本发明专利技术属分析化学领域，本发明专利技术公开了一种用液相色谱法分离草酸艾司西肽普兰中间体(‑)‑4‑[4‑二甲氨基‑1‑(4‑氟苯基)‑1‑羟基丁基]‑3‑羟甲基苯腈D‑(+)‑二对甲苯甲酰酒石酸盐(2:1)及其光学异构体的方法，该方法采用以表面涂敷有直链淀粉‑三（3,5‑二甲苯基氨基甲酸酯）的硅胶为填料的手性色谱柱，以正己烷‑低级醇‑碱性添加剂‑酸性添加剂为流动相，可以定量测定草酸艾司西肽普兰中间体光学异构体的含量，指示草酸艾司西肽普兰中间体光学异构体的稳定性。本发明专利技术方法灵敏度高，专属性强，准确度高，且操作简便。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术公开了一种液相色谱分析方法，具体涉及一种分离草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体的分析方法。
技术介绍
草酸艾司西肽普兰能增进中枢神经系统5-羟色胺（5-HT）能的作用，抑制5-羟色胺的再摄取，临床上用于治疗抑郁症和伴有或不伴有广场恐怖症的惊恐障碍。草酸艾司西肽普兰中间体的化学名为(-)-4-[4-二甲氨基-1-(4-氟苯基)-1-羟基丁基]-3-羟甲基苯腈D-(+)-二对甲苯甲酰酒石酸盐(2:1)，分子式C60H64F2N4O12。其化学结构式为：。该化合物的光学异构体结构式为：。对于草酸艾司西肽普兰中间体的光学纯度进行控制，在终产品草酸艾司西肽普兰的合成及其质量控制方面具有重要的现实意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种分离测定草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体的高效液相色谱分析方法，从而保证草酸艾司西肽普兰中间体的光学纯度，减少副反应的发生和杂质的生成，以实现其终产品原料药的质量控制。本方法所述的用高效液相色谱法分离检测草酸艾司西肽普兰中间体的光学纯度的方法，是采用以表面涂敷有直链淀粉-三（3,5-二甲苯基氨基甲酸酯）的硅胶为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇-碱性添加剂-酸性添加剂为流动相。本专利技术采用的手性色谱柱为CHIRALPAKAD或CHIRALPAKAD-H。本专利技术采用的低级醇溶液选自甲醇、无水乙醇、丙醇、丁醇、异丙醇，优选无水乙醇、异丙醇。本专利技术的方法流动相配比为正己烷-低级醇-碱性添加剂-酸性添加剂体系，正己烷-低级醇的体积比为80：20~100：0，碱性添加剂的体积比为0.1%~0.2%，酸性添加剂的体积比为0.2%~0.4%。本专利技术所述的分离分析方法，可按照以下方法实现：（1）取草酸艾司西肽普兰中间体样品适量，分别用无水乙醇溶解样品，配制成每1mL含草酸艾司西肽普兰中间体0.05～1mg的样品溶液；（2）设置流动相流速为0.5～1.5mL/min，检测波长为200～300nm，柱温：20℃~40℃；（3）取（1）的样品溶液10～50μl注入液相色谱仪，完成草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体的分离与测定。其中：岛津高效液相色谱仪：LC-20AB泵；SPD-20A检测器；SIL-20A自动进样器；CTO-10ASVP柱温箱；DGU-20A3脱气机；色谱柱：AD-H(CHIRALPAK250mm*4.6mm，5μm)；流动相：正己烷-无水乙醇-三氟乙酸-二乙胺（91：9：0.08：0.15）；流速：1.3mL/min；检测波长：240nm；柱温：35℃；进样体积：10μL。本专利技术采用AD-H(CHIRALPAK250mm*4.6mm，5μm)，能够有效分离草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体，准确测定草酸艾司西肽普兰中间体的光学纯度；本专利技术解决了草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体的分离分析问题，确保了草酸艾司西肽普兰中间体的纯度，从而保证了草酸艾司西肽普兰的质量可控（结果见附图1～5）。附图说明：图1为实施例1时的草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体HPLC图；图2为实施例2时的草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体HPLC图；图3为实施例3时的溶剂HPLC图；图4为实施例3时的草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体的HPLC图；图5为实施例3时的草酸艾司西肽普兰中间体的HPLC图。具体实施方式：以下实施例用于进一步理解本专利技术，但不限于本实施的范围。以下通过实例形式，对本专利技术涉及的分离测定草酸艾司西肽普兰中间体光学异构体的方法作进一步的详细说明，但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。实施例1仪器与条件岛津高效液相色谱仪：LC-20AB泵；SPD-20A检测器；SIL-20A自动进样器；CTO-10ASVP柱温箱；DGU-20A3脱气机；色谱柱：AD-H(CHIRALPAK250mm*4.6mm，5μm)；流动相：正己烷-无水乙醇-三氟乙酸-二乙胺（94：6：0.08：0.1）；流速：1.0mL/min；检测波长：240nm；柱温：40℃；进样体积：10μL。