B型肝炎病毒（HBV）iRNA组合物及其使用方法技术

本发明专利技术涉及靶向B型肝炎病毒(HBV)基因组的RNAi剂，例如：双链RNAi剂，及使用这些RNAi剂抑制一种或多种HBV基因表达的方法及治疗患有HBV感染和/或HBV‑相关病症(例如：慢性B型肝炎感染)的受试者的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】B型肝炎病毒(HBV)iRNA组合物及其使用方法相关申请本申请案主张2014年11月10日申请的美国临时申请案62/077,799及2015年3月24日申请的美国临时专利申请案62/137,464的优先权。上述各专利申请案的完整揭示内容已以引用的方式并入本文中。本申请案主张2014年11月10日申请的美国临时申请案62/077,672的优先权，其完整揭示内容已以引用的方式并入本文中。本申请案是有关2015年11月10日申请的国际专利申请案PCT/US2015/XXXXX，名称为“D型肝炎病毒(HDV)iRNA组合物及其使用方法”，其完整揭示内容已以引用的方式并入本文中。序列表本申请案包含的序列表已呈ASCII格式电子文件交付，其完整揭示内容已以引用的方式并入本文中。该于2015年11月5日制作的ASCII复本名称为121301-02320-_SL.txt，大小为385,791字节。
技术介绍
全世界已有超过4亿人口慢性感染HBV，因此提高发展出严重肝病的风险，如：慢性肝炎、硬化、肝衰竭、及肝细胞癌(HCC)，估计每年造成600,000人死亡。慢性HBV感染的自然演化包括连续四期：(1)早期“免疫耐受”期，高度病毒复制及最低度肝发炎；(2)免疫反应期，显著肝发炎及血清氨基转移酶升高；有些患者会进展到(3)“非复制”期，血清转化成抗-HBe；无法检测或低度病毒血症(以基于PCR的分析法测定低于2000IU/ml)；肝发炎缓解；及(4)HBeAg-阴性慢性B型肝炎，因为已出现特异病毒突变，其防止HBeAg产生，但未阻挡病毒复制。此形式的慢性B型肝炎(CHB)的特征在于波动的血清HBVDNA及血清氨基转移酶(ALT及AST)含量，及渐进恶化的肝病。其重点在于应注意CHB可能呈HBeAg-阳性或HBeAg-阴性CHB。纵向研究CHB患者显示，5年累计发展出硬化的发生率为8％至20％的范围。5年累计肝代偿不全的发生率为约20％。全世界HCC发生率已升高且已成为第五大常见癌症。每年HBV-相关的HCC发生率高，当确诊硬化时，其发生率为2％-5％的范围。治疗HBV的主要目标为永久抑制HBV复制及改善肝疾病。临床上重要的短期目标为达到HBeAg-血清转化、恢复正常血清ALT与AST、缓解肝发炎及预防肝代偿不全。最终治疗目标为达到持久反应，防止发展出硬化、肝癌及延长存活。HBV感染无法完全根除，因为已感染的肝细胞的细胞核中持续存在特定形式的病毒共价闭合环状DNA(cccHBVDNA)。然而，治疗诱发清除血清HBsAg即成为终止慢性HBV感染的标记，且已与最佳长期结果相关。目前治疗HBV的标准方法包括基于干扰素或胸腺素a1-的免疫疗法，并借由抑制HBV聚合酶来压制病毒产生。HBV聚合酶抑制剂可有效减少病毒复制，但几乎无法有效快速减少HBsAg，或在有限数量患者中(如：采用泰诺福韦(tenofovirdisoproxilfumarate)的病例)可以在长期治疗下慢慢减少HBsAg。基于干扰素的免疫疗法可达到同时减少病毒产生及提早排除血中HBsAg，但接受治疗的患者仅有少数百分比能达成此结果。一般认为HBsAg在血中的角色为螯合抗-HBsAg抗体，并让有感染力的病毒粒子逃过免疫侦测，此点可能成为HBV感染成为慢性病症的原因之一。除了HBsAg外，HBeAg与HBcAg均具有免疫抑制性质，在接受目前任何可采用的HBV疗法给予后，这些持续存在患者血中的病毒蛋白质似乎已显著影响患者，阻碍其达成免疫控制其HBV感染。虽然三种主要HBV蛋白质(HBsAg、HBeAg与HBcAg)均具有免疫抑制性质，但感染HBV的受试者的循环中，HBsAg成为主要优势的HBV蛋白质。此外，虽然排除(经由血清转化)HBeAg或减少血清病毒血症与发展出治疗后持续控制HBV感染没有相关性，但在HBV感染中排除血中血清HBsAg(及血清转化)已成为公认对治疗的抗病毒反应的预后指标，可用于控制治疗后的HBV感染(尽管此点仅会发生在接受免疫疗法的少数患者中)。因此，虽然减少所有三种主要HBV蛋白质(HBsAg、HBeAg与HBcAg)可能造成最佳的排除抑制效果，但单独排除HBsAg时，其本身可能即足以使罹患HBV感染的受试者排除大量病毒对免疫功能的抑制。因此，在目前仍然没有任何疗法可以为大部分患者恢复免疫控制HBV下，需要一种对抗HBV感染的有效治疗法，其应可为大多数患者抑制病毒复制并恢复免疫控制。因此，本领域中需要一种针对感染HBV和/或患有HBV相关疾病的受试者的替代疗法与组合疗法。
技术实现思路
本专利技术提供一种iRNA组合物，其引发RNA-诱导沉默复合体(RISC)介导裂解B型肝炎病毒(HBV)基因的RNA转录本。HBV基因可在细胞内，例如：在如：人类受试者的细胞内。本专利技术还提供一种治疗罹患可能因抑制或降低HBV基因表达而受益的病症(例如：HBV感染和/或HBV相关疾病，如：慢性B型肝炎感染(CHB)、硬化、肝衰竭、及肝细胞癌(HCC))的受试者的方法与疗法，其是使用可引发RNA-诱导沉默复合体(RISC)介导裂解HBV基因的RNA转录本的iRNA组合物，来抑制HBV基因表达。本专利技术还提供一种治疗罹患可能因抑制或降低HBV基因表达而受益的病症(例如：HBV感染和/或HBV相关疾病，如：慢性B型肝炎感染(CHB)、硬化、肝衰竭、及肝细胞癌(HCC))的受试者的方法与疗法，其是使用可引发RNA-诱导沉默复合体(RISC)介导裂解HBV基因的RNA转录本的iRNA组合物，来抑制HBV基因表达。本专利技术的RNAi剂已设计为靶向保留在所有8种HBV血清型中的HBV基因组的区域。此外，本专利技术的RNAi剂已设计为借由抑制超过一种HBV基因的表达来抑制HBV生命周期的所有步骤，例如：病毒的复制、组装、与分泌，及次病毒抗原的分泌。具体地，由于HBV基因组的转录产生多顺反子的重叠RNA，因此靶向单一HBV基因的本专利技术RNAi剂可以显著抑制大多数或所有HBV转录本的表达。例如：由于HBV基因组转录至单一mRNA中，因此靶向S基因的本专利技术RNAi剂将会不仅抑制S基因表达，而且亦抑制“下游”逆转录酶基因的表达。此外，本专利技术的RNAi剂已设计在于借由靶向HBV结构基因而抑制HBV病毒复制，HBVX基因即可让受试者的免疫系统侦测到HBsAg的存在，并响应以产生抗-HBV抗体来清除HBV感染，在不希望受到理论限制下，据信上述性质与这些RNAi剂中特定标靶位置和/或特定修饰的组合或次组合均赋与改良的效力、稳定性、安全性、药效及持久性。因此，本专利技术一方面中提供一种双链RNAi剂，用于抑制B型肝炎病毒(HBV)于细胞中的表达。