The present invention discloses a method of stem cell cryopreservation and resuscitation, including the following steps: cell cryopreservation liquid preparation, container disinfection, stem cell detection, stem cell treatment, stem cell screening, cryopreservation, and stem cell resuscitation; the method proposed by the invention is prevented by freezing and resuscitation on the temperature gradient of hematopoietic stem cells. The blood stem cells are damaged by the sudden drop of temperature, thus preventing the formation of ice crystals and cell deformation caused by the sudden drop of temperature. This method can improve the cryopreservation activity of hematopoietic stem cells and reduce the loss of hematopoietic stem cells.
【技术实现步骤摘要】
一种干细胞冻存与复苏方法
本专利技术涉及干细胞储存
,具体为一种干细胞冻存与复苏方法。
技术介绍
造血干细胞是血液系统中的成体干细胞,是一个异质性的群体,具有长期自我更新的能力和分化成各类成熟血细胞的潜能。它是研究历史最长且最为深入的一类成体干细胞,对研究各类干细胞,包括肿瘤干细胞,具有重要指导意义。血液系统中的成熟细胞寿命极短,因此在人的一生中,造血干细胞需要根据机体的生理需求适时的补充血液系统各个成熟细胞组分。同时在损伤、炎症等应激状态下,造血干细胞也扮演着调节和维持体内血液系统各个细胞组分的生理平衡的角色。在对造血干细胞进行远程运输和储存时,为保持细胞的活性,需要对造血干细胞进行冻存,现有的冻存方法容易对细胞造成一定损伤,不利于造血干细胞的储存,为此,提出一种干细胞冻存与复苏方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种干细胞冻存与复苏方法,以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:一种干细胞冻存与复苏方法,包括如下步骤:S1、细胞冻存液配制:以质量百分含量计,30~40%人血白蛋白,二甲基亚砜5~15%,羟乙基淀粉占 ...
【技术保护点】
一种干细胞冻存与复苏方法,其特征在于:包括如下步骤:S1、细胞冻存液配制:以质量百分含量计,30~40%人血白蛋白,二甲基亚砜5~15%,羟乙基淀粉占3~6%,余量为无血清培养基,配好的冷存液放在1~8℃的温度条件下低温冷藏;S2、容器消毒:用消毒液对存放干细胞的容器表面进行消毒,并通过紫外线进行全面照射,照射时长5~10分钟;S3、干细胞检测:对干细胞进行病毒检测,保证干细胞安全可靠;S4、干细胞处理:将干细胞分成分装在经S2消毒后的不同容器内,并将盛有干细胞的容器放置在1~10℃的无菌环境内存放30~50分钟;S5、干细胞筛选处理:将S4处理后的干细胞进行离心处理,去除 ...
【技术特征摘要】
1.一种干细胞冻存与复苏方法,其特征在于:包括如下步骤:S1、细胞冻存液配制:以质量百分含量计,30~40%人血白蛋白,二甲基亚砜5~15%,羟乙基淀粉占3~6%,余量为无血清培养基,配好的冷存液放在1~8℃的温度条件下低温冷藏;S2、容器消毒:用消毒液对存放干细胞的容器表面进行消毒,并通过紫外线进行全面照射,照射时长5~10分钟;S3、干细胞检测:对干细胞进行病毒检测,保证干细胞安全可靠;S4、干细胞处理:将干细胞分成分装在经S2消毒后的不同容器内,并将盛有干细胞的容器放置在1~10℃的无菌环境内存放30~50分钟;S5、干细胞筛选处理:将S4处理后的干细胞进行离心处理,去除上清液,然后通过显微镜观察干细胞活跃性,挑选出活跃性最强的一组;S6、冻存:将S5挑选出的干细胞在0~10℃的低温环境下,将...
【专利技术属性】
技术研发人员:徐慧敏,李子乐,胡德鸿,
申请(专利权)人:淮北智淮科技有限公司,
类型:发明
国别省市:安徽,34
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