一种多模式组合万古霉素色谱固定相的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种多模式组合万古霉素色谱固定相的制备方法，在硅球表面修饰氨基，然后以戊二醛作为间隔臂，通过醛胺缩合反应，将大环糖肽抗生素万古霉素键合到硅球表面，再采用小分子的氨基酸或糖进行键合封端处理，制备出多模式组合手性色谱固定相；万古霉素结构中具有多种官能团，适宜于不同色谱分离模式下的分离操作，此外，以戊二醛作间隔臂将大环糖肽类抗生素键合到硅球表面，有效地减少了空间位阻效应的影响，提高键合效率，而小分子的封端处理既能够屏蔽残余硅羟基在色谱分离过程中的负面效应，也可以为分离提供更多种类和数量的作用位点，提高分离效率，改善分离选择性。

Preparation of a multimode combined vancomycin chromatographic stationary phase

The present invention relates to a preparation method of a multi mode combination of vancomycin stationary phase. Amido is modified on the surface of the silicon ball, then glutaraldehyde is used as the spacer arm, and the macrocyclic glycopeptide antibiotic vancomycin is bonded to the surface of the silicon ball through the amines condensation reaction, and then the amino acid or sugar of small molecules is used for bonding end treatment. The multi mode combination chiral chromatographic stationary phase was prepared. The vancomycin structure had a variety of functional groups, which was suitable for the separation operation under different chromatographic separation modes. In addition, the macrocyclic glycopeptide antibiotics were bonded to the surface of silicon ball with glutaraldehyde as the spacer arm. The effect of space hindrance effect was reduced effectively and the bonding efficiency was improved. The seal end treatment of small molecules can not only shield the negative effects of the residual silicon hydroxyl in the chromatographic separation process, but also provide more kinds and the number of action sites for separation, and improve the separation efficiency and improve the separation selectivity.

【技术实现步骤摘要】
一种多模式组合万古霉素色谱固定相的制备方法
本专利技术涉及纺织生产
，具体的说，是一种多模式组合万古霉素色谱固定相的制备方法。
技术介绍
万古霉素作为一种大环抗糖肽生素，具有多种官能团，其结构中包含3个空腔、18个手性中心、羧基、酰胺基团、糖苷基团等，已有研究表明，万古霉素键合修饰的固定相适宜于反相、正相、亲水、极性-有机相等多种色谱分离模式下的手性拆分。由于其作用机理的复杂多样，万古霉素键合固定相可以实现对生物样品等复杂体系的分离，具有非常广泛的应用潜力，可应用于蛋白质、多肽等组分的色谱分离，也可用于中药体系的分离、手性化合物的拆分等领域。目前常用的将万古霉素键合到硅胶表面的技术，是通过直接将含环氧基团的硅胶改性剂键合到硅球表面，然后利用环氧基与氨基的反应，将万古霉素键合到硅胶表面。这种方法的优势在于合成步骤简单，操作步骤少，成本相对较低，但由于大环抗生素分子较大，键合过程中位阻效应明显，硅球表面会有大量的硅羟基残存，这会对色谱分离过程造成严重的负面影响(如色谱峰拖尾、展宽等)。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种多模式组合万古霉素色谱固定相的制备方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多模式组合万古霉素色谱固定相的制备方法，其特征在于，其具体步骤为：(1)硅胶微球的活化与硅烷化取硅胶微球，分散在0.05mol/L的稀碱溶液中，超声25～35min，用水清洗至中性，烘干后，将硅球分散在甲醇‑水溶液中，加入3‑氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES试剂)，超声混匀后，加热回流反应20～24h，甲醇清洗，干燥，得到氨基修饰的硅球；(2)硅胶微球的万古霉素修饰将硅烷化处理后的硅球分散在质量浓度为10％～15％的戊二醛水溶液，超声混匀后，加热回流反应4～6h，甲醇清洗，干燥，得到醛基修饰的硅球；将醛基化处理后的硅球分散在水溶液中，加入10g/L的万古霉素水溶液，超声混匀后，加热回流反应...

【技术特征摘要】
1.一种多模式组合万古霉素色谱固定相的制备方法，其特征在于，其具体步骤为：(1)硅胶微球的活化与硅烷化取硅胶微球，分散在0.05mol/L的稀碱溶液中，超声25～35min，用水清洗至中性，烘干后，将硅球分散在甲醇-水溶液中，加入3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES试剂)，超声混匀后，加热回流反应20～24h，甲醇清洗，干燥，得到氨基修饰的硅球；(2)硅胶微球的万古霉素修饰将硅烷化处理后的硅球分散在质量浓度为10％～15％的戊二醛水溶液，超声混匀后，加热回流反应4～6h，甲醇清洗，干燥，得到醛基修饰的硅球；将醛基化处理后的硅球分散在水溶液中，加入10g/L的万古霉素水溶液，超声混匀后，加热回流反应4～6h，用水充分清洗，过滤，得到万古霉素修饰的硅球；(3)小分子封端处理将万古霉素修饰后的硅球分散在小分子化合物水溶液，加热回流反应10～12h，后用纯水清洗干净，烘干；(4)碳氮双键的还原将万古霉素修饰和封端后的硅球分散在0.02mol/L的磷酸氢二钾水溶液中，加入NaBH4，室温下搅拌反应2～3h，抽滤，后用纯水清洗至中性，烘干。2.如权利要求1所述的一种多模式组合万古霉素色谱固定相的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述的硅胶微球为介孔硅球；在步骤(1)中，所述的稀碱溶液为氢氧化钠或氢氧化钾水溶液；在步骤(1)中，所处理的硅胶微球与需使用的稀碱溶液的比例为1:8～1:10(g/mL)。3.如权利要求1所述的一种多模式组合万古霉素色谱固定相的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，甲醇-水的体积比为7:1～8:1；在步骤(1)中，所使用的硅球与需使用的甲醇-水溶液的比例为1:10～1:12(g/mL)，硅球与APTES试剂的用量的质量比为1:1...

【专利技术属性】
技术研发人员：张维冰，张麟，刘翻，
申请(专利权)人：南京赢点色谱分离技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32