一种以HZ816大孔吸附树脂分离纯化飞机草黄酮类物质的方法，包括以食用乙醇从飞机草中提取黄酮类物质而获得粗提物，并将该粗提物以HZ816大孔吸附树脂分离纯化以得到飞机草黄酮类物质的提取物。该方法采用食用乙醇安全无毒地提取并分离飞机草黄酮类物质，变害为宝，不仅能工业化生产安全有效的不同纯度规格的飞机草黄酮类物质提取物，而且真正地实现了安全、简便、合理、经济的飞机草资源的高值化利用和系列产品的工业化生产，充分体现出绿色化学生产的理念和良性循环经济的策略。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种从飞机草中分离纯化黄酮类物质的绿色化学工艺技术，尤指一种采用HZ816大孔吸附树脂分离纯化飞机草中黄酮类物质的绿色分离纯化方法。
技术介绍
飞机草(Eupatorium odoratum L)，菊禾斗(Compositae)泽兰属(Eupatorium)， 又名香泽兰，多年生草本植物，飞机草原产于中美洲，现在南美、非洲、亚洲热带地区广泛分布，生于山坡、旷野、路旁，在我国主要分布于台湾、广东、香港、海南、广西、云南、贵州西南部等地区。飞机草已成为一种世界性的恶性杂草，是入侵我国的外来植物，易繁衍，生长快， 入侵农田，破坏其他植被，影响植物正常生长，对本地植物造成严重的威胁，对植物的多样性造成极大的破坏。2003年国家环境保护局公布危害我国最严重的16种外来入侵物种中， 飞机草危害程度名列第七位。飞机草中含有的化合物主要以黄酮类、萜类、挥发油类和植物留醇类，常作为我国民间中草药，性温，味微酸，具有散瘀消肿、解毒和止血等功效，主要用于跌打肿痛、疮疡肿毒、皮炎和外伤出血。现代药理研究表明，飞机草叶的提取物可抑制绿脓杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、淋球菌等生长，并能促进伤口愈合。飞机草是外来入侵植物，严重危害生态环境，在控制其蔓延的同时，众多科研工作者纷纷开展对其进行综合利用的研究，以变害为宝，对其功能成分的绿色高效分离纯化成为亟待解决的新问题，而黄酮类物质正是众多功能成分中的一种重要组成部分。袁经权等对飞机草95%乙醇提取物的石油醚和氯仿部分进行反复硅胶柱纯化，分离得到10中已知的单体成分，乙酸乙酯部分经过反复硅胶柱纯化，分离得到8中已知的黄酮类物质单体；丁智慧等从飞机草乙酸乙酯提取物中分离得到4种黄酮类物质单体，杨逢建等采用高效液相色谱-二极管阵列检测法测定了飞机草总黄酮的质量分数，飞机草全草的黄酮质量分数较高，无水乙醇浸膏中总黄酮质量分数可达12. 57%，全草中的总黄酮质量分数达2. 07%，其中半数左右为多甲氧基黄酮。上述有关飞机草的提取分离纯化方法能够制备得到具有一定纯度和得率的飞机草黄酮类物质及其单体，但由于受到技术手段的限制以及加工过程中使用了大量的有毒有机溶剂或化学制剂，使得产品明显存在安全性欠佳、产品的品质和市场竞争力不足等缺陷； 同时，利用超声波辅助提取以及大孔吸附树脂分离纯化飞机草黄酮类物质却尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对上述现有技术的不足，提供一种高效、绿色安全、低成本、高得率、高纯度、适用于工业生产的以HZ816大孔吸附树脂分离纯化飞机草黄酮类物质的方法。为了解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案是一种以HZ816大孔吸附树脂分离纯化飞机草黄酮类物质的方法，该方法包括如下步骤a、以食用乙醇提取黄酮类物质粗提物取飞机草于50 60°C烘干、粉碎，用体积浓度为50 60%的食用乙醇，按Ig飞机草粉加15 25ml食用乙醇的比例，在20 25°C 下以120 200W超声波辅助提取1 2h，过200目尼龙布，离心沉淀，取上清液；将上清液在-0. 05 -0. 09MPa、50 60°C条件下浓缩，回收食用乙醇溶剂，真空干燥，即得粗提物。b、将黄酮类物质粗提物以HZ816大孔吸附树脂分离纯化将上述所得黄酮类物质粗提物配制成黄酮类物质浓度为2. 75 3. 25mg/mL的溶液；室温下，将7 9BV该溶液以2. 