一种乙酰胆碱酯酶活性检测试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开了一种乙酰胆碱酯酶活性检测试剂盒，属于生化检测领域，旨在更为准确的检测待检物中乙酰胆碱酯酶的活性，其技术方案要点是包括盒体，所述盒体内嵌设有限位板，所述限位板上开设有第一孔、第二孔、第三孔、第一环槽、第四孔；所述第一孔内嵌设有放有提取液的第一试剂瓶，所述第二孔内嵌设有放有柠檬酸钠溶液的第二试剂瓶，所述第三孔内嵌有放有碘化硫代乙酰胆碱的第三试剂瓶；所述第一环槽内嵌设有放有二硫对硝基苯甲酸的第四试剂瓶，所述第四孔内嵌设有放有三氯乙酸的第五试剂瓶。本实用新型专利技术解决了乙酰胆碱酯酶活性检测方法的检测结果准确度较低的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种乙酰胆碱酯酶活性检测试剂盒
本技术涉及生化检测领域，特别涉及一种乙酰胆碱酯酶活性检测试剂盒。
技术介绍
乙酰胆碱酯酶广泛存在于各种动物组织和血清中，它可以通过将乙酰胆碱水解成胆碱来特异性调节乙酰胆碱水平，从而阻止神经信号的传递，以此保障生物体内信号分子的正常运转。因此，乙酰胆碱酯酶活性的测量和监测具有重要的现实意义和经济价值。现有技术中常用的乙酰胆碱酯酶活性检测方法是将待检物中的乙酰胆碱酯酶和氯化乙酰胆碱反应生成酶促反应产物，随后加入二硫对硝基苯甲酸与酶促反应产物反应生成存在420nm特征吸收峰的终产物，通过测定420nm处的特征吸收峰来确定乙酰胆碱酯酶活性。但是，乙酰胆碱酯酶提取液中一般含有谷胱甘肽，而二硫对硝基苯甲酸会与谷胱甘肽发生反应，其产物在412nm处的存在特征吸收峰，从而对最终测定结果产生影响，这就导致该检测方法存在结果的不准确性。此外，该检测方法中参与反应的氯化乙酰胆碱也会和二硫对硝基苯甲酸发生反应，从而影响检测结果。再者，该检测方法在检测过程中会加入磷酸盐缓冲液，二硫对硝基苯甲酸在磷酸盐缓冲液中稳定差，也会对检测结果产生影响。
技术实现思路
本技术的目的在于提供一种乙酰胆碱酯酶活性检测试剂盒，采用碘化硫代乙酰胆碱代替氯化乙酰胆碱作为酶促反应底物、使用柠檬酸钠水溶液代替磷酸盐缓冲液，提高了乙酰胆碱酯酶活性的检测准确性。本技术的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：一种乙酰胆碱酯酶活性检测试剂盒，包括盒体，所述盒体内嵌设有限位板，所述限位板上开设有第一孔、第二孔、第三孔、第一环槽、第四孔；所述第一孔内嵌设有放有提取液的第一试剂瓶，所述第二孔内嵌设有放有柠檬酸钠溶液的第二试剂瓶，所述第三孔内嵌有放有碘化硫代乙酰胆碱的第三试剂瓶；所述第一环槽内嵌设有放有二硫对硝基苯甲酸的第四试剂瓶，所述第四孔内嵌设有放有三氯乙酸的第五试剂瓶。通过采用上述技术方案，检测人员按照试剂盒说明书给定的操作步骤进行操作，通过使用碘化硫代乙酰胆碱代替氯化乙酰胆碱作为酶促反应底物，可消除氯化乙酰胆碱和二硫对硝基苯甲酸反应对检测结果产生的影响；采用对照实验的方法可消除谷胱甘肽和二硫对硝基苯甲酸反应对检测结果产生的影响；使用柠檬酸钠水溶液代替磷酸盐缓冲液作为整个体系的缓冲液来稳定二硫对硝基苯甲酸，可提高检测结果的稳定性，更加准确的检测乙酰胆碱酯酶的活性。