具有pH敏感的短肽修饰聚合物及其制备方法和用途技术

本发明专利技术属于高分子材料合成与制备技术领域，具体涉及具有pH敏感的短肽修饰聚合物及其制备方法和用途。本发明专利技术要解决的技术问题是目前合成多肽修饰的两亲性聚合物的分离纯化困难，产率较低。发明专利技术解决上述技术问题的方案是提供一种具有pH敏感的短肽修饰聚合物，其结构如式Ⅰ所示。本发明专利技术还提供了上述具有pH敏感的短肽修饰聚合物的制备方法和用途。本发明专利技术提供的具有pH敏感的短肽修饰聚合物，能够制备出同时载带抗原肽(R)和CPG阳离子的脂质体CPG‑R‑LPS，该类阳离子脂质体具有较好的免疫增强作用，而且安全性良好，为肿瘤疫苗的发展及免疫治疗提供了新的选择。

PH sensitive short peptide modified polymer and preparation method and use thereof

The invention belongs to the technical field of polymer material synthesis and preparation, in particular to a short peptide modified polymer with pH sensitivity and a preparation method and application thereof. The technical problem to be solved is that the two affinity polymer modified by polypeptide is difficult to separate and purify, and the yield is low. The proposal to solve the above technical problems is to provide a pH sensitive short peptide modified polymer, and its structure is shown in formula I. The invention also provides a preparation method and application of the pH sensitive short peptide modified polymer. The present invention provides a pH sensitive short peptide modified polymer, which can prepare CPG R LPS, a liposome with simultaneous carrying antigen peptide (R) and CPG cations. The cationic liposome has good immune enhancement, and has good safety. It provides a new choice for the development of tumor vaccine and immunotherapy.

【技术实现步骤摘要】
具有pH敏感的短肽修饰聚合物及其制备方法和用途
本专利技术属于高分子材料合成与制备
，具体涉及具有pH敏感的短肽修饰聚合物及其制备方法和用途。
技术介绍
脂质体具有磷脂双分子层，具有良好的生物相容性和可修饰性。作为重要的纳米载体之一，脂质体在疏水化学药物、基因药物以及药物的靶向传输中得到广泛应用。由于细胞膜表面带负电荷，故阳离子脂质体很容易透过细胞膜，从而被细胞摄取。pH敏感的纳米载药系统被广泛用于靶向某些特定器官，肿瘤组织及特定的细胞器(内涵体、溶酶体)的药物控制释放。一种设计策略是在聚合物分子中引入对酸度敏感的化学键，如腙键。当外部环境的pH发生变化时，这些pH敏感的化学键就会发生断裂，使整个聚合物的骨架被破坏，从而使原本包裹或偶联在这种聚合物骨架内的药物分子释放出来。当该pH敏感脂质体通过内吞作用摄取抗原后，该脂质体将在DC细胞溶酶体酸性环境中被水解为抗原肽，与主要组织相容性复合体(MHC)II类分子结合，导致特异性免疫反应。当抗原进入到DC细胞细胞质，经蛋白酶体水解后，抗原也可以通过MHCI类分子，诱导产生抗原特异性毒性T细胞(CTL)，直接攻击靶细胞并有效地消除肿瘤。本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有pH敏感的短肽修饰聚合物，其结构如式Ⅰ所示：

【技术特征摘要】
1.具有pH敏感的短肽修饰聚合物，其结构如式Ⅰ所示：其中，R为半胱氨酸修饰的多肽；n＝45～113。2.根据权利要求1所述的具有pH敏感的短肽修饰聚合物，其特征在于：所述具有pH敏感的短肽修饰聚合物的分子量为3000～10000。3.根据权利要求1所述的具有pH敏感的短肽修饰聚合物，其特征在于：R为CKVPRNQDWL、SVYDFFVWLC、CRGD、CRAHYNIVT、CEARPALLTSRLRFIPK、CGFFALIPKIISSPLFKTLLSAVGSALSSSGGQE、CLLGRNSFEV、CTALPFGFILV、CLADFDPRV、CIMDQVPFSV或CSIMTYDFHGA。4.根据权利要求1所述的具有pH敏感的短肽修饰聚合物，其特征在于：R为CKVPRNQDWL。5.具有pH敏感的短肽修饰聚合物的制备方法，包括以下步骤：1)将胆固醇、乙酰丙酸、4-二甲氨基吡啶和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐溶解于干燥的有机溶剂中，常温下反应36h～48h，反应结束后，反应液经1mM盐酸萃取，有机相经干燥、过滤、浓缩后，得到固体乙酰丙酸-胆固醇；2)将聚乙二醇和对硝基苯基氯甲酸酯(NPC)完全溶于干燥的有机溶剂，然后加入三乙胺使反应液的pH值为8～9；在氮气保护，0～4℃条件下反应2h～3h，然后在常温下继续反应24h～36h，将反应液浓缩，经柱层析分离纯化，然后在极性小的溶剂中沉淀，真空干燥得聚乙二醇-对硝基苯基甲酸酯；3)将聚乙二醇-对硝基苯基甲酸酯溶于干燥的有机溶剂，再滴加水合肼，常温下反应36h～48h；然后将反应液浓缩，然后在无水乙醚或正己烷中沉淀，真空干燥得聚乙二醇-酰肼；4)将聚乙二醇-酰肼和乙酰丙酸-胆固醇溶解在干燥DMF中，加入三乙胺使反应液的pH值为8～9，在常温反应36h～48h；反应结束，将反应液倒入透析袋中，透析36h～48h，每隔12h换一次水；透析完毕后，将反应液冻干，得到聚乙二醇-腙键-胆固醇；5)将OH-PEG-Hz-Chol和4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯溶于干燥的有机溶剂，常温下反应24h～36h；待反应结束后，将反应液浓缩，然后在极性小的溶剂中沉淀，真空干燥得到SMCC-聚乙二醇-腙键-胆固醇；6)将R和SMCC-聚乙二醇-腙键-胆固醇溶于乙腈，并加入pH＝7.2的羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液，在0～4℃氮气保护条件下反应12h～24h；反应结束...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈俐娟，汪周峰，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：四川,51