一种人参自毒物质人参皂苷降解菌筛选的方法技术

本发明专利技术公开了一种人参自毒物质人参皂苷降解菌筛选的方法，属于微生物菌种筛选技术领域，该方法利用微生物在土壤中经过一定途径的代谢活动将自毒物质降解的原理，用带有一定含量人参自毒物质人参皂苷的培养基培养不同菌种，在菌种利用培养基中营养物质生长之后，将用反相高效液相色谱检测发酵液中自毒物质人参皂苷的含量变化进行对比，从而筛选出具有较高人参自毒物质降解能力的菌株。应用本方法筛选出的人参自毒物质降解菌用于人参种植，既解决了人参重茬病害问题，且不会对人参的正常生长有副作用，又不会污染环境、对环境造成危害，具有良好的经济和社会效益。

Screening method of ginseng self poison substance ginsenoside degrading bacteria

The invention discloses a method for screening Panax ginseng saponins degrading bacteria, which belongs to the technical field of screening microbial strains. The method uses the principle of microbial degradation of self toxic substances in soil through metabolic activities in a certain way and culture medium with a certain content of ginseng saponins with a certain content of ginseng. After the growth of the nutrient substance in the culture medium with the same strain, the content changes of the self toxic substance ginsenoside in the fermented liquid were compared by the reversed phase high performance liquid chromatography (RP HPLC), so as to screen out the strains with higher degradation ability of ginseng self toxic substances. The application of this method of ginseng self toxic material degrading bacteria to ginseng planting can not only solve the problem of ginseng recrop disease, but also do not have side effects on the normal growth of ginseng, pollute the environment and cause harm to the environment, and have good economic and social benefits.

【技术实现步骤摘要】
一种人参自毒物质人参皂苷降解菌筛选的方法
本专利技术涉及微生物菌种筛选
，具体涉及一种人参自毒物质人参皂苷降解菌筛选的方法。
技术介绍
随着科技的发展，近几年来，农业种植重茬病害日益严重。人参是国家一级重点保护植物，作为“东北三宝”之一，其同样受到重茬病害的危害。很多资料显示，人参重茬的主要原因是由于其本身自毒物质的存在，而人参皂苷是人参主要自毒物质，土壤中人参皂苷的存在导致种过一茬人参后的地块基本都不能再连续种植，需要整地、修整之后才能基本恢复正常种植，否则出苗率极低，且易发生根腐病等严重病害。但是目前该方法时间成本较高，大大减少了人参的正常产量，若改在其他地方载种人参，由于气候环境的差异，又会使人参缺少很多道地药材的药用价值，质量不能得到保证。因此，找到一种合适的方法降解人参自毒物质是极其必要的，但是要求其既不能对人参的正常生长有副作用，又不能污染环境、对环境造成危害。利用微生物对土壤中的人参皂苷进行降解是一种不会造成污染的方法，且能够解决人参重茬病害问题。
技术实现思路
针对以上技术缺陷，本专利技术的目的是提供一种能够降解种植人参时土壤中自毒物质人参皂苷的菌种的筛选方法，进而本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人参自毒物质人参皂苷降解菌筛选的方法，其特征在于：步骤一：人参皂苷降解菌的初步筛选（1）取50mL培养基加入2mg/mL83%的人参皂苷标准样品溶液1mL，制备多组样品液，向其中分别接入不同菌种；（2）将（1）中的多组处理样品分别于34℃条件下以220rpm的速度摇床培养24h，之后由高速冷冻离心机以12000rpm的速度离心20min；（3）分别取（2）中的上清液于60℃旋转蒸发器旋转蒸干；（4）将（3）中所得的各蒸干固体用甲醇溶解定容至10mL；（5）将（4）所得溶液分别由高速冷冻离心机以12000rpm的速度再次离心20min；（6）取（5）中所得的各上清液分别由0.45μm微孔滤膜...

【技术特征摘要】
1.一种人参自毒物质人参皂苷降解菌筛选的方法，其特征在于：步骤一：人参皂苷降解菌的初步筛选（1）取50mL培养基加入2mg/mL83%的人参皂苷标准样品溶液1mL，制备多组样品液，向其中分别接入不同菌种；（2）将（1）中的多组处理样品分别于34℃条件下以220rpm的速度摇床培养24h，之后由高速冷冻离心机以12000rpm的速度离心20min；（3）分别取（2）中的上清液于60℃旋转蒸发器旋转蒸干；（4）将（3）中所得的各蒸干固体用甲醇溶解定容至10mL；（5）将（4）所得溶液分别由高速冷冻离心机以12000rpm的速度再次离心20min；（6）取（5）中所得的各上清液分别由0.45μm微孔滤膜过滤，超声5min排除气泡后，利用反相高效液相色谱法检测各组样品中人参皂苷的含量，以人参皂苷含量最低为判断标准筛选出具有最优人参皂苷降解效果的菌种；步骤二：人参皂苷降解菌对人参皂苷降解效果的进一步判定：（1）选用步骤一筛选出的人参皂苷含量最低的菌种为进一步的实验菌种；（2）取两瓶100mL的LB培养基，分别向其中加入2mg/mL83%的人参皂苷标准样品溶液1mL，其中一瓶设置为对照，...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨宏柳，张林，孙洪磊，董维银，
申请(专利权)人：山东京青农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37