一种复合填料及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种复合填料，其包含主要由琼脂糖和纤维素制成的复合基质以及与复合基质交联的复合配基，所述复合配基包括离子交换配基和亲和配基，所述离子交换配基为偏重亚硫酸钠、氨基苯，所述亲和配基为羟基磷灰石、蛋白A或重组蛋白A。该复合填料兼具有多种基质和多种配基的性质，具有高蛋白载量的特点，同时能增加工作流速，从而有效提高蛋白质的纯化效率和效果。

【技术实现步骤摘要】
一种复合填料及其制备方法
本专利技术属于蛋白纯化填料
，具体涉及一种复合填料及其制备方法。
技术介绍
国外的填料生产技术及填料的多样性研发已经发展到很高的程度。1959年诺贝尔奖获得者ArneTiselius教授领导的团队正式提出凝胶过滤填料的概念，打开了蛋白纯化新方法的大门。迄今为止，已有几十种不同类型的填料被研发出来。填料构成主要分为两部分：第一部分是基质，由多糖或者聚合物交联而成的球状颗粒，基球大小约为90um，其表面和内部有大量的小孔，以供蛋白进入其内部。同时基球表面和内部具有丰富的羟基，方便修饰各种配基。能做成基球的物质也很多，根据原料不同，做成的基球性质也不同；第二部分是配基，基球做好之后，会修饰不同类型的配基。由于蛋白具有一定的大小、有等电点、疏水性和特异性等特点，所以修饰基球的配基类型也有相应的离子交换配基、疏水配基和亲和配基等。国内外主要生产的填料从配基类型来分主要有：凝胶过滤层析填料、离子交换层析填料、疏水层析填料、亲和层析填料和新型复合填料等，从填料基质来分主要有琼脂糖填料、葡聚糖填料、纤维素填料、聚合物填料、硅胶填料和新型复合填料等。1、凝胶层析本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种复合填料，其特征在于：其包含主要由琼脂糖和纤维素制成的复合基质以及与复合基质交联的复合配基，所述复合配基包括离子交换配基和亲和配基，所述离子交换配基为偏重亚硫酸钠、氨基苯，所述亲和配基为羟基磷灰石、蛋白A或重组蛋白A。

【技术特征摘要】
1.一种复合填料，其特征在于：其包含主要由琼脂糖和纤维素制成的复合基质以及与复合基质交联的复合配基，所述复合配基包括离子交换配基和亲和配基，所述离子交换配基为偏重亚硫酸钠、氨基苯，所述亲和配基为羟基磷灰石、蛋白A或重组蛋白A。2.根据权利要求1所述的复合填料，其特征在于：所述复合基质由琼脂糖、纤维素、甲苯、司盘80、中碱性pH调节剂以及去离子水制成；所述琼脂糖、纤维素、去离子水的质量比为1:(4～6):(10～20)，所述甲苯的加入量为去离子水体积的2/1～2倍，所述司盘80的加入量为甲苯体积的120/1～80/1倍。3.根据权利要求2所述的复合填料，其特征在于：该复合填料是由所述复合基质与偏重亚硫酸钠、丙酮、二甲基亚砜、1,4-丁二醇二缩水甘油醚、氨基苯、羟基磷灰石、蛋白A或重组蛋白A、交联剂以及pH调节剂制成，所述交联剂为环氧氯丙烷，所述pH调节剂为氢氧化钠、硼氢化钠。4.一种上述权利要求1～3任一所述的复合填料的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、制备琼脂糖纤维素复合基质；S2、将离子交换配基与步骤S1中制备的复合基质进行交联反应，制得复合离子交换填料中间体；S3、将亲和配基与步骤S2制备的复合离子交换填料进行交联反应，制得本发明的高流速高载量的复合填料。5.根据权利要求4所述的复合填料的制备方法，其特征在于：所述步骤S1的制备方法包括以下步骤：(1)在纤维素中加入去离子水，在40～60℃下以200～400rpm的转速进行搅拌0.5～1.5h，升高加热温度至90～100℃，加入琼脂糖继续搅拌2～4h，制得琼脂糖纤维素混合液，加入中碱性pH调节剂，调节其pH至中碱性；(2)取步骤(1)制得的琼脂糖纤维素混合液进行粘度测量，当粘度为600～800Pa.s，停止加热，并将琼脂糖纤维素混合液降温至50～70℃；(3)将甲苯在50～70℃下以100～200rpm的转速进行搅拌0.5～1.5h，加入司盘80继续搅拌1～3h；(4)将步骤(2)降温完成的琼脂糖纤维素混合液缓慢加入步骤(3)中，继续加热搅拌0.5～1h，制得琼脂糖纤维素复合基球溶液，将溶液中的琼脂糖纤维素复合基球进行洗净、筛分、收集。6.根据权利要求5所述的复合填料的制备方法，其特征在于：所述琼脂糖、纤维素、去离子水的质量比为1:(4～6):(10...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵培，
申请(专利权)人：浙江月旭材料科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33