一种琥珀酸曲格列汀原料药及其制剂对映异构体的HPLC分析方法技术

本发明专利技术属于药物分析技术领域，具体为琥珀酸曲格列汀原料药及其制剂对映异构体的检验方法。本发明专利技术采用硅胶表面涂敷有直链淀粉-三（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯）为填料的手性色谱柱，以低级醇混合溶液-低级脂肪胺或低级醇胺为流动相进行琥珀酸曲格列汀对映异构体的测定。该方法操作简单、快速、重现性好、灵敏度高。

An amber acid Glenn raw medicine and its preparation method for analysis of enantiomers of HPLC

The invention belongs to the technical field of drug analysis, specific test method for enantiomers of succinic acid Glenn raw medicine and its preparation. The invention adopts the surface coated silica gel amylose - three (3,5- two methyl phenyl carbamate) chiral column packing, with lower alcohol mixed solution - lower aliphatic amine or lower alcohol amine as the mobile phase for determination of sitagliptin succinic acid enantiomers. The method is simple, rapid, reproducible and sensitive.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物分析检测领域，涉及一种琥珀酸曲格列汀原料药及其制剂对映异构体的HPLC分析方法。
技术介绍
琥珀酸曲格列汀，化学名：（R）-2-（（6-（3-氨基哌啶-1-基）-3-甲基-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1（2H）-基）甲基）-4-氟-苯甲腈琥珀酸盐，分子式：C18H20FN5O2・C4H6O4，其化学结构式如下：琥珀酸曲格列汀为武田公司研发，2015年3月26日，日本劳动厚生省（PMDA）人用药品委员会建议批准二肽基肽酶4（DPP-4）抑制剂琥珀酸曲格列汀（TrelagliptinSuccinate）用来治疗II型糖尿病患者，具有半衰期长的优势，一周服用一次。因此，琥珀酸曲格列汀正在成为DPP-4抑制剂中重要药物。琥珀酸曲格列汀为手性药物，采用立体专属性的分析方法严格控制产品的光学纯度，并制定合理可行的对映异构体杂质的限度，是琥珀酸曲格列汀及其制剂质量控制的重要部分，对促进其临床应用具有重要的现实意义。目前，尚未有准确灵敏地检测琥珀酸曲格列汀中对映异构体含量的有效方法的公开。中国专利申请CN104749269A（公开日2015.07.01）中公开了一种利用HPLC测定阿格列汀原料药及制剂中对映异构体杂质的方法，选择硅胶表面涂敷有直链淀粉-三((S)-α-苯乙基氨基甲酸酯)为固定相，以均含有三乙胺或二乙胺的正己烷和乙醇的混合溶剂作为流动相梯度洗脱。采用该方法可以将阿格列汀或其盐与阿格列汀的对映异构体进行分离，有效控制阿格列汀原料药及其制剂的质量。中国专利申请CN104535673A（公开日2015.04.22）中公开了一种用HPLC分离测定瑞舒伐他汀钙对映异构体的方法，所述方法的特征是所采用的手性分析色谱柱是以多糖类衍生物固定相并以共价键键合的方式固定到色谱柱填料硅胶颗粒表面的，并采用烷烃和低级醇的混合溶液作为流动相进行洗脱。所叙述的用HPLC分离测定瑞舒伐他汀钙対映异构体的方法能够简单、快速、准确地分离检测瑞舒伐他汀钙对映异构体杂质。中国专利申请CN103604895A（公开日2014.02.26）中公开了一种(-)苯甲酰科立内酯及其光学异构体分析与分离测定方法，用高效液相色谱法，采用纤维素类手性柱，以正相混合溶剂为流动相的正相色谱法进行分离，用该方法可快速的分离分析(-)苯甲酰(-)苯甲酰科立内酯的光学异构体杂质。可见，对于药品的对映异构体的分离检测，所选用的色谱柱、流动相等条件各有差异。色谱条件的选择是结合化合物本身性质、流动相的极性及他们的相互作用等因素，进行综合考量，选择适合待检样品的方法的过程。不同化合物的HPLC检测条件之间并没有明确的参考意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种琥珀酸曲格列汀原料药及其制剂对映异构体的高效液相色谱分离检测方法，该方法灵敏度高、分离度良好、结果准确可靠，适合用于琥珀酸曲格列汀的异构体质量控制。本专利技术提供琥珀酸曲格列汀的对映异构体的高效液相色谱分离检测方法，采用硅胶表面涂敷有直链淀粉-三（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯）的手性色谱柱，以低级醇混合溶液-低级醇胺或低级脂肪胺对其对映异构体进行分离测定。所述直链淀粉-三（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯）涂覆型手性柱优选为AD-H手性色谱柱。所述流动相优选为乙醇-甲醇-乙醇胺，其体积比优选为90-100：0～10：0.05～0.20，更优选地为乙醇-乙醇胺为100：0.1。优选地，在所述分离检测方法中，有如下任选的色谱条件：流动相流速为0.3～0.6ml/min，优选为0.4ml/min；和/或色谱柱温度为25～35℃，优选为30℃；和/或检测器采用紫外检测器，检测波长为278nm。在一种优选的实施方式中，所述分离检测方法的色谱条件包括：色谱柱为AD-H手性色谱柱，检测器采用紫外检测器（UV），流动相为乙醇-甲醇-乙醇胺(90～100：0～10：0.05～0.20)，色谱柱温度为25～35℃，流速为0.3～0.6ml/min，检测波长为260～290nm。在另一种进一步优选的实施方式中，所述分离检测方法的色谱条件包括：色谱柱为AD-H手性色谱柱，检测器采用紫外检测器（UV），流动相为乙醇-乙醇胺(100:0.1)，色谱柱温度为30℃，流速为0.4ml/min，检测波长为278nm。本专利技术的对映异构体分离检测方法包括系统适用性溶液的制备、供试品溶液的制备、对照品溶液的制备和测定四个步骤。所述系统适用性溶液的制备包括：取琥珀酸曲格列汀对照品和S型曲格列汀对照品，用少量溶剂溶解并定容至刻度，制成每1ml含1.0mg的琥珀酸曲格列汀（至少每1ml含有10ug的S型曲格列汀）作为系统适用性溶液。所述供试品溶液的制备包括：取琥珀酸曲格列汀或其制剂适量置于10ml容量瓶中，用少量溶剂溶解，然后稀释定容至刻度，配制成浓度为每1ml含1mg琥珀酸曲格列汀的溶液，作为供试品溶液。所述对照品溶液的制备包括：精密量取供试品溶液，用稀释液稀释至200倍体积，作为对照溶液；所述测定步骤包括：精密量取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10%～20%；再精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。其中所述稀释液优选为低级醇，优选为甲醇。在上述分离检测方法的中，供试品溶液色谱图中如有对映异构体峰，其峰面积不大于对照溶液主峰面积（0.50%）。在一种优选的本专利技术的实施方式中，所述对映异构体分离检测方法包括以下步骤：（1）系统适用性溶液的制备：取琥珀酸曲格列汀对照品和S-曲格列汀对照品适量，制成每1ml含有1mg琥珀酸曲格列汀（至少每1ml含有10ugS曲格列汀）的系统适用性溶液（2）琥珀酸曲格列汀溶液的制备：取琥珀酸曲格列汀适量，用甲醇配制成浓度为每1ml约含1.00mg琥珀酸曲格列汀的溶液。作为琥珀酸曲格列汀溶液。（3）琥珀酸曲格列汀0.5%对照溶液的制备：精密量取上述（3）制备的供试品溶液1ml，置200ml容量瓶中，加溶剂稀释至刻度，作为对照溶液。（4）测定方法：精密量取0.5%对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10%～20%。再精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。在一种进一步优选的实施方式中，本专利技术的对映异构体分离检测方法包括以下步骤：（1）系统适用性溶液的制备：精密称取杂质4约2.5mg至5ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为杂质4的贮备液。精密称取琥珀酸曲格列汀对照品约25mg，精密称定，置25ml量瓶中，精密加入上述杂质4贮备液1ml，再加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性溶液。（2）供试品溶液的制备：取琥珀酸曲格列汀约10mg，置10ml量瓶中，加溶剂溶解后，稀释摇匀，作为供试品溶液；（3）对照溶液的制备：精密量取上述（1）制备的供试品溶液1ml，置200ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，作为对照溶液；（4）测定方法：精密量取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10%～20%。再精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。优选地，本专利技术所述的分离检测方法中，琥珀酸曲格列汀与对映异构体色谱峰的分离度远大于1.5。本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种琥珀酸曲格列汀原料药及其制剂对映异构体的HPLC分析方法，其特征在于，将琥珀酸曲格列汀溶于低级醇溶液中，采用直链淀粉‑三（3,5‑二甲基苯基氨基甲酸酯）涂覆型手性色谱柱，以低级醇混合溶液‑低级脂肪胺或低级醇胺为流动相进行琥珀酸曲格列汀及其制剂对映异构体的测定。

