一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法和纯度的分析方法技术

本发明专利技术提供了一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法和纯度的分析方法，属于医学检验与药物分析领域。本发明专利技术提供的rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法，通过优化流动相的配比、样品的浓度、检测时间、检测波长和柱温等条件，进一步提高检测的专属性、检测限和耐用性；采用该检测方法进行纯度分析也会具有较为精确的检测结果好而可靠的检测数据，具有较大的实际应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法和纯度的分析方法
本专利技术涉及医学检验和药物分析领域，具体而言，涉及一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法和纯度的分析方法。
技术介绍
药物的研制过程中，蛋白含量和纯度的检测方法是药物筛选以及质量控制的重要评价参数，该方法必须通过方法验证，满足专属性、精密度、准确度等方法验证方面的要求，这样才能保证检测结果的可靠性，才能用于指导药物的筛选以及产品质量控制。人甲状旁腺激素是维持机体血钙平衡的重要激素之一，其基本生理作用是通过增加成骨细胞数目，促进骨吸收及生长，rhPTH是人内源性甲状旁腺激素的活性片段，每天注射一次可通过刺激成骨细胞活性，增加新骨在松质骨和皮质骨表面的聚集。由于rhPTH产品处于开发阶段，目前针对rhPTH含量和纯度的检测方法专属性、检测限、耐用性和精密度都还不够，需要进一步的提高。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法，通过该检测方法，能较好的提高检测的专属性、检测限和精密度，提供准确可靠的检测数据。本专利技术的第二目的在于提供一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂纯度的分析方法，通过该分析方法，可以较好分析出不同样本的纯度和含量信息，为质量控制等提供较好的信息保障。为了实现本专利技术的上述目的，采用以下技术方案：一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法，包括以下步骤：将rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂配置成待测溶液，将待测溶液注入高效液相色谱仪，在以下条件进行检测：色谱条件：色谱柱为反相色谱柱，流动相包括流动相A和流动相B，其中，流动相A主要由乙腈溶液和硫酸钠溶液按照8-15:85-92的体积比混合制得，流动相B主要由乙腈溶液和硫酸钠溶液按照45-55:45:55体积比混合制得；流动相A和流动相B的pH值为1.9-2.5；洗脱条件：洗脱时间及洗脱时间内流动相B的体积含量如下：0-5min，0～25％；5-15min，25％～35％；15-65min，35％～50％；65-70min，50％～100％；70-72min，100％；72-73min，100％～0；73-85min，0％；检测波长为210-220nm。一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂纯度的分析方法，配置rhPTH蛋白标准品的梯度浓度溶液以及rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂待检品的溶液，按照上述的rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法进行色谱检测，根据色谱检测的结果计算得到rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂待检品的纯度结果。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术提供的rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法，通过优化流动相的配比、样品的浓度、检测时间、检测波长和柱温等条件，进一步提高检测的专属性、检测限和耐用性；采用该检测方法进行纯度分析也会具有较为精确的检测结果好而可靠的检测数据，具有较大的实际应用价值。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1为本专利技术实验例1提供的现行检测方法的色谱图；图2为本专利技术实验例1提供的原研药的色谱图；图3为本专利技术实验例1提供的洗脱条件调整的色谱图。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本专利技术实施例的一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法和纯度的分析方法进行具体说明。一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法，包括以下步骤：将rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂配置成待测溶液，将待测溶液注入高效液相色谱仪，在以下条件进行检测：色谱条件：色谱柱为反相色谱柱，流动相包括流动相A和流动相B，其中，流动相A主要由乙腈溶液和硫酸钠溶液按照8-15:85-92的体积比混合制得，流动相B主要由乙腈溶液和硫酸钠溶液按照45-55:45:55体积比混合制得；流动相A和流动相B的pH值为1.9-2.5；洗脱条件：洗脱时间及洗脱时间内流动相B的体积含量如下：0-5min，0～25％；5-15min，25％～35％；15-65min，35％～50％；65-70min，50％～100％；70-72min，100％；72-73min，100％～0；73-85min，0％；检测波长为210-220nm。