双链RNAi剂包括形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含至少15个连续核苷酸，其与SEQIDNO:1核苷酸序列的差异不超过3个核苷酸，且该反义链包含至少15个连续核苷酸，其与SEQIDNO:2核苷酸序列的差异不超过3个核苷酸，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物。在一个实施例中，反义链核苷酸序列中3个核苷酸差异中的一个本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于抑制细胞中B型肝炎病毒(HBV)表达的双链RNAi剂，该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，该正义链包含至少15个连续核苷酸，其与SEQ ID NO:1核苷酸序列的差异不超过3个核苷酸，且该反义链包含至少15个连续核苷酸，其与SEQ ID NO:2核苷酸序列的差异不超过3个核苷酸，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’‑末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.11.10 US 62/077,672;2014.11.10 US 62/077,799;1.一种用于抑制细胞中B型肝炎病毒(HBV)表达的双链RNAi剂，该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，该正义链包含至少15个连续核苷酸，其与SEQIDNO:1核苷酸序列的差异不超过3个核苷酸，且该反义链包含至少15个连续核苷酸，其与SEQIDNO:2核苷酸序列的差异不超过3个核苷酸，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物。2.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中反义链核苷酸序列中3个核苷酸差异中一个或多个为在反义链中错配的核苷酸。3.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中反义链核苷酸序列中3个核苷酸差异中一个或多个为在正义链中错配的核苷酸。4.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中该正义链的所有核苷酸及该反义链的所有核苷酸为经修饰的核苷酸。5.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中该正义链及该反义链包含互补区，该互补区包含至少15个连续核苷酸，该至少15个连续核苷酸与表3、4、6、7、12、13、22、23、25、及26中任一个表所列的任一序列的差异不超过3个核苷酸。6.如权利要求1至5中任一项所述的双链RNAi剂，其中至少一个该经修饰的核苷酸是选自下组，该组由以下各项组成：脱氧-核苷酸、3’-末端脱氧-胸腺嘧啶(dT)核苷酸、2'-O-甲基修饰的核苷酸、2'-氟修饰的核苷酸、2'-脱氧-修饰的核苷酸、锁核苷酸、非锁核苷酸、构型限制性核苷酸、限制性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基-修饰的核苷酸、2’-O-烯丙基-修饰的核苷酸、2’-C-烷基-修饰的核苷酸、2’-羟基-修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-O-烷基-修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、包含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1,5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基膦酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。7.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中至少一个链包含至少1个核苷酸的3’突出端。8.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中至少一个链包含至少2个核苷酸的3’突出端。9.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中双链区为15-30对核苷酸的长度。10.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中双链区为17-23对核苷酸的长度。11.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中双链区为17-25对核苷酸的长度。12.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中双链区为23-27对核苷酸的长度。13.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中双链区为19-21对核苷酸的长度。14.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中双链区为21-23对核苷酸的长度。15.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中各链具有15-30个核苷酸。16.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中各链具有19-30个核苷酸。17.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中该配体为18.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中该RNAi剂是接合如下所示的配体其中X为O或S。19.如权利要求1所述的双链RNAi剂，其中该RNAi剂选自表3、4、6、7、12、13、22、23、25、与26中任一个表所列的RNAi剂所组成的组。20.一种用于抑制细胞中B型肝炎病毒(HBV)表达的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-GUGUGCACUUCGCUUCACA-3’(SEQIDNO:39)，且该反义链包含5’-UGUGAAGCGAAGUGCACACUU-3’(SEQIDNO:40)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物。21.