【技术特征摘要】
1.一种琥珀酸曲格列汀原料药及其制剂对映异构体的HPLC分析方法，其特征在于，将琥珀酸曲格列汀溶于低级醇溶液中，采用直链淀粉-三（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯）涂覆型手性色谱柱，以低级醇混合溶液-低级脂肪胺或低级醇胺为流动相进行琥珀酸曲格列汀及其制剂对映异构体的测定。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述硅胶表面涂敷有直链淀粉-三（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯）的手性色谱柱为AD-H；所述流动相为乙醇-甲醇-乙醇胺或二乙胺；所述溶剂为低级醇溶液为乙醇或甲醇。3.根据权利要求2所述，其特征在于为乙醇-甲醇-乙醇胺，其体积比优选为90～100：0～10：0.05～0.20。4.根据权利要求3所述，其特征在于为乙醇-乙醇胺，其体积比优选为100：0.10。5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述的检测方法有如下任选的色谱条件：流动相流速为0.3～0.6ml/min，和/或色谱柱温度为25～35℃，和/或检测器为紫外检测器，检测波长278nm。6.根据权利要求5所述，其特征在于，所述流速为0.4ml/min，色谱柱温度为30℃，检测波长278nm。7.根据权利要求5所述，其特征在于，其色谱条件包括：色谱柱为AD-H的手性色谱柱，检测器为紫外检测器，流动相为乙醇-甲醇-乙醇胺，其体积比优选为90～100：0～10：0.05～0.20，流速为0.4ml/min，色谱柱温度为25～35℃，流速为0.8～1.2ml/min，检测波长260-290nm。8.根据权利要求1至7任一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦引林，
申请(专利权)人：江苏柯菲平医药股份有限公司，南京柯菲平盛辉制药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32