本技术进一步设置为：所述第三试剂瓶为棕色塑料瓶。通过采用上述技术方案，第三试剂瓶颜色为棕色，使第三试剂瓶内的试剂处于避光状态，能避免第三试剂瓶内的试剂受光分解。本技术进一步设置为：所述第四试剂瓶为棕色塑料瓶。通过采用上述技术方案，第四试剂瓶颜色为棕色，使第四试剂瓶内的试剂处于避光状态，能避免第四试剂瓶内的试剂受光分解。本技术进一步设置为：所述第四试剂瓶的瓶底为嵌入第一环槽的环形瓶底。通过采用上述技术方案，第四试剂瓶与限位板的连接更加紧密，使第四试剂瓶的存放稳固性较好。本技术进一步设置为：所述第五试剂瓶为棕色塑料瓶。通过采用上述技术方案，第五试剂瓶颜色为棕色，使第五试剂瓶内的试剂处于避光状态，能避免第五试剂瓶内的试剂受光分解。本技术进一步设置为：所述盒体使用硬纸板为材料制得。通过采用上述技术方案，使用硬纸板为材料制得的盒体具有原材料可再生，降解周期短的特点，有助于环境保护。本技术进一步设置为：所述盒体使用瓦楞纸板制得。通过采用上述技术方案，瓦楞纸板自身结构强度较高，有助于提高盒体的结构强度，为试剂盒提供稳定的保护。本技术进一步设置为：所述限位板使用硬纸板为材料制得。通过采用上述技术方案，使用硬纸板为材料制得的限位板具有原材料可再生，降解周期短的特点，有助于环境保护。综上所述，本技术具有以下有益效果：1、通过使用碘化硫代乙酰胆碱代替氯化乙酰胆碱作为酶促反应底物，可消除氯化乙酰胆碱和二硫对硝基苯甲酸反应对检测结果产生的影响；2、采用对照实验的方法可消除谷胱甘肽和二硫对硝基苯甲酸反应对检测结果产生的影响；3、使用柠檬酸钠水溶液代替磷酸盐缓冲液作为整个体系的缓冲液来稳定二硫对硝基苯甲酸，可提高检测结果的稳定性，更加准确的检测乙酰胆碱酯酶的活性。附图说明图1是乙酰胆碱酯酶活性检测试剂盒的结构示意图。图中，1、盒体；2、限位板；21、第一孔；22、第二孔；23、第三孔；24、第一环槽；25、第四孔；3、第一试剂瓶；4、第二试剂瓶；5、第三试剂瓶；6、第四试剂瓶；7、第五试剂瓶。具体实施方式以下结合附图对本技术作进一步详细说明。其中相同的零部件用相同的附图标记表示。需要说明的是，下面描述中使用的词语“前”、“后”、“左”、“右”、“上”和“下”指的是附图中的方向，词语“底面”和“顶面”、“内”和“外”分别指的是朝向或远离特定部件几何中心的方向。实施例1一种乙酰胆碱酯酶活性检测试剂盒，如图1所示，包括由硬纸板为材料制成的盒体1，硬纸板为材料制成的盒体1具有可再生，降解周期短的特点。盒体1在本实施例中使用瓦楞纸板为材料制得，瓦楞纸板自身结构强度较高，有助于提高盒体1的结构强度，为试剂盒提供稳定的保护。盒体1内放置有使用硬纸板为材料制成的限位板2，限位板2上开设有第一孔21、第二孔22、第三孔23、第一环槽24、第四孔25。第一孔21内插入有第一试剂瓶3，第一试剂瓶3内放置有提取液，提取液由0.45g柠檬酸钠、0.45mL聚乙二醇辛基苯基醚和45mL蒸馏水组成，第一试剂瓶3为圆柱白色塑料瓶。第一试剂瓶3内的溶液用于提取待测物中的乙酰胆碱酯酶。第二孔22内插入有第二试剂瓶4，第二试剂瓶4内放置有由0.55g柠檬酸钠和55mL蒸馏水组成的溶液，第二试剂瓶4为圆柱白色塑料瓶。第一试剂瓶3和第二试剂瓶4尺寸规格相同。