一种双链RNAi剂，用于抑制细胞中B型肝炎病毒(HBV)表达，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-GGUGGACUUCUCUCAAUUUUA-3’(SEQIDNO:11)，且该反义链包含5’-UAAAAUUGAGAGAAGUCCACCAC-3’(SEQIDNO:12)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物。22.一种用于抑制细胞中B型肝炎病毒(HBV)表达的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-UCGUGGUGGACUUCUCUCA-3’(SEQIDNO:5)，且该反义链包含5’-UGAGAGAAGUCCACCACGAUU-3’(SEQIDNO:6)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物。23.一种用于抑制细胞中B型肝炎病毒(HBV)表达的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-GUGCACUUCGCUUCACCUCUA-3’(SEQIDNO:7)，且该反义链包含5’-UAGAGGUGAAGCGAAGUGCACUU-3’(SEQIDNO:8)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物。24.一种用于抑制细胞中B型肝炎病毒(HBV)表达的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-CGUGGUGGACUUCUCUCAAUU-3’(SEQIDNO:9)，且该反义链包含5’-AAUUGAGAGAAGUCCACCAGCAG-3’(SEQIDNO:10)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物。25.一种用于抑制细胞中B型肝炎病毒(HBV)表达的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-CGUGGUGGUCUUCUCUAAAUU-3’(SEQIDNO:37)，且该反义链包含5’-AAUUGAGAGAAGUCCACCAGCUU-3’(SEQIDNO:38)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物。26.如权利要求20至25中任一项所述的双链RNAi剂，其中该正义链的所有核苷酸及该反义链的所有核苷酸包含一种修饰。27.如权利要求20至24中任一项所述的双链RNAi剂，其中至少一个该经修饰的核苷酸是选自下组，该组由以下各项组成：脱氧-核苷酸、3’-末端脱氧-胸腺嘧啶(dT)核苷酸、2'-O-甲基修饰的核苷酸、2'-氟修饰的核苷酸、2'-脱氧-修饰的核苷酸、锁核苷酸、非锁核苷酸、构型限制性核苷酸、限制性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基-修饰的核苷酸、2’-O-烯丙基-修饰的核苷酸、2’-C-烷基-修饰的核苷酸、2’-羟基-修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-O-烷基-修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、包含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1,5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基膦酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。28.如权利要求27所述的双链RNAi剂，其中5’-磷酸酯模拟物为5’-乙烯基磷酸酯(5’-VP)。29.如权利要求22所述的双链RNAi剂，其中正义链包含5’-uscsguGfgUfGfGfacuucucuca-3’(SEQIDNO:13)及反义链包含5’-usGfsagaGfaAfGfuccaCfcAfcgasusu-3’(SEQIDNO:14)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基。30.如权利要求22所述的双链RNAi剂，其中正义链包含5’-uscsguGfgUfGfGfacuucucuca-3’(SEQIDNO:15)及反义链包含5’-PusGfsagaGfaAfGfuccaCfcAfcgasusu-3’(SEQIDNO:16)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基；且P为5’-磷酸酯或5’磷酸酯模拟物。31.如权利要求23所述的双链RNAi剂，其中正义链包含5’-gsusgcacUfuCfGfCfuucaccucua-3’(SEQIDNO:17)及反义链包含5’-usAfsgagGfugaagcgAfaGfugcacsusu-3’(SEQIDNO:18)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基。32.如权利要求23所述的双链RNAi剂，其中正义链包含5’-gsusgcacUfuCfGfCfuucaccucua-3’(SEQIDNO:19)及反义链包含5’-PusAfsgagGfugaagcgAfaGfugcacsusu-3’(SEQIDNO:20)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基；且P为5’-磷酸酯或5’磷酸酯模拟物。33.如权利要求24所述的双链RNAi剂，其中正义链包含5’-csgsugguGfgAfCfUfucucUfCfaauu-3’(SEQIDNO:21)及反义链包含5’-asAfsuugAfgAfgAfaguCfcAfccagcsasg-3’(SEQIDNO:22)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基。34.如权利要求24所述的双链RNAi剂，其中正义链包含5’-csgsugguGfgAfCfUfucucUfCfaauu-3’(SEQIDNO:23)及反义链包含5’-PasAfsuugAfgAfgAfaguCfcAfccagcsasg-3’(SEQIDNO:24)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基；且P为5’-磷酸酯或5’磷酸酯模拟物。35.如权利要求25所述的双链RNAi剂，其中正义链包含5’-csgsuggudGgucdTucucuaaauu-3’(SEQIDNO:35)及反义链包含5’-asdAsuugagagdAagudCcaccagcsusu-3’(SEQIDNO:36)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；dA、dC、dG、与dT为脱氧核糖A、C、G、与T；且s为硫代磷酸酯键联基。