肾素化学发光检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开一种肾素化学发光检测试剂盒，所述试剂盒包括试剂1和试剂2，所述试剂1包括缓冲液、磁微粒、生物素标记的抗肾素单克隆抗体和多羟基醇；和所述试剂2包括缓冲液、吖啶酯标记的抗肾素单克隆抗体和多羟基糖。本发明专利技术的肾素检测试剂盒灵敏度高、准确度好并且能降低检测成本。

Renin chemiluminescence detection kit

The invention discloses a renin chemiluminescence detection kit, which comprises a reagent 1 and a reagent 2. The reagent 1 comprises a buffer solution, a magnetic particle, a biotin-labeled anti-renin monoclonal antibody and a polyhydroxy alcohol, and the reagent 2 comprises a buffer solution, an acridine ester-labeled anti-renin monoclonal antibody and a polyhydroxy sugar. The renin detection kit has high sensitivity and accuracy, and can reduce the detection cost.

【技术实现步骤摘要】
肾素化学发光检测试剂盒
本专利技术涉及体外诊断试剂领域，具体涉及一种肾素化学发光检测试剂盒。
技术介绍
肾素(英语：Renin)，也被称为血管紧张素原酶，是肾小球旁器(也称球旁复合体)的球旁细胞释放的一种蛋白水解酶，是肾素-血管紧张素系统的组成部分。肾素经肾静脉进入血液，能催化肝脏分泌进入血浆中的血管紧张素原转变成血管紧张素Ⅰ，和增加醛固酮的生成。增加肾小管对NaCl和水的重吸收血液和肺组织中的转换酶使血管紧张素Ⅰ降解为血管紧张素Ⅱ，后者可被氨基肽酶水解为血管紧张素Ⅲ。这三种血管紧张素均有生物活性，其中血管紧张素Ⅱ、Ⅲ的生物活性较强，而后者在血中的浓度较低，故以血管紧张素Ⅱ的生物活性最强。血管紧张素原和转换酶等经常存在于血浆中，肾素的释放是决定血浆中血管紧张素浓度的关键性条件。目前临床上检测肾素有两种方法：肾素活性和肾素浓度(又称直接肾素法)。肾素活性(PRA)是经典方法，用以测定单位血样中肾素催化产生血管紧张素I的速率，需要先将血样孵育一段时间后再测定新产生的血管紧张素I的浓度，检测过程比较复杂，而且一般采用手工操作，操作过程繁琐、耗时较长，检测结果由于人为因素导致的误差较大。肾素浓度是检测单位血样中肾素分子的质量，一般是用两个单克隆抗体对肾素分子进行双抗体夹心法检测，常见的检测方法有酶联免疫吸附法，放射免疫分析法，化学免疫分析发光法，但这些方法都存在一些不足之处。酶联免疫吸附法多采用手工操作，自动化程度低；操作步骤复杂且时间长；检测结果准确度和精密度较差，灵敏度低。放射免疫分析法，放射性污染大，操作复杂、实验耗时长，试剂盒保存时间短，检测结果不稳定、灵敏度低。化学发光免疫分析法常见的有板式化学发光法和磁微粒化学发光法。板式化学发光法与酶联免疫法相似，自动化程度低，多采用手工操作，检测结果由于人为因素导致的误差较大，灵敏度也较低；磁微粒化学发光法采用全自动仪器进行检测，自动化程度高，结果更稳定，但目前临床上使用的试剂盒普遍存在灵敏度偏低，低端分辨率不足的问题，而且多采用多点校准品定标，增加试剂检测成本和患者负担。在国内，肾素检测在临床上主要以化学发光免疫分析法为主，但由于具有自主知识产权的国产肾素检测试剂盒目前还比较少，而且灵敏度较低，试剂成本高，目前一般只在三甲医院有开展，在三甲以下医院开展较少，因此有待开发对肾素检测灵敏度高、准确度好并且能降低检测成本的检测技术。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供一种肾素化学发光检测试剂盒，所述试剂盒包括试剂1和试剂2，所述试剂1包括缓冲液、磁微粒、生物素标记的抗肾素单克隆抗体和多羟基醇；和所述试剂2包括缓冲液、吖啶酯标记的抗肾素单克隆抗体和多羟基糖。在一种实施方式中，所述试剂1包括0.2mg/mL～0.6mg/mL磁微粒、4μg/mL～12μg/mL生物素标记的抗肾素单克隆抗体和5g/L～50g/L甘露醇或山梨糖醇；和所述试剂2包括2.0μg/mL～6.0μg/mL吖啶酯标记的抗肾素单克隆抗体和5g/L～50g/L海藻糖或蔗糖。在一种实施方式中，所述试剂1包括缓冲液、0.2mg/mL～0.6mg/mL磁微粒、4μg/mL～12μg/mL生物素标记的抗肾素单克隆抗体和5g/L～50g/L甘露醇或山梨糖醇；和所述试剂2包括缓冲液、2.0μg/mL～6.0μg/mL吖啶酯标记的抗肾素单克隆抗体和5g/L～50g/L海藻糖或蔗糖。在一些实施方式中，可以是0.3mg/mL～0.5mg/mL磁微粒；可以是6μg/mL～10μg/mL生物素标记的抗肾素单克隆抗体；和10g/L～40g/L甘露醇或山梨糖醇、20g/L～30g/L甘露醇或山梨糖醇。在一些实施方式中，缓冲液是pH6.0～8.0、5mM～100mM的PBS缓冲液。在一些实施方式中，缓冲液可以是pH7.0～7.5、20mM～80mM的PBS缓冲液、20mM～60mM和20mM～40mM的PBS缓冲液。在一些实施方式中，所述试剂1还包括1g/L～50g/L牛血清白蛋白、5mL/L～20mL/L丙三醇、0.05mL/L～0.2mL/LTritonX-100、10mg/L～50mg/L4-氨基安替比林和0.5mL/L～5mL/Lproclin-300。在一些实施方式中，可以是5g/L～40g/L牛血清白蛋白、10g/L～30g/L牛血清白蛋白、15g/L～25g/L牛血清白蛋白；10mL/L～15mL/L丙三醇；0.1mL/L～0.2mL/LTritonX-100、0.15mL/L～0.2mL/LTritonX-100；20mg/L～40mg/L4-氨基安替比林、15mg/L～30mg/L4-氨基安替比林；和1mL/L～5mL/Lproclin-300、2mL/L～4mL/Lproclin-300。试剂中各组份是组合起来发挥作用，有效降低了试剂背景信号，提高了试剂的灵敏度、稳定性。在一些实施方式中，试剂1包括0.4mg/mL磁微粒、8μg/mL生物素标记的抗肾素单克隆抗体、20mMpH7.4PBS缓冲溶液、10g/L牛血清白蛋白、20g/L甘露醇或山梨糖醇、10mL/L丙三醇、0.1mL/LTritonX-100、20mg/L4-氨基安替比林和1mL/Lproclin-300。在一些实施方式中，所述试剂2还包括5g/L～20g/L酪蛋白、5mL/L～20mL/L丙三醇、0.05mL/L～0.2mL/LTritonX-100、0.5mL/L～5mL/Lproclin-300和10mg/L～50mg/L4-氨基安替比林。在一些实施方式中，所述试剂2可以包括5g/L～10g/L酪蛋白、10g/L～15g/L酪蛋白、15g/L～20g/L酪蛋白；5mL/L～20mL/L丙三醇、5mL/L～100mL/L丙三醇、10mL/L～20mL/L丙三醇；0.05mL/L～0.2mL/LTritonX-100、0.05mL/L～0.1mL/LTritonX-100、0.1mL/L～0.2mL/LTritonX-100；0.5mL/L～5mL/Lproclin-300、0.5mL/L～1mL/Lproclin-300、1mL/L～2mL/Lproclin-300、2mL/L～4mL/Lproclin-300；和10mg/L～20mg/L4-氨基安替比林、20mg/L～30mg/L4-氨基安替比林、30mg/L～40mg/L4-氨基安替比林、/40mg/L～50mg/L4-氨基安替比林。试剂中各组份是组合起来发挥作用，有效降低了试剂背景信号，提高了试剂的灵敏度、稳定性。在一些实施方式中，所述试剂2包括4.0μg/mL吖啶酯标记的抗肾素单克隆抗体、20mMpH7.4PBS缓冲溶液、10g/L酪蛋白、10g/L海藻糖或蔗糖、10mL/L丙三醇、0.1mL/LTritonX-100、1mL/Lproclin-300和20mg/L4-氨基安替比林。在一些实施方式中，所述试剂盒还包括校准品，所述校准品包括PBS缓冲液、肾素抗原、酪蛋白、牛血清白蛋白、海藻糖或蔗糖、丙三醇、TritonX-100、proclin-300和4-氨基安替比林。在一些实施方式中，所述校准品包括10μIU/mL和100μIU/mL肾素抗原、5mM～100mM、pH6.0本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肾素化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括试剂1和试剂2，所述试剂1包括缓冲液、磁微粒、生物素标记的抗肾素单克隆抗体和多羟基醇；和所述试剂2包括缓冲液、吖啶酯标记的抗肾素单克隆抗体和多羟基糖。

