The invention discloses a liquid fermentation culture method for enriching flavonoids in mulberry yellow, which includes mother seed preparation and liquid culture of mulberry yellow. On the basis of PDA medium, a certain amount of peptone is added to the liquid fermentation culture method, and the strain of Mulberry Yellow is cultured in order to improve the Yellow content in the mycelium of mulberry yellow. Content of ketones. The method of the invention has the advantages of simple and convenient medium configuration, cost saving, high efficiency and high yield of flavonoids, and is an artificial culture method which can meet the requirements of the market.
【技术实现步骤摘要】
一种有利于桑黄中黄酮类物质富集的液体发酵培养方法
本专利技术涉及桑黄领域,具体是一种有利于桑黄中黄酮类物质富集的液体发酵培养方法。
技术介绍
桑黄为珍贵稀有的药用真菌,生长被子植物的树干上,如桑树、杨树、松树等,有“森林黄金”之称,认为是已知高等真菌中抗癌效果最好的珍稀药用菌类之一,已成为药用真菌研究领域的一个热点。桑黄中含有多种化学成分,其中,多糖、黄酮和酚类等物质为其主要有效成分。现代药理作用研究表明,桑黄具有抗氧化、抗肿瘤、增强免疫力、抑菌、消炎、保肝护肝及抑制尿酸等多种药理活性。桑黄也是国际公认的使用免疫疗法治疗癌症的领域中有效率排在前茅的一种真菌。桑黄及其提取物是通过激活人体免疫系统从而产生治疗功效,因此对人体无毒无害,即使长期大剂量服用也无任何毒副作用。对于其他各种因免疫系统异常而引起的疾病如糖尿病,肝功能异常等也有其特别的效果。然而,高等真菌中的次生代谢产物面临着资源匮乏、生物分离、鉴定、生物合成的新陈代谢和筛选模型等诸多挑战,使其大规模生产受到了限制。但是由于受生理状态的特殊性和复杂性以及外部环境的制约,自然界中桑黄子实体稀少,虽能人工栽培出桑黄子实体,但所需条件苛刻,生物学效率低,目前难以实现规模化栽培,自然界中桑黄子实体稀少,野生真菌价格十分昂贵,目前难以实现规模化栽培。针对该问题,目前较多采用液体深层发酵技术,该技术具有无菌、生产条件可控、短时间内可获得大量细胞产物和代谢物、可自动化控制及规模化生产等优点,然而,不少学者对药用真菌发酵进行研究但得到次级代谢产物含量比较低,因此,为了加强药用真菌次生代谢产物的产量,有必要对培养基成分、各 ...
【技术保护点】
1.一种有利于桑黄中黄酮类物质富集的液体发酵培养方法,其特征在于,包括母种制备和桑黄液体培养,母种制备的具体步骤如下:步骤一,PDA培养基配方包括土豆180‑210g、葡萄糖17‑22g,再用蒸馏水定容至1L,pH自然值,按照配方制作培养基,各自分装于250mL的锥形瓶中,做好分类标记,用三角瓶封口膜封口,再外扎一层牛皮纸,与其他待灭菌的实验器具一同放入高压蒸汽灭菌锅,115‑125℃下灭菌20‑28min,降至室温后,放入超净工作台,紫外照射15‑20min;步骤二,取生长于固体斜面且生长状况优良的桑黄菌种,在超净工作台中用接种铲取1 mm2的菌块接种于装有PDA液体培养基的培养瓶中,放入25‑28℃以及转速为150‑210转/分钟的恒温振荡培养箱中;步骤三,24小时内培养基中的菌块周围出现了细微的白色菌丝,培养基颜色为淡黄色;72小时内培养基中的菌块变成外周为细密白色菌丝的菌球,培养基颜色为黄色;培养至第五天,菌球数量增加,培养基颜色为深黄色,此时在超净工作台中向培养瓶中加入高压灭菌过的磁力转子,将培养瓶置于磁力搅拌器上,搅拌速度为1500‑1800转/分钟、温度为25‑28℃并且 ...
【技术特征摘要】
1.一种有利于桑黄中黄酮类物质富集的液体发酵培养方法,其特征在于,包括母种制备和桑黄液体培养,母种制备的具体步骤如下:步骤一,PDA培养基配方包括土豆180-210g、葡萄糖17-22g,再用蒸馏水定容至1L,pH自然值,按照配方制作培养基,各自分装于250mL的锥形瓶中,做好分类标记,用三角瓶封口膜封口,再外扎一层牛皮纸,与其他待灭菌的实验器具一同放入高压蒸汽灭菌锅,115-125℃下灭菌20-28min,降至室温后,放入超净工作台,紫外照射15-20min;步骤二,取生长于固体斜面且生长状况优良的桑黄菌种,在超净工作台中用接种铲取1mm2的菌块接种于装有PDA液体培养基的培养瓶中,放入25-28℃以及转速为150-210转/分钟的恒温振荡培养箱中;步骤三,24小时内培养基中的菌块周围出现了细微的白色菌丝,培养基颜色为淡黄色;72小时内培养基中的菌块变成外周为细密白色菌丝的菌球,培养基颜色为黄色;培养至第五天,菌球数量增加,培养基颜色为深黄色,此时在超净工作台中向培养瓶中加入高压灭菌过的磁力转子,将培养瓶置于磁力搅拌器上,搅拌速度为1500-1800转/分钟、温度为25-28℃并且用黑纸遮盖培养;步骤四,24小时后菌液呈黄褐色,菌丝均匀分布于菌液中并且无污染现象,继续搅拌培养,转速调至1200-1350转/分钟,培养过夜,观察菌液的颜色呈棕褐色,菌液面出现白色浮泡,即液态桑黄母种制备完成,可以进行定量接种;桑黄液体培养的具体步骤如下:步骤一,取土豆180-210g、葡萄糖17-22g...
【专利技术属性】
技术研发人员:王晶,师粒晶,张勇,李福森,刘春明,
申请(专利权)人:长春师范大学,
类型:发明
国别省市:吉林,22
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