36.如权利要求21所述的双链RNAi剂，其中正义链包含5’-gsgsuggaCfuUfCfUfcucaAfUfuuua-3’(SEQIDNO:25)及反义链包含5’-usAfsaaaUfuGfAfgagaAfgUfccaccsasc-3’(SEQIDNO:26)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基。37.如权利要求21所述的双链RNAi剂，其中正义链包含5’-gsgsuggaCfuUfCfUfcucaAfUfuuua-3’(SEQIDNO:27)及反义链包含5’-PusAfsaaaUfuGfAfgagaAfgUfccaccsasc-3’(SEQIDNO:28)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基；且P为5’-磷酸酯或5’磷酸酯模拟物。38.如权利要求20所述的双链RNAi剂，其中正义链包含5’-gsusguGfcAfCfUfucgcuucaca-3’(SEQIDNO:41)及反义链包含5’-usGfsugaAfgCfGfaaguGfcAfcacsusu-3’(SEQIDNO:42)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基。39.如权利要求20至38中任一项所述的双链RNAi剂，其中该配体为40.如权利要求39所述的双链RNAi剂，其中该RNAi剂是接合如下所示的配体其中X为O或S。41.如权利要求30、32、34、与37中任一项所述的双链RNAi剂，其中P为5’-磷酸酯模拟物。42.如权利要求30、32、34、与37中任一项所述的双链RNAi剂，其中5’-磷酸酯模拟物为5’-乙烯基磷酸酯(5’-VP)。43.一种包含两种或更多种双链RNAi剂的组合物，用于抑制细胞中B型肝炎病毒(HBV)表达，其中各双链RNAi剂分别独立包含形成双链区的正义链与反义链，其中各该正义链分别独立包含至少15个连续核苷酸，该至少15个连续核苷酸与SEQIDNO:1核苷酸序列的差异不超过3个核苷酸，及各该反义链分别独立包含至少15个连续核苷酸，该至少15个连续核苷酸与SEQIDNO:2核苷酸序列的差异不超过3个核苷酸，其中各该正义链实质上所有核苷酸及各该反义链实质上所有核苷酸分别独立为经修饰的核苷酸，其中各该正义链分别独立接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物。44.如权利要求43所述的组合物，其中反义链核苷酸序列中3个核苷酸差异中一个或多个为在反义链中错配的核苷酸。45.如权利要求43所述的组合物，其中反义链核苷酸序列中3个核苷酸差异中一个或多个为在正义链中错配的核苷酸。46.如权利要求43所述的组合物，其中该正义链的所有核苷酸及该反义链的所有核苷酸为经修饰的核苷酸。47.如权利要求43所述的组合物，其中该正义链及该反义链包含互补区，该互补区包含至少15个连续核苷酸，该至少15个连续核苷酸与表3、4、6、7、12、13、22、23、25、及26中任一个表所列的任一序列的差异不超过3个核苷酸。48.如权利要求43至47中任一项所述的组合物，其中至少一个该经修饰的核苷酸是选自下组，该组由以下各项组成：脱氧-核苷酸、3’-末端脱氧-胸腺嘧啶(dT)核苷酸、2'-O-甲基修饰的核苷酸、2'-氟修饰的核苷酸、2'-脱氧-修饰的核苷酸、锁核苷酸、非锁核苷酸、构型限制性核苷酸、限制性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基-修饰的核苷酸、2’-O-烯丙基-修饰的核苷酸、2’-C-烷基-修饰的核苷酸、2’-羟基-修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-O-烷基-修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、包含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1,5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基膦酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。49.一种用于抑制细胞中B型肝炎病毒(HBV)表达的组合物，该组合物包含：(a)第一双链RNAi剂，其包含形成双链区的第一正义链及第一反义链，其中该第一正义链实质上所有核苷酸及该第一反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该第一正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物；及(b)第二双链RNAi剂，其包含形成双链区的第二正义链及第二反义链，其中该第二正义链实质上所有核苷酸及该第二反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该第二正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物；其中该第一与第二正义链分别独立包含选自下组的序列，该组由以下各项组成5’-UCGUGGUGGACUUCUCUCA-3’(SEQIDNO:5)，5’-GUGCACUUCGCUUCACCUCUA-3’(SEQIDNO:7)，5’-CGUGGUGGACUUCUCUCAAUU-3’(SEQIDNO:9)，5’-CGUGGUGGUCUUCUCUAAAUU-3’(SEQIDNO:37)，5’-GGUGGACUUCUCUCAAUUUUA-3’(SEQIDNO:11)，及5’-GUGUGCACUUCGCUUCACA-3’(SEQIDNO:39)，及其中该第一与第二反义链分别独立包含选自下组的序列，该组由以下各项组成5’-UAGAGGUGAAGCGAAGUGCACUU-3’(SEQIDNO:6)，5’-UAGAGGUGAAGCGAAGUGCACUU-3’(SEQIDNO:8)，5’-AAUUGAGAGAAGUCCACCAGCAG-3’(SEQIDNO:10)，5’-AAUUGAGAGAAGUCCACCAGCUU-3’(SEQIDNO:38)，5’-UAAAAUUGAGAGAAGUCCACCAC-3’(SEQIDNO:12)，及5’-UGUGAAGCGAAGUGCACACUU-3’(SEQIDNO:40)。50.如权利要求49所述的组合物，其中该第一与第二正义链的所有核苷酸和/或该第一与第二反义链的所有核苷酸包含一种修饰。51.