5 3. 5BV/h的流速通过装有HZ816大孔吸附树脂的层析柱，使树脂吸附至饱和，然后用4 6BV的蒸馏水以1 !3BV/h流速冲洗至无色，再用5 7BV的体积浓度为 50% 70%的食用乙醇以1. 5 2. 5BV/h的流速洗脱黄酮类物质，收集洗脱液，将洗脱液在-0. 05 -0. 09MPa、50 60°C条件下浓缩，回收食用乙醇、真空冷冻干燥，即得飞机草黄酮类物质提取物。上述a步骤中的离心转速为:3500 4500r/min，时间为5 15min。本方法中使用的HZ816大孔吸附树脂的处理购买的树脂先用95%体积浓度的乙醇浸泡4 后装柱(中间换一次乙醇)，再用95%体积浓度的乙醇在柱上清洗，洗到流出的乙醇无混浊后，最后用蒸馏水洗至无醇味。用过的树脂先用95%体积浓度的乙醇洗至无色， 然后用蒸馏水洗至无醇味，再用5%盐酸洗至无色，并用水洗至中性，最后用5% NaOH洗至无色，用水洗至中性，备用。本专利技术方法中，采用经静态吸附与解吸筛选出来的HZ816大孔吸附树脂吸附飞机草黄酮类物质，对未被大孔吸附树脂吸附部分，经减压浓缩回收食用乙醇。对上述步骤中吸附在大孔吸附树脂的飞机草黄酮类物质进行洗脱回收时，先用蒸馏水洗至无色，再用50 60%体积浓度的食用乙醇洗脱飞机草黄酮类物质，得到的黄酮类物质的纯度和得率都较尚ο与现有技术相比，本专利技术的优点是1、集成采用食用乙醇安全无毒地提取飞机草活性成分、HZ816大孔吸附树脂分离纯化飞机草黄酮类物质等方法，不仅能工业化生产安全有效的不同纯度规格的飞机草黄酮类物质提取物，以用于后续的功能产品研发，而且真正地实现了安全、简便、合理、经济的飞机草资源高值化利用和系列产品的工业化生产，充分体现出绿色化学生产的理念和良性循环经济的策略。因而，本专利技术具有理论新颖、技术科学、操作及产品安全、工艺简便、经济可行、环境友好等特点。2、本专利技术选用的HZ816大孔吸附树脂是从D101、HZ816、HZ818、NKA-2、AB-8、 HPD500、HZ906、HZ806、HZ832和HZ16十种大孔吸附树脂通过静态吸附与解吸试验筛选出来的，从极性方面考虑，包含了从非极性到极性树脂，从应用方面考虑，包含了 AB-8等几种分离黄酮类物质的几种经典树脂，从而使得应用HZ816大孔吸附树脂分离纯化飞机草黄酮类物质具有科学的先进性。3、采用天然产物化学及现代化生产技术提取、分离纯化飞机草主要活性成分黄酮类物质，并将其制成国际通行的各种纯度规格的飞机草黄酮类物质提取物，为下一步的研究提供绿色环保型原材料，真正做到变害为宝，满足后续研究的需求。具体实施例方式实施例1 取飞机草于60°C烘干、粉碎，用体积浓度为50%的食用乙醇，按Ig飞机草粉加 20ml食用乙醇的比例，在25°C下以160W超声波辅助提取lh，过200目尼龙布，并用4000r/ min离心机离心lOmin，取上清液；将上清液在-0. 07MPa、60°C条件下浓缩，回收食用乙醇溶剂，真空干燥，即得粗提物，采用三氯化铝比色法，测得黄酮类物质的纯度为9. 15%。选用已经预处理的HZ816大孔吸附树脂作为飞机草黄酮类物质的分离纯化树脂， 将上述黄酮类物质粗提物配制成黄酮类物质浓度为:3mg/mL的溶液；室温下，将8BV此溶液以3BV/h的流速通过装有HZ816大孔吸附树脂的层析柱进行吸附分离，至吸附饱和，然后用 5BV的蒸馏水以2BV/h流速冲洗至无色，再用6BV体积浓度为60%的食用乙醇以2BV/h的流速洗脱黄酮类物质，收集洗脱液，将洗脱液在-0. 07MPa、55°C条件下浓缩，回收食用乙醇、 真空冷冻干燥，即得飞机草黄酮类物质提取物，采用三氯化铝比色法，测得黄酮类物质的得率为96. 21%，纯度为46. 25%。实施例2:取飞机草于50°C烘干、粉碎，用体积浓度为本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：肖文军，盛达成，谭支良，龚志华，
申请(专利权)人：湖南农业大学，
类型：发明
国别省市：
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