用于体外扩增造血干细胞的培养体系制造技术

技术编号:18414064 阅读:38 留言:0更新日期:2018-07-11 07:08
本发明专利技术提供用于造血干细胞扩增的培养体系,其包含基础培养基和促进造血干细胞扩增的组合物,所述组合物包含与造血调控有关的早期造血生长因子。本发明专利技术还提供采用该培养体系体外扩增造血干细胞的方法以及包含上述促进造血干细胞扩增的组合物的试剂盒。采用本发明专利技术的上述培养体系对造血干细胞进行体外扩增,可实现造血干细胞的扩增倍数达到数百倍以上,从而可有效解决血液系统疾病的治疗过程中造血干细胞数量不足的问题。

Culture system for in vitro expansion of hematopoietic stem cells

The present invention provides a culture system for the amplification of hematopoietic stem cells, including a basic medium and a composition for promoting the amplification of hematopoietic stem cells. The composition includes early hematopoietic growth factors related to hematopoietic regulation. The invention also provides a method for amplifying hematopoietic stem cells in vitro by using the culture system and a kit containing the above compositions for promoting hematopoietic stem cell expansion. In vitro amplification of hematopoietic stem cells by the culture system of the present invention can achieve hundreds of times more amplification of hematopoietic stem cells, which can effectively solve the problem of the shortage of hematopoietic stem cells in the treatment of blood system diseases.

【技术实现步骤摘要】
用于体外扩增造血干细胞的培养体系
本专利技术涉及干细胞培养领域,具体而言,本专利技术涉及用于体外扩增造血干细胞的培养体系以及采用该培养体系扩增造血干细胞的方法。
技术介绍
造血干细胞具有自我更新、高度繁殖以及向多个方向分化的能力,因此,其在治疗白血病、再生障碍性贫血等你血液系统疾病方面有着广泛的应用。目前,主要采用造血干细胞移植来治疗血液系统疾病,用于移植的造血干细胞主要有三种来源:骨髓、外周血和脐带血。骨髓和外周血是目前广泛应用的造血干细胞来源,但是存在配型困难等问题。而采用脐带血来源的造血干细胞进行移植可在一定程度上避免这些问题,但是脐带血来源的造血干细胞的数量有限,难以满足造血干细胞移植所需的数量,因此,体外扩增造血干细胞是解决治疗血液系统疾病中的造血干细胞数量不足的问题的关键途径。
技术实现思路
一方面,本专利技术提供用于造血干细胞扩增的培养体系,其包含基础培养基和促进造血干细胞扩增的组合物,所述组合物包含与造血调控有关的早期造血生长因子,所述与造血调控有关的早期造血生长因子选自:干细胞生长因子,Fms样酪氨酸激酶受体3的配体和血小板生成素。在一些实施方式中,所述干细胞生长因子的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于造血干细胞扩增的培养体系,其包含基础培养基和促进造血干细胞扩增的组合物,所述组合物包含与造血调控有关的早期造血生长因子。

【技术特征摘要】
1.用于造血干细胞扩增的培养体系,其包含基础培养基和促进造血干细胞扩增的组合物,所述组合物包含与造血调控有关的早期造血生长因子。2.如权利要求1所述的培养体系,其中,所述与造血调控有关的早期造血生长因子选自:干细胞生长因子,Fms样酪氨酸激酶受体3的配体和血小板生成素。3.如权利要求2所述的培养体系,其中,所述干细胞生长因子的浓度为10-100ng/ml,所述Fms样酪氨酸激酶受体3的配体的浓度为10-100ng/ml,和/或所述血小板生成素的浓度为10-100ng/ml。4.如权利要求3所述的培养体系,其中,所述干细胞生长因子的浓度为10-50ng/ml,所述Fms样酪氨酸激酶受体3的配体的浓度为10-50ng/ml,和/或所述血小板生成素的浓度为10-50ng/ml。5.如权利要求1至4中任一项所述的培养体系,其中,所述促进造血干细胞扩增的组合物还包含芳烃受体拮抗剂,和/或人造血干细胞自身更新的激动剂,和/或GSK-3抑制剂。6.如权利要求5所述的培养体系,其中,所述芳烃受体拮抗剂选自:StemRegenin1;所述人造血干细胞自身更新的激动剂选自:UM171;和/或所述GSK抑制剂选自:CHIR-99021。7.如权利要求6所述的培养体系,其中,StemRegenin1的浓度为0.5-1μM,UM171的浓度为20-100nM,和/或CHIR-99021的浓度为100-500nM。8.如权利要求7所述的培养体系,其中,StemRegenin1的浓度为:0.75-1μM,UM171的浓度为:50-100nM,和/或CHIR-99021的浓度为:250-500nM。9.如权利要求1至8中任一项所述的培养体系,所述促进造血干细胞扩增的组合物还包含IL-3,和/或IL-6,和/或粒细胞集落刺激因子,和/或多效生长因子,和/或组蛋白乙酰化酶抑制剂,和/或地西他宾。10.如权利要求9所述的培养体系,其中,IL-3的浓度为:2ng/ml;IL-6的浓度为:10ng/ml;所述粒细胞集落刺激因子的浓度为:1ng/ml;所述多效生长因子的浓度为:100ng/ml;所述组蛋白乙酰化酶抑制剂的浓度为:50μM;和/或所述地西他宾的浓度为:60nM。11.如权利要求1至10中任一项所述的培养体系,其中,所述基础培养基是StemSpan无血清扩增培养基,并且所述基础培养基补充有50IU/mL青霉素、50μg/mL链霉素和10μg/ml肝素。12.如权利要求1至12中任一项所述的培养体系,其中,所述培养体系包含:补充有50IU/mL青霉素、50μg/mL链霉...

【专利技术属性】
技术研发人员:张洁曹明喆沈思宇
申请(专利权)人:联亘生物科技上海有限公司
类型:发明
国别省市:上海,31

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