本发明专利技术涉及一株海洋细菌BA‑3及其在防治兰花茎腐病病害中的应用。属于微生物技术领域。该海洋细菌解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）BA‑3，保藏号为：CGMCC No.12745。该海洋细菌解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）BA‑3可以防治兰花茎腐病菌和根腐病菌等引起的植物病害，特别可以与兰花共生，在兰花植株体内稳定生存并有效防治兰花茎腐病或根腐病。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一株海洋细菌BA-3及其在防治兰花病害中的应用，属于微生物防治领域。
技术介绍
当前对植物病害的防治主要以化学防治为主，然而化学农药的长期大量使用往往会导致环境污染、农药残留及致病菌产生抗药性等诸多问题，而生防菌以其低毒、无污染、不易产生抗药性和原料易得等特性被人们公认为为理想的微生物。用于防治植物病害的微生物主要是真菌和细菌两大类。其中生防细菌作用机理主要包括三个方面。一是拮抗作用，通过产生的抗生物质抑制病原菌生长；二是竞争作用，即生防菌株与致病性菌株间存在竞争作用，表现为土壤环境或作物根系中的营养竞争，以及根表或根内的侵染位点竞争，通过优先进入植株体内且稳定定殖，阻止或延迟致病性菌株的侵入，起到防病效果；三是诱导寄主产生抗性，通过生物或非生物处理诱导植物的一种自然防御机能，在此过程中抗病相关酶发挥了重要作用。目前，我国登记防治土传病害的生防菌均筛选自陆地寄主，因其耐盐性差在福建省沿海城市盐渍化地中难以发挥正常药效。海洋环境具有高盐、高压、低温、无光照等特点，造就了微生物种类更丰富的多样性和特殊性。海洋细菌作为海洋微生物中一个重要的类群，广泛分布在海洋各种环境中，如近岸、海滩、海洋动植物体内、海水和深海沉积物等。在这些所谓生命的极限环境中，海洋细菌通常具有独特的代谢途径和遗传背景，不仅确保其在极端环境中生存，也使其具备了产生特殊结构和功能的活性物质的能力。因此，海洋环境将成为细菌和细菌代谢产物的重要新来源，从海洋环境中分离筛选对植物病原物具有拮抗活性的细菌对于植物病害的生物防治具有重要的意义。由尖孢镰刀菌（Fusariumoxysporum）引起的兰花茎腐病是兰花种植过程中的毁灭性病害，它是一种世界性土传病害。在福建漳州、龙岩、三明等兰花产区发生严重，一般造成15%-30%产量损失。该病病原菌从假鳞茎伤口入侵，前期，叶片表现失水、扭曲；后期，假鳞茎及根部腐烂，水渍状，最后造成兰花整株死亡。在适宜温度和高湿条件下，极易发生该病害，严重影响植株生长。据报道，因茎腐病造成兰花死亡率可达20-30%，该病害被称之为兰花的“不治之症”。因此，及时有效防控成为兰花安全生产的重大需求。目前，防治茎腐病的主要策略为化学防治和培育抗病品种，化学防治污染环境且危害人类健康，抗病品种培育困难且存在抗性减弱的风险，因此，生物防治因其安全、高效、无残留成为人们最青睐的方法。特别是利用海洋微生物防治植物病害已有不少成功的例子，而有关运用海洋微生物防治兰花茎腐病在国内外未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一株海洋细菌BA-3及其在防治兰花病害中的应用，可用于防治由兰花茎腐病菌或根腐病菌引起的植物病害。本专利技术提供的海洋细菌为解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）BA-3，保藏号为：CGMCCNo.12745。本专利技术提供了所述的海洋细菌BA-3在兰花茎腐病害中的应用。所述植物病害为兰花茎腐病菌引起的植物病害。本专利技术所述的解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）BA-3，已于2016年7月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC），保藏号为：CGMCCNo.12745，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。以上所述解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）BA-3为活性成分的生物菌剂也属于本专利技术的保护范围，在需要的时候，该菌剂中还可包含菌剂制备中常用的载体和辅料。所述解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）BA-3为革兰氏阳性杆菌，菌株在营养琼脂（NA）培养基（每1000mL含有蛋白胨5g，酵母浸膏1g，牛肉膏3g，琼脂粉20g，葡萄糖10g，pH值7.0）平板上生长良好，菌落浅白色，边缘突起，细胞杆状（0.7-0.9×1.8-3.0μm）、链状生长、依靠周生鞭毛运动。