实验步骤取草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体适量，分别用无水乙醇溶解样品，配制成含草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体约0.2mg/mL的样品溶液。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图1，图1中保留时间34.762min的色谱峰为草酸艾司西肽普兰中间体的色谱峰，保留时间40.694min的色谱峰为草酸艾司西肽普兰中间体的光学异构体。在该条件下，草酸艾司西肽普兰中间体与其光学异构体可实现分离。实施例2仪器与条件岛津高效液相色谱仪：LC-20AB泵；SPD-20A检测器；SIL-20A自动进样器；CTO-10ASVP柱温箱；DGU-20A3脱气机；色谱柱：AD-H(CHIRALPAK250mm*4.6mm，5μm)；流动相：正己烷-无水乙醇-三氟乙酸-二乙胺（91：9：0.08：0.15）；流速：1.5mL/min；检测波长：240nm；柱温：35℃；进样体积：10μL。实验步骤取草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体适量，分别用无水乙醇溶解样品，配制成含草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体约0.2mg/mL的样品溶液。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图2，图2中保留时间12.338min的色谱峰为草酸艾司西肽普兰中间体的色谱峰，保留时间9.823min的色谱峰为草酸艾司西肽普兰中间体的光学异构体。在此条件下，各物质峰形良好，草酸艾司西肽普兰中间体与其光学异构体实现完全分离。实施例3仪器与条件岛津高效液相色谱仪：LC-20AB泵；SPD-20A检测器；SIL-20A自动进样器；CTO-10ASVP柱温箱；DGU-20A3脱气机；色谱柱：AD-H(CHIRALPAK250mm*4.6mm，5μm)；流动相：正己烷-无水乙醇-三氟乙酸-二乙胺（91：9：0.08：0.15）；流速：1.3mL/min；检测波长：240nm；柱温：35℃；进样体积：10μL。实验步骤取草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体适量，分别用无水乙醇溶解样品，配制成含草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体约0.2mg/mL的样品溶液；另取无水乙醇适量作为空白溶剂。按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图。结果见附图3~5，图3为溶剂色谱图；图4中保留时间14.564min的色谱峰为草酸艾司西肽普兰中间体，保留时间11.452min的色谱峰为草酸艾司西肽普兰中间体的光学异构体；图5中保留时间14.576min的色谱峰为草酸艾司西肽普兰中间体。从图中可以看出，在该条件下草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体之间分离度符合要求。对上述草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体的分析方法进行如下验证：1、系统适用性试验取草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体适量，分别用无水乙醇溶解样品，配制成含草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体约0.2mg/mL的溶液作为供试品溶液。按实施例3的色谱条件进行分离测定，记录色谱图。由图3~图5可知，在此条件下，草酸艾司西肽普兰中间体及其光学异构体的色谱峰峰形良好，分离度符合要求，且溶剂对草酸艾司西肽普兰中本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用高效液相色谱法分离草酸艾司西肽普兰中间体光学异构体的方法，其特征在于：采用以表面涂敷有直链淀粉‑三（3,5‑二甲苯基氨基甲酸酯）的硅胶为填料的手性色谱柱，以正己烷‑低级醇‑碱性添加剂‑酸性添加剂为流动相。
【技术特征摘要】
1.一种用高效液相色谱法分离草酸艾司西肽普兰中间体光学异构体的方法，其特征在于：采用以表面涂敷有直链淀粉-三（3,5-二甲苯基氨基甲酸酯）的硅胶为填料的手性色谱柱，以正己烷-低级醇-碱性添加剂-酸性添加剂为流动相。2.根据权利要求1所述的分离分析方法，手性色谱柱选自CHIRALPAKAD或CHIRALPAKAD-H。3.根据权利要求1所述的分离分析方法，所说的低级醇选自以下化合物中的一种或几种：甲醇、无水乙醇、丙醇、丁醇、异丙醇。4.根据权利要求3所述的分离测定方法，所说的低级醇优选无水乙醇、异丙醇。5.根据权利要求1所述的分离分析方法，所说的碱性添加剂为以下化合物中的一种：二乙胺、三乙胺、丁胺、乙醇胺。6.根据权利要求1所述的分离分析方法，所说的酸性添加剂为以下化合物中的一种：甲酸、三氟乙酸、乙酸。7.根据权利要求1所述的分离分析方法，所说的流动...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙冬雪，王宇杰，
申请(专利权)人：北京万全德众医药生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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