如权利要求49所述的组合物，其中至少一个该经修饰的核苷酸是选自下组，该组由以下各项组成：脱氧-核苷酸、3’-末端脱氧-胸腺嘧啶(dT)核苷酸、2'-O-甲基修饰的核苷酸、2'-氟修饰的核苷酸、2'-脱氧-修饰的核苷酸、锁核苷酸、非锁核苷酸、构型限制性核苷酸、限制性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基-修饰的核苷酸、2’-O-烯丙基-修饰的核苷酸、2’-C-烷基-修饰的核苷酸、2’-羟基-修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-O-烷基-修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、包含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1,5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基膦酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。52.如权利要求49所述的组合物，其中该第一与第二RNAi剂选自下组，该组由以下各项组成：5’-uscsguGfgUfGfGfacuucucuca-3’(SEQIDNO:13)5’-usGfsagaGfaAfGfuccaCfcAfcgasusu-3’(SEQIDNO:14)；5’-uscsguGfgUfGfGfacuucucuca-3’(SEQIDNO:15)5’-PusGfsagaGfaAfGfuccaCfcAfcgasusu-3’(SEQIDNO:16)；5’-gsusgcacUfuCfGfCfuucaccucua-3’(SEQIDNO:17)5’-usAfsgagGfugaagcgAfaGfugcacsusu-3’(SEQIDNO:18)；5’-gsusgcacUfuCfGfCfuucaccucua-3’(SEQIDNO:19)5’-PusAfsgagGfugaagcgAfaGfugcacsusu-3’(SEQIDNO:20)；5’-csgsugguGfgAfCfUfucucUfCfaauu-3’(SEQIDNO:21)5’-asAfsuugAfgAfgAfaguCfcAfccagcsasg-3’(SEQIDNO:22)；5’-csgsugguGfgAfCfUfucucUfCfaauu-3’(SEQIDNO:23)5’-PasAfsuugAfgAfgAfaguCfcAfccagcsasg-3’(SEQIDNO:24)；5’-csgsuggudGgucdTucucuaaauu-3’(SEQIDNO:35)5’-asdAsuugagagdAagudCcaccagcsusu-3’(SEQIDNO:36)；5’-gsgsuggaCfuUfCfUfcucaAfUfuuua-3’(SEQIDNO:25)5’-usAfsaaaUfuGfAfgagaAfgUfccaccsasc-3’(SEQIDNO:26)；5’-gsgsuggaCfuUfCfUfcucaAfUfuuua-3’(SEQIDNO:27)5’-PusAfsaaaUfuGfAfgagaAfgUfccaccsasc-3’(SEQIDNO:28)；及5’-gsusguGfcAfCfUfucgcuucaca-3’(SEQIDNO:41)5’-usGfsugaAfgCfGfaaguGfcAfcacsusu-3’(SEQIDNO:42)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；dA、dC、dG、与dT是脱氧核糖A、C、G、与T；s为硫代磷酸酯键联基；且P为5’-磷酸酯或5’磷酸酯模拟物。53.如权利要求49所述的组合物，其中该第一与第二RNAi剂为5’-uscsguGfgUfGfGfacuucucuca-3’(SEQIDNO:15)5’-PusGfsagaGfaAfGfuccaCfcAfcgasusu-3’(SEQIDNO:16)；及5’-csgsugguGfgAfCfUfucucUfCfaauu-3’(SEQIDNO:21)5’-asAfsuugAfgAfgAfaguCfcAfccagcsasg-3’(SEQIDNO:22)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；s为硫代磷酸酯键联基；且P为5’-磷酸酯或5’磷酸酯模拟物。54.如权利要求49所述的组合物，其中该第一与第二RNAi剂为5’-gsgsuggaCfuUfCfUfcucaAfUfuuua-3’(SEQIDNO:25)5’-usAfsaaaUfuGfAfgagaAfgUfccaccsasc-3’(SEQIDNO:26)；及5’-gsusguGfcAfCfUfucgcuucaca-3’(SEQIDNO:41)5’-usGfsugaAfgCfGfaaguGfcAfcacsusu-3’(SEQIDNO:42)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；s为硫代磷酸酯键联基；且P为5’-磷酸酯或5’磷酸酯模拟物。55.一种双链RNAi剂，其包含表3、4、6、7、12、13、22、23、25、与26中任一个表所列的RNAi剂。56.一种载体，其包含如权利要求1及20至25中任一项所述的双链RNAi剂。57.一种细胞，其包含如权利要求1及20至25中任一项所述的双链RNAi剂。58.一种药物组合物，其包含如权利要求1及20至25中任一项所述的双链RNAi剂、或如权利要求43与49中任一项所述的组合物、或如权利要求56所述的载体。59.如权利要求58所述的药物组合物，其中该双链RNAi剂是呈未缓冲的溶液给予。60.如权利要求59所述的药物组合物，其中该未缓冲的溶液为生理食盐水或水。61.如权利要求58所述的药物组合物，其中该双链RNAi剂是使用缓冲液溶液给予。62.如权利要求61所述的药物组合物，其中该缓冲溶液包含乙酸盐、柠檬酸盐、醇溶谷蛋白、碳酸盐、或磷酸盐或其任何组合。63.如权利要求62所述的药物组合物，其中该缓冲溶液为磷酸盐缓冲的生理食盐水(PBS)。64.一种抑制细胞中B型肝炎病毒(HBV)基因表达的方法，该方法包括：(a)使细胞与如权利要求1及20至25中任一项所述的双链RNAi剂、或如权利要求43与49中任一项所述的组合物、或如权利要求56所述的载体、或如权利要求58至63中任一项所述的药物组合物接触；及(b)维持步骤(a)所产生的细胞一段足以达到HBV基因的mRNA转录本降解的时间，借以抑制细胞中HBV基因的表达。65.如权利要求64所述的方法，其中HBV基因选自下组，该组由以下各项组成：C、X、P、S、及其组合。66.一种抑制细胞中B型肝炎病毒(HBV)复制的方法，该方法包括：(a)使细胞与如权利要求1及20至25中任一项所述的双链RNAi剂、或如权利要求43与49中任一项所述的组合物、或如权利要求56所述的载体、或如权利要求58至63中任一项所述的药物组合物接触；及(b)维持步骤(a)所产生的细胞一段足以达到HBV基因的mRNA转录本降解的时间，借以抑制细胞中HBV复制。67.如权利要求64或66所述的方法，其中该细胞位于受试者内。68.如权利要求67所述的方法，其中该受试者为人类。69.如权利要求68所述的方法，其中该受试者罹患HBV相关疾病。