽，其中对所述第一共免疫调节多肽与所述第二共免疫调节多肽的结合亲和力的比率是至少1.5:1。3.如权利要求1所述的T细胞多聚体多肽，其中对所述第一共免疫调节多肽与所述第二共免疫调节多肽的结合亲和力的比率是2:1至10:1。4.如权利要求1所述的T细胞多聚体多肽，其中所述第一免疫调节多肽是变体CD80多肽，所述第一共免疫调节多肽是CD86，并且所述第二免疫调节多肽是CTLA4，并且其中所述变体CD80多肽结合CD86的亲和力比所述变体CD80多肽对CTLA4的亲和力高至少50％。5.一种多聚体多肽，其包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N末端至C末端依次包含：i)表位；ii)第一主要组织相容性复合物(MHC)多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N末端至C末端依次包含：i)第二MHC多肽；以及ii)任选的免疫球蛋白(Ig)Fc多肽或非Ig支架，其中所述多聚体多肽至少包含第一和第二免疫调节结构域，其中所述第一免疫调节结构域和所述第二免疫调节结构域各自独立地：A)在所述第一多肽的所述C末端；B)在所述第二多肽的所述N末端；C)在所述第二多肽的所述C末端；或D)在所述第一多肽的所述C末端且在所述第二多肽的所述N末端，其中所述第一免疫调节结构域和所述第二免疫调节结构域中的一个是变体CD80多肽，所述变体CD80多肽相对于SEQIDNO:1具有至少一个氨基酸取代，其中所述第一免疫调节结构域和所述第二免疫调节结构域中的一个是变体4-1BBL多肽，所述变体4-1BBL多肽相对于SEQIDNO:2-4中的一个具有至少一个氨基酸取代。6.如权利要求5所述的多聚体多肽，其中所述多聚体多肽对具有图4A-4C之一中描绘的氨基酸序列的CD28多肽表现出的结合亲和力与包含含有图2中描绘的所述CD80氨基酸序列的免疫调节结构域的对照多聚体多肽对所述CD28多肽的结合亲和力相比或与包含含有如SEQIDNO:1中列出的所述CD80氨基酸序列的免疫调节结构域的对照多聚体多肽对所述CD28多肽的结合亲和力相比降低，和/或其中：i)所述多聚体多肽对具有图5中描绘的氨基酸序列的4-1BB多肽表现出的结合亲和力与包含含有图3中描绘或SEQIDNO:2-4之一中列出的所述4-1BBL氨基酸序列的免疫调节结构域的对照多聚体多肽对所述4-1BB多肽的结合亲和力相比降低。7.如权利要求5所述的多聚体多肽，其中所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N末端至C末端依次包含：i)所述表位；ii)所述第一MHC多肽；以及iii)变体4-1BBL多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N末端至C末端依次包含：i)变体CD80多肽；ii)所述第二MHC多肽。8.如权利要求5所述的多聚体多肽，其中所述多聚体多肽包含：a)第一多肽，所述第一多肽从N末端至C末端依次包含：i)所述表位；ii)所述第一MHC多肽；以及iii)变体CD80多肽；以及b)第二多肽，所述第二多肽从N末端至C末端依次包含：i)变体4-1BBL多肽；ii)所述第二MHC多肽。9.如权利要求5所述的多聚体多肽，其中所述非Ig支架是XTEN多肽、转铁蛋白多肽、弹性蛋白样多肽、丝状多肽或丝-弹性蛋白样多肽。10.如权利要求5-9中任一项所述的多聚体多肽，其中所述第一MHC多肽是β2-微球蛋白多肽；并且其中所述第二MHC多肽是MHCI类重链多肽。11.如权利要求10所述的多聚体多肽，其中所述β2-微球蛋白多肽包含与图8中列出的氨基酸序列之一具有至少85％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。12.如权利要求11所述的多聚体多肽，其中所述MHCI类重链多肽是HLA-A、HLA-B或HLA-C重链。13.如权利要求12所述的多聚体多肽，其中所述MHCI类重链多肽包含与图7A-7C之一中列出的氨基酸序列具有至少85％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。