化学药剂与绿僵菌联用对昆虫防治效果的检测方法技术

本发明专利技术公开了化学药剂与绿僵菌联用对昆虫防治效果的检测方法。本发明专利技术公开的化学药剂与绿僵菌联用对昆虫防治效果的检测方法，包括：1)用化学药剂与绿僵菌联合处理昆虫，得到联合处理昆虫；用化学药剂处理昆虫，得到化学药剂处理昆虫；用绿僵菌处理昆虫，得到绿僵菌处理昆虫；2)检测联合处理昆虫、化学药剂处理昆虫和绿僵菌处理昆虫的全酯酶、谷胱甘肽S‑转移酶、乙酰胆碱酯酶、几丁质酶、芳基酰胺酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶的活性，计算增效指数，根据增效指数确定化学药剂与绿僵菌联用对昆虫的防治效果。实验证明，可以利用本发明专利技术的方法检测化学药剂与绿僵菌联用对昆虫防治效果。

【技术实现步骤摘要】
化学药剂与绿僵菌联用对昆虫防治效果的检测方法
本专利技术涉及生物
中，化学药剂与绿僵菌联用对昆虫防治效果的检测方法。
技术介绍
绿僵菌作为绿色生物农药，对昆虫具有一定的防治效果。由于绿僵菌发挥毒力作用需经过粘附、孢子萌发、穿透虫体、体内发育等过程，杀死昆虫的时间较缓慢。为了缩短其作用时间并期望取得良好的杀虫效果，相关学者将化学药剂作为增效剂与绿僵菌混合作用于昆虫，并取得良好的杀虫效果。Zurek等对德国小蠊Blattellagermanica研究发现以8.96×109个分生孢子/m2的剂量单独施用金龟子绿僵菌(Metarhiziumanisopliae)，LT50为10天，相对比之下8.96×108个分生孢子/m2的金龟子绿僵菌(Metarhiziumanisopliae)和12.5％(w/w)的硼酸混用LT50为5天。Jaramillo等对地下害虫Cyrtomenusbergi研究发现1.0×107个孢子/g的M.anisopliae和1.05μg/g吡虫啉混用20天后C.bergi的死亡率为88.1％，而单独施用M.anisopliae死亡率只有39.5％。目前有关评价绿僵菌与化学药剂混用效果的方法比较单一，缺少衡量增效效果的标准，在绿僵菌与化学药剂的联合使用研究中更没有出现以增效指数来评价两者联合作用效果。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是如何检测化学药剂与绿僵菌联用对昆虫防治效果。为解决上述技术问题，本专利技术首先提供了化学药剂与绿僵菌联用对昆虫防治效果的检测方法，该方法包括：1)用化学药剂与绿僵菌联合处理昆虫，得到联合处理昆虫；用所述化学药剂处理所述昆虫，得到所述化学药剂处理昆虫；用绿僵菌处理所述昆虫，得到绿僵菌处理昆虫；2)检测所述联合处理昆虫、所述化学药剂处理昆虫和所述绿僵菌处理昆虫的全酯酶、谷胱甘肽S-转移酶、乙酰胆碱酯酶、几丁质酶、芳基酰胺酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶的活性，根据公式1计算增效指数，根据所述增效指数确定所述化学药剂与绿僵菌联用对所述昆虫的防治效果；公式1中，Man表示所述绿僵菌处理昆虫的酶活n，Synn表示所述化学药剂处理昆虫的酶活n，Mixn表示所述联合处理昆虫的的酶活n，n＝1、2、3、4、5、6、7、8和9，酶活1为全酯酶酶活，酶活2为以CDNB为底物时谷胱甘肽S-转移酶酶活，酶活3为以DCNB为底物时谷胱甘肽S-转移酶酶活，酶活4为乙酰胆碱酯酶酶活，酶活5为几丁质酶酶活，酶活6为芳基酰胺酶酶活，酶活7为超氧化物歧化酶酶活，酶活8为过氧化物酶酶活，酶活9为过氧化氢酶酶活；a为所述联合处理所述昆虫时所述化学药剂浓度与所述化学药剂处理所述昆虫时所述化学药剂浓度的比值；b为所述联合处理所述昆虫时绿僵菌孢子浓度与绿僵菌单独处理所述昆虫时绿僵菌孢子浓度的比值，且a+b＝1，a：b≠1；若alog10Synn与blog10Man中一个为正数一个为负数，alog10Synn±blog10Man为alog10Synn+blog10Man，若alog10Synn与blog10Man同为正数或同为负数，alog10Synn±blog10Man为alog10Synn-blog10Man，若alog10Synn和/或blog10Man为0，alog10Synn±blog10Man为alog10Synn+blog10Man。