培养和/或使造血干细胞分化为祖细胞的方法及其用途技术

本说明书涉及用于在轻度高温条件(例如，在38℃与40℃之间)下，在造血干细胞扩增的嘧啶并吲哚衍生物激动剂存在下培养造血干细胞(HSC)的体外方法。组合使用轻度高温和嘧啶并吲哚衍生物协同地起作用，以促进CD34+HSC扩增和/或分化为祖细胞(例如，巨核细胞祖细胞)。本说明书还涉及体外扩增的HSC和/或祖细胞的细胞群体，以及它们在治疗(例如，移植)中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】培养和/或使造血干细胞分化为祖细胞的方法及其用途本说明书涉及造血干细胞。更具体地，本说明书涉及在轻度高温(例如，在38℃与40℃之间)和在造血干细胞扩增的嘧啶并吲哚衍生物激动剂存在下培养造血干细胞。专利技术背景造血干细胞(HSC)来源于中胚层，并负责产生见于血液中的所有细胞组分，无论是髓系还是淋巴系。HSC分化为共同髓样祖细胞(CMP)和共同淋巴样祖细胞(CLP)。CMP产生红系、粒细胞系、单核细胞系、巨核细胞系和树突系细胞，而CLP衍生T和B淋巴细胞、浆细胞、自然杀伤细胞和淋巴样树突细胞。髓系细胞的终末分化最终导致产生和更新红细胞、粒细胞、单核细胞、髓源树突细胞和血小板。此外，HSC(原始或长期)具有自我更新能力，因此确保为个体整个生命期充足地供应祖细胞和终末分化的血细胞。这些细胞自我更新的能力导致了医学领域的重大进展，即HSC移植作为患有血液学癌症或骨髓衰竭的患者的治疗模式。历史上，骨髓是HSC的主要来源，且至今仍是骨髓更换的重要细胞来源。从那以后，来自G-CSF动员捐赠者的脐带血和外周血也用作HSC来源。与其在临床中的使用并行，HSC已经成为目的在于在实验室中体外培养、扩增、分化本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于培养造血干细胞的体外方法，所述方法包括：(a)在含造血干细胞扩增的嘧啶并吲哚衍生物激动剂的细胞培养基中繁殖所述造血干细胞；和(b)在38℃与40℃之间的孵育温度下孵育所述造血干细胞。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.06.05 US 62/171,492;2016.05.13 US 62/335,9831.一种用于培养造血干细胞的体外方法，所述方法包括：(a)在含造血干细胞扩增的嘧啶并吲哚衍生物激动剂的细胞培养基中繁殖所述造血干细胞；和(b)在38℃与40℃之间的孵育温度下孵育所述造血干细胞。2.权利要求1的方法，其中所述造血干细胞是CD34+造血干细胞。3.权利要求1或2的方法，其中所述造血干细胞来自：(a)脐带血；(b)骨髓；(c)外周血；(d)诱导多能干细胞；(e)胚胎干细胞；(f)从非造血起源的分化细胞转分化；(g)经基因修饰的造血干细胞；(h)永生化造血干细胞；(i)其他多能或多潜能细胞来源；或(j)其任何组合。4.权利要求3的方法，其中所述造血干细胞来自动员外周血细胞。5.权利要求3的方法，其中所述造血干细胞来自非动员外周血细胞。6.权利要求4或5的方法，其中所述造血干细胞来自去白细胞、减白细胞和/或其他外周血血液纯化或加工后的残余细胞。7.权利要求1至6中任一项的方法，其中在含造血干细胞扩增的嘧啶并吲哚衍生物激动剂的细胞培养基中，和/或在38℃与40℃之间的孵育温度下，孵育所述造血干细胞至少4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或21天。8.权利要求1至7中任一项的方法，其中所述孵育温度是39℃。9.权利要求1至8中任一项的方法，其中所述造血干细胞扩增的嘧啶并吲哚衍生物激动剂是：(a)嘧啶并[4,5-b]吲哚衍生物；(b)(1r,4r)-N1-(2-苄基-7-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-9H-嘧啶并[4,5-b]吲哚-4-基)环己烷-1,4-二胺；(c)4-(3-(哌啶-1-基)丙基氨基)-9H-嘧啶并[4,5-b]吲哚-7-甲酸甲酯；(d)4-(3-(哌啶-1-基)丙基氨基)-9H-嘧啶并[4,5-b]吲哚-7-甲酸甲酯盐酸盐；(e)(a)至(d)中任一个的药学上可接受的盐、溶剂化物、前药或立体异构体；或(f)(a)至(e)的任何组合。10.权利要求1至9中任一项的方法，其中所述细胞培养基包含干细胞因子(SCF)；促血小板生成素(TPO)；或SCF和TPO两者。11.权利要求1至9中任一项的方法，其中所述方法是用于扩增造血干细胞，且其中所述细胞培养基是造血干...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·拉格尼尔勒，N·杜蒙特，
申请(专利权)人：赫马魁北克公司，
类型：发明
国别省市：加拿大,CA