【技术特征摘要】
1.一种肾素化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括试剂1和试剂2，所述试剂1包括缓冲液、磁微粒、生物素标记的抗肾素单克隆抗体和多羟基醇；和所述试剂2包括缓冲液、吖啶酯标记的抗肾素单克隆抗体和多羟基糖。2.根据权利要求1所述的肾素化学发光检测试剂盒，所述缓冲液是pH6.0～8.0、5mM～100mM的PBS缓冲液。3.根据权利要求1所述的肾素化学发光检测试剂盒，其特征在于：所述试剂1包括0.2mg/mL～0.6mg/mL磁微粒、4μg/mL～12μg/mL生物素标记的抗肾素单克隆抗体和5g/L～50g/L甘露醇或山梨糖醇；和所述试剂2包括2.0μg/mL～6.0μg/mL吖啶酯标记的抗肾素单克隆抗体和5g/L～50g/L海藻糖或蔗糖。4.根据权利要求3所述的肾素化学发光检测试剂盒，所述试剂盒试剂1还包括1g/L～50g/L牛血清白蛋白、5mL/L～20mL/L丙三醇、0.05mL/L～0.2mL/LTritonX-100、10mg/L～50mg/L4-氨基安替比林和0.5mL/L～5mL/Lproclin-300；优选地所述试剂1包括0.4mg/mL磁微粒、8μg/mL生物素标记的抗肾素单克隆抗体、20mMpH7.4PBS缓冲溶液、10g/L牛血清白蛋白、20g/L甘露醇或山梨糖醇、10mL/L丙三醇、0.1mL/LTritonX-100、20mg/L4-氨基安替比林和1mL/Lproclin-300。5.根据权利要求3所述的肾素化学发光检测试剂盒，所述试剂盒试剂2还包括5g/L～20g/L酪蛋白、5mL/L～20mL/L丙三醇、0.05mL/L～0.2mL/LTritonX-100、0.5mL/L～5mL/Lproclin-300和10mg/L～50mg/L4...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵浩瀚，郭鹏，黄燕玲，田君喜，龙腾镶，
申请(专利权)人：迈克生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51