一种用于环介导等温扩增的试剂及其试剂盒和应用制造技术

本发明专利技术涉及一种用于环介导等温扩增的试剂，其包括纳米颗粒、二硫苏糖醇、肽牛血清、氯化四甲基铵、海藻糖中的至少一种；本发明专利技术还涉及一种含有上述试剂的试剂盒及其应用，该试剂盒还包括：10×恒温buffer、dNTP混合物、MgSO4、Bst DNA聚合酶、指示剂以及水，在由该试剂盒制得的环介导等温扩增反应体系中各组分的终浓度如下：纳米颗粒0‑10mg/mL；二硫苏糖醇0‑10M；肽牛血清0‑10g/mL；氯化四甲基铵0‑100mM；海藻糖0‑50mM；dNTP混合物1.0‑3.0mM；MgSO44‑10mM；Bst DNA聚合酶0.1‑0.5U/μL。本发明专利技术在解决LAMP试剂高成本问题的同时确保检测质量，本发明专利技术所述的试剂盒具有与进口试剂相同的检测效果，其灵敏度、特异性和稳定性均可满足临床实验需求，但检测成本可以大幅度降低，具有良好的应用前景。

A reagent for RING-mediated isothermal amplification and its kit and Application

The invention relates to a reagent for RING-mediated isothermal amplification, which includes at least one of nanoparticles, dithiothreotol, peptide bovine serum, tetramethylammonium chloride and trehalose; the invention also relates to a reagent kit containing the above reagent and its application. The reagent kit also includes 10 * isothermal buffer, dNTP mixture, MgSO4, Bst DNA polymerase, indicator and water. The final concentration of each component in the RING-mediated isothermal amplification reaction system was as follows: nanoparticles 0_10mg/mL; dithiothreitol 0_10M; peptide bovine serum 0_10g/mL; tetramethylammonium chloride 0_100mM; trehalose 0_50mM; dNTP mixture 1.0_3.0mM; MgSO44_10mM; Bst DNA polymerase 0.1_0.5;5 U/mu. The invention solves the problem of high cost of LAMP reagent and ensures the detection quality. The kit has the same detection effect as the imported reagent, and its sensitivity, specificity and stability can meet the needs of clinical experiments, but the detection cost can be greatly reduced and has a good application prospect.

【技术实现步骤摘要】
一种用于环介导等温扩增的试剂及其试剂盒和应用
本专利技术属于核酸扩增
，具体涉及一种用于环介导等温扩增的试剂，以及含有该试剂的试剂盒和该试剂盒的应用。
技术介绍
环介导等温扩增(loop-mediatedisothermalamplification，LAMP)是一种不同于常规PCR的体外核酸基因扩增新技术。LAMP主要利用两对或三对特异性引物和具有链置换活性的BstDNA聚合酶，在恒温条件下的连续快速扩增。与传统的PCR技术相比，此技术具有更高的灵敏度、特异性和扩增效率，抗抑制物能力强，对核酸模板质量要求低，因此可以大大简化核酸抽提的步骤，此技术可以在1h内扩增出109～1010倍靶序列拷贝，检测结果的观察方式灵活多样，可以是：电泳法、浊度法(直接裸眼目视或使用专业设备)、染料法(通过反应体系颜色的变化直接判断结果)、实时荧光曲线法(类似于SYBR实时PCR法)，可以满足各种不同检测平台的要求，目前的应用已日益广泛，已应用于临床诊断、环境监测、食源安全等领域。在医学方面，LAMP技术已应用于细菌类病原微生物的检测、病毒类病原微生物的检测、真菌类微生物的检测、急性传染病的快速现本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于环介导等温扩增的试剂，其特征在于，包括纳米颗粒、二硫苏糖醇、肽牛血清、氯化四甲基铵、海藻糖中的至少一种。

【技术特征摘要】
1.一种用于环介导等温扩增的试剂，其特征在于，包括纳米颗粒、二硫苏糖醇、肽牛血清、氯化四甲基铵、海藻糖中的至少一种。2.根据权利要求1所述的用于环介导等温扩增的试剂，其特征在于，所述纳米颗粒的材质包括金、银、二氧化硅、聚苯乙烯或石墨烯。3.根据权利要求权利要求1所述的用于环介导等温扩增的试剂，其特征在于，所述纳米材颗粒的表面带正电荷或不带电荷，其直径为0-1000nm。4.一种用于环介导等温扩增的试剂盒，其特征在于，含有权利要求1～3中任一项所述的用于环介导等温扩增的试剂。5.根据权利要求4所述的一种用于环介导等温扩增的试剂盒，其特征在于，还包括：10×恒温buffer、dNTP混合物、MgSO4、BstDNA聚合酶以及指示剂。6.根据权利要求5所述的一种用于环介导等温扩增的试剂盒，其特征在于，在环介导等温扩增反应体系中各组分的终浓度如下：纳米颗粒0-10mg/mL；二硫苏糖醇0-10M；肽牛血清0-10g/mL；氯...

【专利技术属性】
技术研发人员：关明，曹国君，
申请(专利权)人：关明，曹国君，
类型：发明
国别省市：上海,31