70.如权利要求64所述的方法，其中该HBV基因表达是受到抑制至少约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％、约95％、约98％或约100％。71.如权利要求66所述的方法，其中细胞中的HBV复制是受到抑制至少约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％、约95％、约98％或约100％。72.一种使感染HBV的受试者降低B型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状HBV(ccc)DNA含量的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的如权利要求1及20至25中任一项所述的双链RNAi剂、或如权利要求43与49中任一项所述的组合物、或如权利要求56所述的载体、或如权利要求58至63中任一项所述的药物组合物，借以降低该受试者中共价闭合环状HBVDNA含量。73.一种使感染HBV的受试者降低B型肝炎病毒(HBV)抗原含量的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的如权利要求1及20至25中任一项所述的双链RNAi剂、或如权利要求43与49中任一项所述的组合物、或如权利要求56所述的载体、或如权利要求58至63中任一项所述的药物组合物，借以减少该受试者中HBV抗原含量。74.如权利要求73项所述的方法，其中该HBV抗原为HBsAg。75.如权利要求73项所述的方法，其中该HBV抗原为HBeAg。76.一种使感染HBV的受试者降低B型肝炎病毒(HBV)病毒量的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的如权利要求1及20至25中任一项所述的双链RNAi剂、或如权利要求43与49中任一项所述的组合物、或如权利要求56所述的载体、或如权利要求58至63中任一项所述的药物组合物，借以降低该受试者中HBV病毒量。77.一种使感染HBV的受试者降低丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的如权利要求1及20至25中任一项所述的双链RNAi剂、或如权利要求43与49中任一项所述的组合物、或如权利要求56所述的载体、或如权利要求58至63中任一项所述的药物组合物，借以降低该受试者中ALT含量。78.一种使感染HBV的受试者降低天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的如权利要求1及20至25中任一项所述的双链RNAi剂、或如权利要求43与49中任一项所述的组合物、或如权利要求56所述的载体、或如权利要求58至63中任一项所述的药物组合物，借以降低该受试者的AST含量。79.一种使感染HBV的受试者提高抗-B型肝炎病毒(HBV)抗体含量的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的如权利要求1及20至25中任一项所述的双链RNAi剂、或如权利要求43与49中任一项所述的组合物、或如权利要求56所述的载体、或如权利要求58至63中任一项所述的药物组合物，借以提高该受试者中抗-HBV抗体含量。80.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)感染的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的如权利要求1及20至25中任一项所述的双链RNAi剂、或如权利要求43与49中任一项所述的组合物、或如权利要求56所述的载体、或如权利要求58至63中任一项所述的药物组合物，借以治疗该受试者。81.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)相关病症的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的如权利要求1及20至25中任一项所述的双链RNAi剂、或如权利要求43与49中任一项所述的组合物、或如权利要求56所述的载体、或如权利要求58至63中任一项所述的药物组合物，借以治疗该受试者。82.如权利要求71所述的方法，其中该HBV-相关病症是选自下组，该组由以下各项组成：D型肝炎病毒感染、δ型(delta)肝炎、急性B型肝炎；急性暴发性B型肝炎；慢性B型肝炎；肝纤维化；末期肝病；肝细胞癌。83.如权利要求71所述的方法，其中该HBV-相关病症为慢性肝炎，且该受试者为HBeAg阳性。84.如权利要求71所述的方法，其中该HBV-相关病症为慢性肝炎，且该受试者为HBeAg阴性。85.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)感染的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-UCGUGGUGGACUUCUCUCA-3’(SEQIDNO:5)，且该反义链包含5’-UGAGAGAAGUCCACCACGAUU-3’(SEQIDNO:6)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物，借以治疗该受试者。86.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)相关病症的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-UCGUGGUGGACUUCUCUCA-3’(SEQIDNO:5)，且该反义链包含5’-UGAGAGAAGUCCACCACGAUU-3’(SEQIDNO:6)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物，借以治疗该受试者。87.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)感染的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-GUGCACUUCGCUUCACCUCUA-3’(SEQIDNO:7)，且该反义链包含5’-UAGAGGUGAAGCGAAGUGCACUU-3’(SEQIDNO:8)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物，借以治疗该受试者。88.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)相关病症的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-GUGCACUUCGCUUCACCUCUA-3’(SEQIDNO:7)，且该反义链包含5’-UAGAGGUGAAGCGAAGUGCACUU-3’(SEQIDNO:8)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物，借以治疗该受试者。