14.如权利要求5-9中任一项所述的多聚体多肽，其中所述第一MHC多肽是MHCII类α链多肽；并且其中所述第二MHC多肽是MHCII类β链多肽。15.如权利要求5-14中任一项所述的多聚体多肽，其中所述表位是T细胞表位。16.如权利要求5-15中任一项所述的多聚体多肽，其中所述多聚体多肽包含Fc多肽，并且其中所述IgFc多肽是IgG1Fc多肽、IgG2Fc多肽、IgG3Fc多肽、IgG4Fc多肽、IgAFc多肽或IgMFc多肽。17.如权利要求16所述的多聚体多肽，其中所述IgFc多肽包含与图6A-6C中描绘的氨基酸序列具有至少85％氨基酸序列同一性的氨基酸序列。18.如权利要求5-17中任一项所述的多聚体多肽，其中所述第一多肽和所述第二多肽是非共价缔合的。19.如权利要求5-17中任一项所述的多聚体多肽，其中所述第一多肽和所述第二多肽是共价连接的。20.如权利要求19所述的多聚体多肽，其中所述共价键联是经由二硫键。21.如权利要求20所述的多聚体多肽，其中所述第一MHC多肽或所述表位与所述第一MHC多肽之间的接头包含氨基酸取代以提供第一Cys残基，并且所述第二MHC多肽包含氨基酸取代以提供第二Cys残基，并且其中所述二硫键联位于所述第一Cys残基与所述第二Cys残基之间。22.如权利要求5-21中任一项所述的多聚体多肽，其包含插入在所述表位与所述第一MHC多肽之间的第一接头。23.如权利要求5-22中任一项所述的多聚体多肽，其中所述第一免疫调节多肽或所述第二免疫调节多肽是变体CD80免疫调节多肽，所述变体CD80免疫调节多肽包含氨基酸I67、K86或D158的取代。24.如权利要求5-22中任一项所述的多聚体多肽，其中所述第一免疫调节多肽或所述第二免疫调节多肽是变体4-1BBL免疫调节多肽，所述变体4-1BBL免疫调节多肽包含K127的取代。25.如权利要求5-24中任一项所述的多聚体多肽，其中所述变体4-1BBL多肽包含与氨基酸序列PAGLLDLRQGMFAQLVAQNVLLIDGPLSWYSDPGLAGVSLTGGLSYXEDTKELVVAKAGVYYVFFQLELRRVVAGEGSGSVSLALHLQPLRSAAGAAALALTVDLPPASSEARNSAFGFQGRLLHLSAGQRLGVHLHTEARARHAWQLTQGATVLGLFRVTPEIPAGLPSPRSE(SEQIDNO:11)具有至少90％氨基酸序列同一性的氨基酸序列，其中X是Ala、Gly、Val、Ile、Leu、Arg、His、Glu或Asp。26.如权利要求25所述的多聚体多肽，其中所述变体CD80多肽包含与氨基酸序列VIHVTKEVKEVATLSCGHNVSVEELAQTRIYWQKEKKMVLTMMSGDMNIWPEYKNRTIFDITNNLSXVILALRPSDEGTYECVVLKYEKDAFKREHLAEVTLSVKADFPTPSISDFEIPTSNIRRIICSTSGGFPEPHLSWLENGEELNAINTTVSQDPETELYAVSSKLDFNMTTNHSFMCLIKYGHLRVNQTFNWNTTKQEHFPDN(SEQIDNO:5)具有至少90％氨基酸序列同一性的氨基酸序列，其中X是Ala、Gly、Val、Leu、Arg、His、Lys、Glu或Asp。27.如权利要求25所述的多聚体多肽，其中所述变体CD80多肽包含与氨基酸序列VIHVTKEVKEVATLSCGHNVSVEELAQTRIYWQKEKKMVLTMMSGDMNIWPEYKNRTIFDITNNLSIVILALRPSDEGTYECVVLXYEKDAFKREHLAEVTLSVKADFPTPSISDFEIPTSNIRRIICSTSGGFPEPHLSWLENGEELNAINTTVS...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗纳德·D·赛德尔三世，罗多尔福·查帕罗，
申请(专利权)人：库尔生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US