上述方法中，所述根据所述增效指数确定所述化学药剂与绿僵菌联用对所述昆虫的防治效果具体可为：当a：b＞1时，SI＞0，所述化学药剂与绿僵菌联用对所述昆虫的防治效果分别高于或候选高于所述化学药剂对所述昆虫的防治效果以及所述绿僵菌对所述昆虫的防治效果，SI＝0，所述化学药剂与绿僵菌联用对所述昆虫的防治效果相对于所述化学药剂对所述昆虫的防治效果以及所述绿僵菌对所述昆虫的防治效果均无增效作用，SI＜0，所述化学药剂与绿僵菌联用对所述昆虫的防治效果分别低于或候选低于所述化学药剂对所述昆虫的防治效果以及所述绿僵菌对所述昆虫的防治效果；当a：b＜1时，SI＞0，所述化学药剂与绿僵菌联用对所述昆虫的防治效果分别低于或候选低于所述化学药剂对所述昆虫的防治效果以及所述绿僵菌对所述昆虫的防治效果，SI＝0，所述化学药剂与绿僵菌联用对所述昆虫的防治效果相对于所述化学药剂对所述昆虫的防治效果以及所述绿僵菌对所述昆虫的防治效果均无增效作用，SI＜0，所述化学药剂与绿僵菌联用对所述昆虫的防治效果分别高于或候选高于所述化学药剂对所述昆虫的防治效果以及所述绿僵菌对所述昆虫的防治效果。上述方法中，所述昆虫可为飞蝗。上述方法中，所述化学药剂可为吡虫啉或环氧虫啶。为解决上述技术问题，本专利技术还提供了检测化学药剂与绿僵菌联用对昆虫防治效果的成套试剂，该成套试剂由检测昆虫体内全酯酶、谷胱甘肽S-转移酶、乙酰胆碱酯酶、几丁质酶、芳基酰胺酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶至少一种酶的活性的物质组成。上述成套试剂中，所述昆虫可为飞蝗。上述成套试剂中，所述化学药剂可为吡虫啉或环氧虫啶。为解决上述技术问题，本专利技术还提供了下述任一应用：Ⅰ、X1在检测或辅助检测化学药剂与绿僵菌联用对昆虫的防治效果中的应用；所述X1为检测昆虫体内全酯酶、谷胱甘肽S-转移酶、乙酰胆碱酯酶、几丁质酶、芳基酰胺酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶至少一种酶的活性的物质；Ⅱ、所述X1在制备化学药剂与绿僵菌联用对昆虫的防治效果产品中的应用；Ⅲ、所述成套试剂在检测或辅助检测化学药剂与绿僵菌联用对昆虫的防治效果中的应用；Ⅳ、所述成套试剂在制备化学药剂与绿僵菌联用对昆虫的防治效果产品中的应用。上述应用中，所述昆虫可为飞蝗。上述应用中，所述化学药剂可为吡虫啉或环氧虫啶。本专利技术通过检测施用化学药剂与绿僵菌后昆虫体内相关生化酶活的变化，确定了化学药剂与绿僵菌联用对昆虫防治效果的检测方法。利用该方法检测化学药剂与绿僵菌联用对昆虫防治效果与相同条件下得到的飞蝗死亡率的结果一致，表明，可以利用本专利技术的方法及检测昆虫体内全酯酶、谷胱甘肽S-转移酶、乙酰胆碱酯酶、几丁质酶、芳基酰胺酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶酶活的物质检测化学药剂与绿僵菌联用对昆虫防治效果。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本专利技术，而不是为了限制本专利技术的范围。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中的绿僵菌为绿僵菌IMI330189(Niassy,S.etal.,PathogenicityoflocalMetarhiziumanisopliaevar.acridumstrainsonLocustamigratoriamigratorioidesReicheandFarmaireandZonocerusvariegatusLinnaeusinSenegal,AfricanJournalofBiotechnologyVol.10(1),pp.28-33,3January,2011)公众可从申请人处获得该生物材料，该生物材料只为重复本专利技术的相关实验所用，不可作为其它用途使用。下述实施例中的吡虫啉(95％原药)(CAS登记号本文档来自技高网...