89.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)感染的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-CGUGGUGGACUUCUCUCAAUU-3’(SEQIDNO:9)，且该反义链包含5’-AAUUGAGAGAAGUCCACCAGCAG-3’(SEQIDNO:10)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物，借以治疗该受试者。90.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)相关病症的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-CGUGGUGGACUUCUCUCAAUU-3’(SEQIDNO:9)，且该反义链包含5’-AAUUGAGAGAAGUCCACCAGCAG-3’(SEQIDNO:10)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物，借以治疗该受试者。91.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)感染的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-CGUGGUGGUCUUCUCUAAAUU-3’(SEQIDNO:37)，且该反义链包含5’-AAUUGAGAGAAGUCCACCAGCUU-3’(SEQIDNO:38)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物，借以治疗该受试者。92.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)相关病症的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-CGUGGUGGUCUUCUCUAAAUU-3’(SEQIDNO:37)，且该反义链包含5’-AAUUGAGAGAAGUCCACCAGCUU-3’(SEQIDNO:38)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物，借以治疗该受试者。93.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)感染的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-GGUGGACUUCUCUCAAUUUUA-3’(SEQIDNO:11)，且该反义链包含5’-UAAAAUUGAGAGAAGUCCACCAC-3’(SEQIDNO:12)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物，借以治疗该受试者。94.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)相关病症的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-GGUGGACUUCUCUCAAUUUUA-3’(SEQIDNO:11)，且该反义链包含5’-UAAAAUUGAGAGAAGUCCACCAC-3’(SEQIDNO:12)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物，借以治疗该受试者。95.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)感染的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-GUGUGCACUUCGCUUCACA-3’(SEQIDNO:39)，且该反义链包含5’-UGUGAAGCGAAGUGCACACUU-3’(SEQIDNO:40)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物，借以治疗该受试者。96.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)相关病症的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的双链RNAi剂，其中该双链RNAi剂包含形成双链区的正义链与反义链，其中该正义链包含5’-GUGUGCACUUCGCUUCACA-3’(SEQIDNO:39)，且该反义链包含5’-UGUGAAGCGAAGUGCACACUU-3’(SEQIDNO:40)，其中该正义链实质上所有核苷酸及该反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物，借以治疗该受试者。97.如权利要求85至96中任一项所述的方法，其中该正义链的所有核苷酸及该反义链的所有核苷酸包含一种修饰。98.如权利要求85至96中任一项所述的方法，其中至少一个该经修饰的核苷酸是选自下组，该组由以下各项组成：脱氧-核苷酸、3’-末端脱氧-胸腺嘧啶(dT)核苷酸、2'-O-甲基修饰的核苷酸、2'-氟修饰的核苷酸、2'-脱氧-修饰的核苷酸、锁核苷酸、非锁核苷酸、构型限制性核苷酸、限制性乙基核苷酸、无碱基核苷酸、2’-氨基-修饰的核苷酸、2’-O-烯丙基-修饰的核苷酸、2’-C-烷基-修饰的核苷酸、2’-羟基-修饰的核苷酸、2’-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2’-O-烷基-修饰的核苷酸、吗啉基核苷酸、氨基磷酸酯、包含非天然碱基的核苷酸、四氢吡喃修饰的核苷酸、1,5-脱水己糖醇修饰的核苷酸、环己烯基修饰的核苷酸、包含硫代磷酸酯基的核苷酸、包含甲基膦酸酯基的核苷酸、包含5’-磷酸酯的核苷酸、及包含5’-磷酸酯模拟物的核苷酸。99.如权利要求98所述的方法，其中5’-磷酸酯模拟物为5’-乙烯基磷酸酯(5’-VP)。100.如权利要求85或86所述的方法，其中正义链包含5’-uscsguGfgUfGfGfacuucucuca-3’(SEQIDNO:13)及反义链包含5’-usGfsagaGfaAfGfuccaCfcAfcgasusu-3’(SEQIDNO:14)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基。101.