The invention discloses a method for detecting microcystin LR in water by high performance liquid chromatography fluorescence, in particular relates to a method for detecting microcystin LR in water by high performance liquid chromatography fluorescence, which belongs to the field of water environment monitoring technology or agricultural monitoring technology. Based on the characteristics that microcystins LR can stimulate fluorescence under ultraviolet light, the invention realizes the rapid, accurate and efficient detection of microcystins LR in water by means of high performance liquid chromatography through filtering, enrichment, elution, concentration and volumetric determination of samples, which has guiding significance for monitoring, controlling and protecting water pollution.
【技术实现步骤摘要】
一种高效液相荧光色谱法检测水中微囊藻毒素-LR的方法一、
本专利技术属于水环境监测技术或农业监测
,具体涉及水体中微囊藻毒素-LR的一种高效液相荧光色谱检测方法。二、
技术介绍
微囊藻毒素(Microcystins,MCs),是由蓝藻门中铜绿微囊藻、水华鱼腥藻、颤藻等发生水化所产生的一类环状七肽毒素代谢物,目前已发现90多个异构体组成,具有强致癌性,长期饮用富含高浓度MCs的水可能诱发肝癌,MCs还可以通过食物链进行生物富集,对人体造成损伤,具有持久性生物污染,其中微囊藻毒素MC-LR(L代表亮氨酸,R代表精氨酸)为毒性最强、分布最广的一种构型。随着污染状况的不断加剧,蓝藻水华现象在全球范围内的湖泊、河流、水库中频繁发生,水体中产生的微囊藻毒素严重威胁着水质和食品安全,这已成为国内外普遍关注的卫生和环境问题。MCs化学性质稳定,目前自来水厂传统的处理工艺(如:沉淀、过滤、加氯)不能将其去除,鉴于MCs污染的普遍性和较强的毒性,水体中MC-LR的含量已被多国作为衡量水质等级的重要指标参数,世界卫生组织和我国《生活饮用水卫生标准》均规定了地表水源地、生活饮用水MCs(以MC-LR为代表)的浓度不得高于1.0μg/L。目前,常用检测MC-LR的方法主要有化学检测法、免疫测定法和生物测定法。化学检测法主要包括薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)、毛细管电泳(CE)、液相色谱/质谱分析法(LC/MS)等。这些检测方法均利用MCs的物化性质结合灵敏的光电技术进行分析测定,虽然也取得了不错的测定效果,但存在仪器设备运行成本高、前处理复杂耗时、回收率不高等不足。 ...
【技术保护点】
1.一种高效液相荧光色谱法检测水中微囊藻毒素‑LR的方法,其特征在于,是利用微囊藻毒素‑LR分子受激发光照射能够发射出特定荧光、热稳定性好等理化特征,在寻找和确定出最优激发光波长和发射光波长的前提下,结合固相萃取法对水样进行过滤、富集、洗脱和浓缩等前处理,并优化高效液相色谱检测条件对水体中微囊藻毒素‑LR进行快速、高灵敏的检测;具体步骤如下:步骤一、水样的预处理取水样1000mL,并将水样过0.45μm的水系滤膜,待固相萃取;步骤二、活化分离柱用甲醇5~15mL、流速2.0~5.0mL/min预洗分离柱,再用5~15mL水、流速2.0~5.0mL/min活化分离柱,并确保不让分离柱流干;步骤三、样品富集将预处理的1000mL水样以5~15mL/min的流速过已活化好的分离柱进行样品富集;步骤四、干燥分离柱先用2~10mL水以5~15mL/min流速淋洗分离柱后,再用5~15mL 20%甲醇以2~10mL/min流速再次淋洗分离柱,最后用10~30mL高纯氮气以10~30mL/min流速气推分离分离柱,并氮吹分离柱10~50min,使分离柱干燥;步骤五、样品洗脱与浓缩注射泵采用0.1%三 ...
【技术特征摘要】
1.一种高效液相荧光色谱法检测水中微囊藻毒素-LR的方法,其特征在于,是利用微囊藻毒素-LR分子受激发光照射能够发射出特定荧光、热稳定性好等理化特征,在寻找和确定出最优激发光波长和发射光波长的前提下,结合固相萃取法对水样进行过滤、富集、洗脱和浓缩等前处理,并优化高效液相色谱检测条件对水体中微囊藻毒素-LR进行快速、高灵敏的检测;具体步骤如下:步骤一、水样的预处理取水样1000mL,并将水样过0.45μm的水系滤膜,待固相萃取;步骤二、活化分离柱用甲醇5~15mL、流速2.0~5.0mL/min预洗分离柱,再用5~15mL水、流速2.0~5.0mL/min活化分离柱,并确保不让分离柱流干;步骤三、样品富集将预处理的1000mL水样以5~15mL/min的流速过已活化好的分离柱进行样品富集;步骤四、干燥分离柱先用2~10mL水以5~15mL/min流速淋洗分离柱后,再用5~15mL20%甲醇以2~10mL/min流速再次淋洗分离柱,最后用10~30mL高纯氮气以10~30mL/min流速气推分离分离柱,并氮吹分离柱10~50min,使分离柱干燥;步骤五、样品洗脱与浓缩注射泵采用0.1%三氟乙酸甲醇溶液1~5mL、流速10~30mL/min进行清洗,再用0.1%三氟乙酸甲醇5~15mL、流速1~5mL/min洗脱分离柱,再将洗脱液过无水硫酸钠柱进行脱水干燥,最后用氮气5~15mL、流速10~30mL/min气推分离柱,并收集洗脱液;将收集的洗脱液在温度为35℃~45℃条件下浓缩,氮吹浓缩至1.0mL,并过0.45μm的有机滤膜,待高效液相色谱仪测定;步骤六、测定色谱测定条件为:采用SHIMPACKCLC-ODS色谱柱,荧光检测器的激发波长范围为249~254nm,发射波长范围为293~298nm;流动相为甲醇(0.05%三氟乙酸):水(0.05%三氟乙酸)=(55~65)...
【专利技术属性】
技术研发人员:赵文晋,刘沛友,顾桂飞,陈涛,李少香,黄生平,李钊,
申请(专利权)人:赵文晋,
类型:发明
国别省市:贵州,52
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