一种键合型固定相手性色谱柱的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种键合型固定相手性色谱柱的制备方法，首先制备键合有不饱和双键的硅胶，并将其装填至手性色谱柱中，然后制备键合有不饱和双键的多糖衍生化物，将多糖衍生化物以溶液形式注入手性色谱柱中使其均匀吸附于硅胶表面，再向手性色谱柱中注入引发剂溶液，使硅胶的不饱和双键与多糖衍生化物的不饱和双键进行聚合反应形成键合型固定相。本发明专利技术的制备方法将常规制备方法中的吸附、键合步骤置于色谱柱中完成，简化了步骤和工艺，具有简单、快速、效率高的特点，制备的手性色谱柱固定相均一，可适用于多种强极性流动相，柱效高，分离效果好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术设及手性色谱柱领域，具体设及一种键合型固定相手性色谱柱的制备方 法。
技术介绍
多糖类手性固定相在用于手性对映体分离与制备方面显示了巨大的优势，具有广 泛的应用前景。目前，商品化的多糖衍生物手性固定相多是采用物理涂覆的方法将多糖衍 生物固着在硅胶的表面，因此存在着手性固定相流失的问题，同时也不耐受大部分较强的 极性溶剂，给实际使用带来诸多限制。针对运些问题，后续出现了键合型的多糖类手性固定 相，W克服上述的问题。目前的键合型固定相手性色谱柱的制备方法为先制备键合型固定相，再将固定相 装填至手性柱中，制备步骤繁多、时间长、操作复杂，如中国专利CN 100387333C公开的制 备方法。固定相的制备过程中，首先将键合有不饱和双键的多糖衍生化物涂覆至硅胶表面， 涂覆过程中涂层厚度难W控制，硅胶上涂覆的多糖衍生化物涂层厚度不均匀，键合后的娃 胶粒径和比表面积变化较大、不均匀，运种现象在小粒径硅胶填料中更加突出，由此得到的 手性色谱柱固定相不均一，另外，多糖衍生化物涂层较厚的硅胶填料在装填时还容易产生 变形或者脱落，W上运些现象严重影响了手性色谱柱的柱效及分离能力。
技术实现思路
为克服现有键合型固定相手性色谱柱在固定相制备、装填中存在的缺陷，本专利技术 的目的是提供。 本专利技术提供的制备方法包括W下步骤： S1 :制备键合有不饱和双键的硅胶，并将所述硅胶装填至手性色谱柱中； S2 :制备键合有不饱和双键的多糖衍生化物；[000引S3 :将所述多糖衍生化物W溶液形式注入步骤S1所得的手性色谱柱中使其吸附 于所述硅胶的表面，再向所述手性色谱柱中注入引发剂溶液，使所述硅胶的不饱和双键与 所述多糖衍生化物的不饱和双键进行聚合反应形成键合型固定相。 本专利技术所述的硅胶可W为现有的适用于手性色谱柱的任意类型硅胶，尤其为小粒 径硅胶；优选地，本专利技术所述的硅胶可W为多孔球形硅胶，其孔径为10~200纳米，粒径为 1. 5~50微米。 本专利技术制备方法步骤S1中所述的键合有不饱和双键的硅胶可W为现有键合型固 定相制备方法制备的带有不饱和双键的硅胶；优选地，可通过W下物质与硅胶反应制得： 乙締基Ξ乙氧基硅烷、丫-甲基丙締酷氧基丙基Ξ甲氧基硅烷或丫-甲基丙締酷氧基丙基 Ξ乙氧基硅烷。制备方法可W为将反应物置于甲苯等惰性溶剂中加热反应一定时间，反应 完毕后洗涂并干燥所得产物。 本专利技术制备方法步骤S1中硅胶的装填方法可W为现有任意装填方法，如渺浆法 等。 本专利技术制备方法步骤S2中所述的键合有不饱和双键的多糖衍生化物可w为现有 键合型固定相制备方法制备的带有不饱和双键的多糖衍生化物；优选地，可由多糖和衍生 化试剂、含不饱和双键试剂反应制得。制备方法可W为将反应物置于化晚等惰性溶剂中加 热反应一定时间，反应完毕后洗涂并干燥所得产物。 其中，本专利技术制备方法所述的多糖包括但不限于纤维素、淀粉、壳聚糖、木聚糖或 葡萄糖。 其中，本专利技术制备方法所述衍生化试剂包括但不限于苯基异氯酸醋、3, 5-二甲基 苯基异氯酸醋、3, 5-二氯苯基异氯酸醋或对甲基-苯基异氯酸醋。 其中，本专利技术制备方法所述含不饱和双键试剂述包括但不限于丙締酷氯、甲基丙 締酷氯、乙基丙締酷氯、3-苯基丙締酷氯或3-乙氧基丙締酷氯。 