产芽孢、芽孢圆形（0.6-0.8×1.0-1.4μm）、中生或端生、孢子囊不膨大。适宜生长温度为25-40℃，低于15℃或高于50℃时菌株不生长。本专利技术的显著优点：本专利技术的海洋细菌解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）BA-3对兰花茎腐病有很强的抑制作用，具有对其引起的真菌病害起到防治作用的潜力。本专利技术的海洋细菌解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）BA-3分离自海南省海口市海边采集的海洋鱼类鱼体，实验证明接种兰花植株后能够有效防治兰花茎腐病，为兰花茎腐病的防治提供了一条环保、简单、有效的途径。附图说明图1为菌株解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）BA-3在NA培养基上的培养特征。图2为不同温度处理对解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）BA-3培养滤液抑制作用的影响。图3为不同pH值处理对解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）BA-3培养滤液抑制作用的影响。图4为菌株解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）BA-3孢子悬浮液对兰花茎腐病的防效结果。其中处理I为同时接种解淀粉芽孢杆菌BA-3培养溶液和茎腐病菌孢子悬浮液的实验结果；处理Ⅱ先接种解淀粉芽孢杆菌培养液，2d后接种茎腐病菌孢子悬浮液的实验结果；处理Ⅲ先接种茎腐病菌孢子悬浮液，2d后接种解淀粉芽孢杆菌培养液的实验结果；以只接茎腐病菌孢子悬浮液为对照（CK）的实验结果。具体实施方式下述实施例中的方法，如无特别说明，均为常规方法。下述实施例中的百分比（%），如无特别说明，均表示质量百分比。其中兰花茎腐病菌菌株F-02分离自发病症状典型的根茎部，按常规方法进行组织分离培养获得，单孢纯化后按柯赫氏法则验证其致病性后移入PDA培养基试管斜面保存。菌株保藏于福建省农业科学院植物保护研究所生态调控室。实施例1：海洋细菌的筛选与鉴定1、海洋细菌的筛选本专利技术的菌株是从海南海口市海洋鱼类上分离获得的，具体方法为：取海鱼的内脏、肠道、鳃和鳍等不同部位进行海洋细菌的分离筛选。采用平板稀释法分离海洋鱼类共附生细菌，取适量样品，分别用无菌海水反复冲洗，尽可能除去样品表面的非共附生微生物，再用无菌吸水纸将样品表面水分吸干，用75%乙醇擦拭，接着将样品称重，匀浆，取上清液，用无菌海水分别按照10-8、10-9、10-10、10-11、10-12稀释，吸取200μL液体，均匀涂布于琼脂培养基（NA）培养基平板上，于培养箱中28℃倒置培养，每天观察培养情况，根据菌株的形态特征和培养特征，去除重复的菌株。纯化的细菌菌株接种斜面培养基中培养后置于4℃冰箱保存备用。在倒好的PDA平板中央接入新鲜的兰花茎腐病菌块，将纯化后的细菌菌株用灭菌牙签点接于距离茎腐病菌琼脂块2cm处。筛选抑菌活性最强的的菌株（抑菌圈直径为35mm），结果获得一株对兰花茎腐病具有很强拮抗作用的菌株（见图1），将该菌株命名为BA-3。2、菌株BA-3的种属鉴定采用常规生理生化特性对BA-3菌株进行鉴定，该菌株为革兰氏阳性杆菌，在营养琼脂（NA）培养基（每1000mL含有蛋白胨5g，酵母浸膏1g，牛肉膏3g，琼脂粉20g，葡萄糖10g，pH值本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株海洋细菌，其特征在于：所述海洋细菌为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）BA‑3，已于2016年7月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No.12745。
【技术特征摘要】
1.一株海洋细菌，其特征在于：所述海洋细菌为解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）BA-3，已于2016年7月7日保藏于中国微生物菌种保...
【专利技术属性】
技术研发人员：姚锦爱，余德亿，兰成忠，黄俊义，黄鹏，
申请(专利权)人：福建省农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：福建;35
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