进一步地，本专利技术的较佳实施例中，流动相A和流动相B的流速为0.8mL/min-1.3mL/min。进一步地，本专利技术的较佳实施例中，反相色谱柱为C18柱或C8柱。进一步地，本专利技术的较佳实施例中，待测溶液的加样量为45-60μL。进一步地，本专利技术的较佳实施例中，色谱柱的柱温为38℃-44℃。进一步地，本专利技术的较佳实施例中，待测溶液的浓度为0.2mg/mL-0.3mg/mL。进一步地，本专利技术的较佳实施例中，测溶液有测试母液制得，测试母液由rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制制得。进一步地，本专利技术的较佳实施例中，测试母液的2mg/mL-3mg/mL。一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂纯度的分析方法，配置rhPTH蛋白标准品的梯度浓度溶液以及rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂待检品的溶液，按照上述的rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法进行色谱检测，根据色谱检测的结果计算得到rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂待检品的纯度结果。进一步地，本专利技术的较佳实施例中，还包括rhPTH蛋白标准品的标准曲线的获得。以下结合实施例对本专利技术的特征和性能作进一步的详细描述。实施例1本实施例提供一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法，具体检测步骤如下：1.1将待检rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂配置成测试母液，测试母液的浓度为2mg/mL；1.2将测试母液稀释成rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的待测溶液；待测溶液的浓度为0.2mg/mL；1.3流动相包括流动相A和流动相B，流动相A主要由乙腈溶液和硫酸钠溶液按照8：92的体积比混合制得，流动相A的pH值为1.9，流动相B主要由乙腈溶液和硫酸钠溶液按照45:55体积比混合制得，流动相B的pH值为2.5；1.4选择C18柱作为反相色谱柱，将45μL待测溶液加入到色谱柱中在210nm的检测波长、38℃的柱温下进行检测；1.5流动相的流速为0.8mL/min。洗脱条件为：洗脱时间及洗脱时间内流动相B的体积含量如下：0-5min，0～25％；5-15min，25％～35％；15-65min，35％～50％；65-70min，50％～100％；70-72min，100％；72-73min，100％～0；73-85min，0％。实施例2本实施例提供一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法，具体检测步骤如下：1.1将待检rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂配置成测试母液，测试母液的浓度为3本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：将rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂配置成待测溶液，将所述待测溶液注入高效液相色谱仪，在以下条件进行检测：色谱条件：色谱柱为反相色谱柱，流动相包括流动相A和流动相B，其中，所述流动相A主要由乙腈溶液和硫酸钠溶液按照8‑15:85‑92的体积比混合制得，所述流动相B主要由乙腈溶液和硫酸钠溶液按照45‑55:45:55体积比混合制得；所述流动相A和所述流动相B的pH值为1.9‑2.5；洗脱条件：洗脱时间及所述洗脱时间内所述流动相B的体积含量如下：0‑5min，0～25％；5‑15min，25％～35％；15‑65min，35％～50％；65‑70min，50％～100％；70‑72min，100％；72‑73min，100％～0；73‑85min，0％；检测波长为210‑220nm。

【技术特征摘要】
1.一种rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：将rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂配置成待测溶液，将所述待测溶液注入高效液相色谱仪，在以下条件进行检测：色谱条件：色谱柱为反相色谱柱，流动相包括流动相A和流动相B，其中，所述流动相A主要由乙腈溶液和硫酸钠溶液按照8-15:85-92的体积比混合制得，所述流动相B主要由乙腈溶液和硫酸钠溶液按照45-55:45:55体积比混合制得；所述流动相A和所述流动相B的pH值为1.9-2.5；洗脱条件：洗脱时间及所述洗脱时间内所述流动相B的体积含量如下：0-5min，0～25％；5-15min，25％～35％；15-65min，35％～50％；65-70min，50％～100％；70-72min，100％；72-73min，100％～0；73-85min，0％；检测波长为210-220nm。2.根据权利要求1所述rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法，其特征在于，所述流动相A和所述流动相B的流速为0.8mL/min-1.3mL/min。3.根据权利要求2所述rhPTH蛋白或rhPTH蛋白制剂的检测方法，其特征在于，所述反相色谱柱为C18柱或C8柱。4.根据权利要求1所述rhPTH蛋白或rhPT...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘月峰，苏迪，李静，樊欣迎，闻亚磊，蔡杨柳，
申请(专利权)人：北京博康健基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11