The invention discloses a Bacillus fermentation method belonging to the field of microbial fermentation technology. The Bacillus spore was cultivated in the fermentation medium after the one or two stage seeds were expanded and cultured. During the period, the Bacillus powdered Bacillus per gram of Bacillus CFU was less than 2.3 * 10 through the feed flow plus carbon source and the relative deficiency of the limited amino acid in the fermentation medium.
【技术实现步骤摘要】
一种芽孢杆菌的发酵方法
本专利技术属于微生物发酵
,具体涉及一种芽孢杆菌的发酵方法。
技术介绍
玉米赤霉烯酮(ZEN)又称F-2毒素,是一类2,4-二羟基苯甲酸的内酯化合物,具有类雌性激素作用,可与子宫内雌激素受体不可逆结合,从而影响动物的生殖生理。玉米赤霉烯酮对畜牧业及人类产生严重的危害,因此,有效控制和解决ZEN对粮食和饲料的污染,对改善动物生产性能和提高人类食品安全有非常重要的意义。科学工作者们对该毒素的解毒去除方法进行了不断研究,总结国内外研究者关于ZEN除毒去毒方法,主要包括物理去毒法、化学去毒法和微生物及生物酶降解法。传统的理化方法对ZEN去毒均不理想,从而限制了在实际生产中的应用。申请公布号为CN102181376A的专利技术专利公开了一种同时降解玉米赤霉烯酮和纤维素的枯草芽孢杆菌BacillussubtilisANSB01G(保藏编号为CGMCCNo.4297)。并公开其培养方法为,取活菌浓度为109CFU/ml的枯草芽孢杆菌0.5-2.5ml,接种于50-100ml培养基中,在30-40℃进行摇瓶发酵培养20-30h,转速180-220r/ ...
【技术保护点】
一种芽孢杆菌的发酵方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)一级种子制备:取芽孢杆菌菌种悬浊液接种于一级种子培养基中,然后进行培养;(2)二级种子制备:将一级种子接种于二级种子培养基中,然后进行培养;(3)发酵:将二级种子接种于发酵培养基中,然后进行发酵培养;当发酵至8‑10h时流加补料培养基A,发酵至12‑17h时流加补料培养基B;所述补料培养基A包含质量百分比10%‑20%的碳源;所述补料培养基B包含质量百分比5%‑10%的碳源和质量百分比1.8%‑9.5%发酵培养基中缺乏的菌种限制性氨基酸。
【技术特征摘要】
1.一种芽孢杆菌的发酵方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)一级种子制备:取芽孢杆菌菌种悬浊液接种于一级种子培养基中,然后进行培养;(2)二级种子制备:将一级种子接种于二级种子培养基中,然后进行培养;(3)发酵:将二级种子接种于发酵培养基中,然后进行发酵培养;当发酵至8-10h时流加补料培养基A,发酵至12-17h时流加补料培养基B;所述补料培养基A包含质量百分比10%-20%的碳源;所述补料培养基B包含质量百分比5%-10%的碳源和质量百分比1.8%-9.5%发酵培养基中缺乏的菌种限制性氨基酸。2.根据权利要求1所述的发酵方法,其特征在于,所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌。3.根据权利要求1或2所述的发酵方法,其特征在于,所述一级种子培养基包括的原料为:每1000mL,包括胰蛋白胨8-12g、酵母浸膏1.5-3g、葡萄糖1.5-4g、牛肉膏2-5g、氯化钠3-6g、磷酸氢二钠2.5-4g、七水硫酸镁0.5-1.5g,蒸馏水1000mL,pH为7.0-7.4。4.根据权利要求1或2所述的发酵方法,其特征在于,所述二级种子培养基包括的原料按质量百分比为:葡萄糖0.5%-3%,酵母抽提物0.5%-3%,蛋白胨0.5%-3%,磷酸氢二钾0.02%-0.05%,氯化钠0.5%-1%,硫酸镁0.02%-0.1%,培养基pH为6.5-7.5。5.根据权利要求1或2所述的发酵方法,其特征在于,所述发酵培养基包括的原料按质量百分比为:葡萄糖0.5%-2.5%,豆柏1.5%-4%,玉米浆1%-5%,酵母粉1%-3%,蛋白胨1%-3%,磷酸氢二钾0.01%-0.05%,硫酸镁0.1%-0.2%,硫酸锰0.0...
【专利技术属性】
技术研发人员:马秋刚,赵丽红,计成,郭永鹏,郑文革,
申请(专利权)人:中国农业大学,
类型:发明
国别省市:北京,11
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