【技术保护点】
化学药剂与绿僵菌联用对昆虫防治效果的检测方法，包括：1)用化学药剂与绿僵菌联合处理昆虫，得到联合处理昆虫；用所述化学药剂处理所述昆虫，得到所述化学药剂处理昆虫；用绿僵菌处理所述昆虫，得到绿僵菌处理昆虫；2)检测所述联合处理昆虫、所述化学药剂处理昆虫和所述绿僵菌处理昆虫的全酯酶、谷胱甘肽S‑转移酶、乙酰胆碱酯酶、几丁质酶、芳基酰胺酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶的活性，根据公式1计算增效指数，根据所述增效指数确定所述化学药剂与绿僵菌联用对所述昆虫的防治效果；

【技术特征摘要】
1.化学药剂与绿僵菌联用对昆虫防治效果的检测方法，包括：1)用化学药剂与绿僵菌联合处理昆虫，得到联合处理昆虫；用所述化学药剂处理所述昆虫，得到所述化学药剂处理昆虫；用绿僵菌处理所述昆虫，得到绿僵菌处理昆虫；2)检测所述联合处理昆虫、所述化学药剂处理昆虫和所述绿僵菌处理昆虫的全酯酶、谷胱甘肽S-转移酶、乙酰胆碱酯酶、几丁质酶、芳基酰胺酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶的活性，根据公式1计算增效指数，根据所述增效指数确定所述化学药剂与绿僵菌联用对所述昆虫的防治效果；公式1中，Man表示所述绿僵菌处理昆虫的酶活n，Synn表示所述化学药剂处理昆虫的酶活n，Mixn表示所述联合处理昆虫的的酶活n，n＝1、2、3、4、5、6、7、8和9，酶活1为全酯酶酶活，酶活2为以CDNB为底物时谷胱甘肽S-转移酶酶活，酶活3为以DCNB为底物时谷胱甘肽S-转移酶酶活，酶活4为乙酰胆碱酯酶酶活，酶活5为几丁质酶酶活，酶活6为芳基酰胺酶酶活，酶活7为超氧化物歧化酶酶活，酶活8为过氧化物酶酶活，酶活9为过氧化氢酶酶活；a为所述联合处理所述昆虫时所述化学药剂浓度与所述化学药剂处理所述昆虫时所述化学药剂浓度的比值；b为所述联合处理所述昆虫时绿僵菌浓度与绿僵菌单独处理所述昆虫时绿僵菌浓度的比值，且a+b＝1，a：b≠1；若alog10Synn与blog10Man中一个为正数一个为负数，alog10Synn±blog10Man为alog10Synn+blog10Man，若alog10Synn与blog10Man同为正数或同为负数，a...

【专利技术属性】
技术研发人员：张泽华，贾苗，曹广春，李一波，
申请(专利权)人：中国农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11