如权利要求85或86所述的方法，其中正义链包含5’-uscsguGfgUfGfGfacuucucuca-3’(SEQIDNO:15)及反义链包含5’-PusGfsagaGfaAfGfuccaCfcAfcgasusu-3’(SEQIDNO:16)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基；且P为5’-磷酸酯或5’磷酸酯模拟物。102.如权利要求87或88所述的方法，其中正义链包含5’-gsusgcacUfuCfGfCfuucaccucua-3’(SEQIDNO:17)及反义链包含5’-usAfsgagGfugaagcgAfaGfugcacsusu-3’(SEQIDNO:18)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基。103.如权利要求87或88所述的方法，其中正义链包含5’-gsusgcacUfuCfGfCfuucaccucua-3’(SEQIDNO:19)及反义链包含5’-PusAfsgagGfugaagcgAfaGfugcacsusu-3’(SEQIDNO:20)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基；且P为5’-磷酸酯或5’磷酸酯模拟物。104.如权利要求89或90所述的方法，其中正义链包含5’-csgsugguGfgAfCfUfucucUfCfaauu-3’(SEQIDNO:21)及反义链包含5’-asAfsuugAfgAfgAfaguCfcAfccagcsasg-3’(SEQIDNO:22)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基。105.如权利要求89或90所述的方法，其中正义链包含5’-csgsugguGfgAfCfUfucucUfCfaauu-3’(SEQIDNO:23)及反义链包含5’-PasAfsuugAfgAfgAfaguCfcAfccagcsasg-3’(SEQIDNO:24)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基；且P为5’-磷酸酯或5’磷酸酯模拟物。106.如权利要求91或92所述的方法，其中正义链包含5’-csgsuggudGgucdTucucuaaauu-3’(SEQIDNO:35)及反义链包含5’-asdAsuugagagdAagudCcaccagcsusu-3’(SEQIDNO:36)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；dA、dC、dG、与dT为脱氧核糖A、C、G、与T；及s为硫代磷酸酯键联基。107.如权利要求93或94的方法，其中正义链包含5’-gsgsuggaCfuUfCfUfcucaAfUfuuua-3’(SEQIDNO:25)及反义链包含5’-usAfsaaaUfuGfAfgagaAfgUfccaccsasc-3’(SEQIDNO:26)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基。108.如权利要求93或94所述的方法，其中正义链包含5’-gsgsuggaCfuUfCfUfcucaAfUfuuua-3’(SEQIDNO:27)及反义链包含5’-PusAfsaaaUfuGfAfgagaAfgUfccaccsasc-3’(SEQIDNO:28)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基；且P为5’-磷酸酯或5’磷酸酯模拟物。109.如权利要求95或96所述的方法，其中正义链包含5’-gsusguGfcAfCfUfucgcuucaca-3’(SEQIDNO:41)及反义链包含5’-usGfsugaAfgCfGfaaguGfcAfcacsusu-3’(SEQIDNO:42)，其中A、C、G、及U为核糖A、C、G、或U；a、g、c、与u为2'-O-甲基(2'-OMe)A、U、C、或G；Af、Cf、Gf、或Uf为2'-氟A、G、C、或U；且s为硫代磷酸酯键联基。110.如权利要求85至96中任一项所述的方法，其中该配体为111.如权利要求110项所述的方法，其中该RNAi剂是接合如下所示的配体其中X为O或S。112.如权利要求86、88、90、92、94、及96中任一项所述的方法，其中该HBV-相关病症是选自下组，该组由以下各项组成：D型肝炎病毒感染、δ型(delta)肝炎、急性B型肝炎；急性暴发性B型肝炎；慢性B型肝炎；肝纤维化；末期肝病；肝细胞癌。113.如权利要求86、88、90、92、94、及96中任一项所述的方法，其中该HBV-相关病症为慢性肝炎，且该受试者为HBeAg阳性。114.如权利要求86、88、90、92、94、及96中任一项所述的方法，其中该HBV-相关病症为慢性肝炎，且该受试者为HBeAg阴性。115.一种治疗患有B型肝炎病毒(HBV)感染的受试者的方法，其包括对该受试者给予治疗有效量的用于抑制细胞中B型肝炎病毒(HBV)表达的组合物，该组合物包含(a)第一双链RNAi剂，其包含形成双链区的第一正义链及第一反义链，其中该第一正义链实质上所有核苷酸及该第一反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该第一正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物；及(b)第二双链RNAi剂，其包含形成双链区的第二正义链及第二反义链，其中该第二正义链实质上所有核苷酸及该第二反义链实质上所有核苷酸为经修饰的核苷酸，其中该第二正义链是接合附接在3’-末端的配体，且其中该配体为一种或多种利用二价或三价的分支键联体附接的GalNAc衍生物；其中该第一与第二正义链分别独立包含选自下组的序列，该组由以下各项组成5’-UCGUGGUGGACUUCUCUCA-3’(SEQIDNO:5)，5’-GUGCACUUCGCUUCACCUCUA-3’(SEQIDNO:7)，5’-CGUGGUGGACUUCUCUCAAUU-3’(SEQIDNO:9)，5’-CGUGGUGGUCUUCUCUAAAUU-3’(SEQIDNO:37)，5’-GGUGGACUUCUCUCAAUUUUA-3’(SEQIDNO:11)，及5’-GUGUGCACUUCGCUUCACA-3’(SEQIDNO:39)，及其中该第一与第二反义链分别独立包含选自下组的序列，该组由以下各项组成5’-ugagagaaguccaccacgauu-3’(SEQIDNO:6)；5’-UAGAGGUGAAGCGAAGUGCACUU-3’(SEQIDNO:8)；5’-AAUUGAGAGAAGUCCACCAGCAG-3’(SEQIDNO:10)；5’-AAUUGA...

【专利技术属性】
技术研发人员：G·辛克尔，L·塞普洛伦奇诺，V·贾达夫，M·迈尔，S·米尔斯泰恩，M·玛诺哈兰，K·G·拉杰夫，
申请(专利权)人：阿尔尼拉姆医药品有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US