第三孔23内插入有第三试剂瓶5，第三试剂瓶5内放置有116mg碘化硫代乙酰胆碱，第三试剂瓶5为圆柱棕色塑料瓶。第三试剂瓶5内的粉剂作为乙酰胆碱酯酶酶促反应中的底物。第一环槽24内插入有第四试剂瓶6，第四试剂瓶6内放置有10mg二硫对硝基苯甲酸，第四试剂瓶6的瓶底为嵌入第一环槽24的环形瓶底，第四试剂瓶6为棕色塑料瓶。第四试剂瓶6内的粉剂是与酶促反应的产物反应生成在420nm下有特征吸收峰的物质来测定乙酰胆碱酯酶活性。第三试剂瓶5和第四试剂瓶6尺寸规格相同。第四孔25内插入有第五试剂瓶7，第五试剂瓶7内放置有0.5g三氯乙酸，第五试剂瓶7为棕色圆柱形塑料瓶，第五试剂瓶7的直径小于其它试剂瓶。第五试剂瓶7内的粉剂使乙酰胆碱酯酶变性从而使酶促反应终止。试剂盒于4℃保存环境下保存。第二试剂瓶4内的溶剂是整个反应体系的缓冲液、同时也是第三试剂瓶5和第四试剂瓶6中粉剂的溶剂和稳定剂。其测定步骤如下：1、若为组织样本，取约0.1g的组织，加入1mL第一试剂瓶3内的提取液进行冰浴匀浆，8000g4℃离心10min，取上清液待测；若为真菌或细菌，取500万细胞加入1mL提取液，冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min），然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测；若为血清（浆）等液体：直接测定。2、分光光度计预热30min，调节波长到412nm，蒸馏水调零；3、取第二试剂瓶4的内的溶液5.2mL加入第三本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种乙酰胆碱酯酶活性检测试剂盒，包括盒体(1)，其特征在于：所述盒体(1)内嵌设有限位板(2)，所述限位板(2)上开设有第一孔(21)、第二孔(22)、第三孔(23)、第一环槽(24)、第四孔(25)；所述第一孔(21)内嵌设有放有提取液的第一试剂瓶(3)，所述第二孔(22)内嵌设有放有柠檬酸钠溶液的第二试剂瓶(4)，所述第三孔(23)内嵌有放有碘化硫代乙酰胆碱的第三试剂瓶(5)；所述第一环槽(24)内嵌设有放有二硫对硝基苯甲酸的第四试剂瓶(6)，所述第四孔(25)内嵌设有放有三氯乙酸的第五试剂瓶(7)。

【技术特征摘要】
1.一种乙酰胆碱酯酶活性检测试剂盒，包括盒体(1)，其特征在于：所述盒体(1)内嵌设有限位板(2)，所述限位板(2)上开设有第一孔(21)、第二孔(22)、第三孔(23)、第一环槽(24)、第四孔(25)；所述第一孔(21)内嵌设有放有提取液的第一试剂瓶(3)，所述第二孔(22)内嵌设有放有柠檬酸钠溶液的第二试剂瓶(4)，所述第三孔(23)内嵌有放有碘化硫代乙酰胆碱的第三试剂瓶(5)；所述第一环槽(24)内嵌设有放有二硫对硝基苯甲酸的第四试剂瓶(6)，所述第四孔(25)内嵌设有放有三氯乙酸的第五试剂瓶(7)。2.根据权利要求1所述的一种乙酰胆碱酯酶活性检测试剂盒，其特征在于：所述第三试剂瓶(5)为棕色塑料瓶。3.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾映彤，陈新新，刘希宇，马玉岭，
申请(专利权)人：北京索莱宝科技有限公司，
类型：新型
国别省市：北京,11