本专利技术制备方法步骤S3中所述的溶液形式的多糖衍生化物可W为多糖衍生化物 与有机溶剂形成的任意浓度的溶液，其中的有机溶剂可W为不与固定相成分发生反应的任 意有机溶剂；优选地，步骤S3中所述的多糖衍生化物可二甲基乙酷胺或二甲基甲酯胺 溶液的形式注入色谱柱中，溶液浓度可W为！~lOOOmg/mL。 本专利技术制备方法步骤S3中所述的引发剂可W为締控聚合反应中使用的任意引发 剂，优选使用偶氮二异下腊或戊二醒。所述引发剂可与有机溶剂形成的任意浓度的溶液，其 中的有机溶剂可W为不与固定相成分发生反应的任意有机溶剂；优选地，引发剂溶液可W 为二甲基乙酷胺或二甲基甲酯胺溶液，溶液浓度可W为！~lOOOmg/mL。 本专利技术制备方法中，多糖衍生化物溶液和引发剂溶液可WW高压累注入的方法注 入手性色谱柱中。 本专利技术制备方法步骤S3的聚合反应反应溫度可W为50~100°C。 本专利技术制备方法中，为使聚合反应更加彻底，可重复多次注入多糖衍生化物溶液 和引发剂溶液进行多次聚合反应，每次聚合反应的时间可W为40~100分钟。 本专利技术提供的制备方法具有W下优点： 1、应用范围广 本专利技术制备方法所制备的手性色谱柱中，通过化学键合的方式将多糖类衍生物固 定在色谱基质上形成色谱柱固定相，柱效高，可用于液相色谱对手性对映体的分析与分离， 还可适用于各种强极性溶剂的流动相，如四氨巧喃、二氯甲烧、Ξ氯甲烧等。 2、制备简单，快速本专利技术的制备方法只需要将不同的溶液注入色谱柱内，吸附和键合反应均在色谱 柱内完成，免去了常规制备方法中填料的洗涂和干燥等过程，尤其是避免了键合型固定相 的繁琐的装柱过程，提高了制备效率。 3、固定相品质均一，易于广品化 本专利技术的制备方法首次将多糖衍生化物与硅胶的吸附和键合反应置于色谱柱内 部进行，通过引发剂的作用完成键合过程，多糖衍生化物在硅胶的表面吸附容易控制，吸附 层厚度均匀，键合反应反应均一、完全，所得的固定相粒径与比表面积均匀稳定，保证了固 定相的均一性，所得手性色谱柱柱效高、分离效果好。【附图说明】 图1A、1B分别为应用例1在不同手性柱条件下得到的色谱图。 图2A、2B分别为应用例2在不同手性柱条件下得到的色谱图。【具体实施方式】 为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将进一步描述本专利技术的示例 性实施例的技术方案。 W下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。其中所述化学品如未 特别说明均为市售产品。 阳0巧 实施例1 1)硅胶的处理 取用20%盐酸按常规活化方式处理并干燥后的硅胶（平均粒径约为5微米、孔径 约为30纳米）10克，加入50毫升甲苯，再加入10毫升丫 -甲基丙締酷氧基丙基Ξ乙氧基 硅烷，氮气保护条件下加热105度，反应12小时，反应产物依次用甲苯和乙醇洗涂并干燥。 2)键合硅胶装柱 取2. 1克上述经过硅烷化的且带有不饱和双键的硅胶，用渺浆法装柱，制备成 巫4. 6X150毫米液相色谱柱。 3)多糖衍生化物的制备 阳03引取3克纤维素，加入150毫升化晚，加入1克3-乙氧基丙締酷氯，氮气保护下80 摄氏度反应5小时，再加入20毫升3, 5-二甲基苯基异氯酸醋作为衍生化试剂，反应10个 小时，冷却，用甲醇洗涂，干燥。 4)柱内键合反应 取0. 6克上述带有不饱和基团当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种键合型固定相手性色谱柱的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：制备键合有不饱和双键的硅胶，并将所述硅胶装填至手性色谱柱中；S2：制备键合有不饱和双键的多糖衍生化物；S3：将所述多糖衍生化物以溶液形式注入步骤S1所得的手性色谱柱中使其吸附于所述硅胶的表面，再向所述手性色谱柱中注入引发剂溶液，使所述硅胶的不饱和双键与所述多糖衍生化物的不饱和双键进行聚合反应形成键合型固定相。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：赵岳星，张强，薛昆鹏，谷云云，
申请(专利权)人：浙江月旭材料科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33