一种快速分析非水溶性金属卟啉的高效液相色谱方法技术

本发明专利技术涉及一种快速分析非水溶性金属卟啉的高效液相色谱方法，包括：(1)配制金属卟啉标准样品溶液；(2)设置高效液相色谱分析条件；(3)制作金属卟啉标准曲线；(4)分析待测金属卟啉样品。本发明专利技术具有准确、高效、灵敏度高、重现性好和操作简单的优点，且仪器设备成本低，有利于推广与应用，可为烷烃氧化和烯烃环氧化工艺研究中金属卟啉仿生催化剂的筛选与性能评价提供重要的参考依据。

A high performance liquid chromatographic method for rapid analysis of non water-soluble metalloporphyrin

The invention relates to a rapid analysis of high performance liquid water insoluble metalloporphyrin chromatography method, including: (1) preparation of metal porphyrin standard sample solution; (2) setting the HPLC analysis conditions; (3) making the standard curve of metal porphyrin; (4) the metal porphyrin sample analysis. The invention has the advantages of high accuracy and efficiency, high sensitivity, good reproducibility and simple operation, and low equipment costs, is conducive to the promotion and application, can provide an important reference for the selection and performance evaluation of metalloporphyrins catalysts for epoxidation of alkene and alkane oxidation process.

【技术实现步骤摘要】
一种快速分析非水溶性金属卟啉的高效液相色谱方法
本专利技术属于仿生催化剂分析
，涉及一种快速分析非水溶性金属卟啉的高效液相色谱方法,可为烷烃氧化和烯烃环氧化工艺研究中金属卟啉仿生催化剂的筛选与性能评价提供重要的参考依据。
技术介绍
金属卟啉是一类重要的仿生催化剂，它能够模拟细胞色素P-450氧化酶，在温和条件下活化氧气或空气(分子氧)，从而高效率、高选择性地实现烷烃氧化、烯烃环氧化及羰基化等，在仿生催化、分析化学、环保领域显示出广泛的应用前景。通过烷烃类和烯烃类的选择性氧化制备含氧有机产品是目前化工行业最具挑战性的课题之一，在石油化工中占有极其重要的地位。利用现代先进分析技术，筛选出活性高、选择性强、稳定性好的卟啉仿生催化剂，有望于促进化工企业转变观念，发展仿生催化绿色工艺，提高经济效益，降低环境污染，节约自然资源。金属卟啉结构的稳定性和可重复使用性是衡量其催化性能的关键参数。研究卟啉化合物结构的分析技术主要有质谱分析(MS)、核磁共振分析(NMR)、紫外—可见光光谱分析(UV-Vis)和红外光谱分析(FTIR)。例如，通过质谱分析，可以确定卟啉类化合物的种类、系列、碳数分布和分子量范围；1H-NMR和13C-NMR分析方法可分别用于鉴定卟啉化合物中H和C的种类及它们之间彼此的位置；卟啉化合物紫外-可见光谱的变化，包括峰位的移动、峰形的改变和Q带吸收峰的个数，可用于判断卟啉分子环中是否存在中心金属离子；卟啉的红外光谱主要用特征吸收峰进行判定卟啉分子中特定的化学结构，卟啉环上的取代基结构和卟啉分子是否金属化。MS、NMR、UV-Vis和FTIR法在定性分析高纯度金属卟啉化合物中具有一定优势，但是，在实际的应用工作中，特别是对于参与了催化反应的金属卟啉复杂样品，难以直接准确鉴别金属卟啉结构的稳定性，须预先借助其他手段对金属卟啉样品进行分离与纯化处理，限制了这些先进分析技术的应用范围。高效液相色谱与二极管阵列检测器(PDA检测器)的联用不仅可以利用色谱柱对金属卟啉样品进行快速分离，而且可以通过PDA检测器检测各色谱峰的最大吸收波长及其在特定波长下的保留时间和响应强度，从而可快速、准确、有效地实现金属卟啉样品的定性和定量分析。现有专利和文献报道中，高效液相色谱法主要是针对生物样品和地质石油中含有亲水性结构的金属卟啉样品进行检测分析，难以应用于烷烃氧化和烯烃环氧化工艺研究中非水溶性金属卟啉仿生催化剂的检测。因而，建立一种快速分析非水溶性金属卟啉的高效液相色谱方法，可为烷烃氧化和烯烃环氧化工艺研究中金属卟啉仿生催化剂的筛选与性能评价提供重要的参考依据。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术中卟啉仿生催化剂分析的上述技术问题，提供一种准确、高效、灵敏度高、重现性好和操作简单的快速分析非水溶性金属卟啉的高效液相色谱方法。为了解决上述技术问题，本专利技术采用如下技术方案：一种快速分析非水溶性金属卟啉的高效液相色谱方法，包括如下步骤：(1)配制金属卟啉标准样品溶液准确称取金属卟啉标准样品于样品瓶中，加入第一有机溶剂，振荡5～10min，用第二有机溶剂定容，得50.0～100.0μg/mL金属卟啉标准样品储备液，准确移取适量体积上述金属卟啉标准样品储备液，用第二有机溶剂稀释定容，配制浓度为0.1～10.0μg/mL的金属卟啉标准样品溶液；(2)设置高效液相色谱分析条件采用C18反相色谱柱，柱温为25～45℃，以乙腈和甲醇的混合溶剂为流动相，所述甲醇中含有体积分数为0.02～0.12％的甲酸，流速为0.5～1.5mL/min，采用二极管阵列检测器(PDA检测器)或可变波长检测器(VWD检测器)，所述二极管阵列检测器波长扫描范围为380～600nm，可变波长检测器的检测波长为400～424nm，分析时间为10～15min；(3)制作金属卟啉标准曲线采用步骤(2)中的分析条件，对步骤(1)配制得到的金属卟啉标准样品溶液进行逐一分析，得到金属卟啉标准样品的色谱图，以其质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，制作标准曲线，确定标准曲线回归方程，并测定线性相关系数；(4)分析待测金属卟啉样品(a)待测金属卟啉样品试液的配制：准确称取待测金属卟啉样品于样品瓶中，加入第一有机溶剂，振荡5～10min，用第二有机溶剂将其稀释定容得到浓度为2.0～10.0μg/mL的待测金属卟啉样品试液；(b)定性分析：采用步骤(2)中的色谱条件，分别检测金属卟啉标准样品溶液和待测金属卟啉样品试液的色谱峰相对保留时间与峰形；(c)定量分析：采用步骤(2)中的色谱条件，得到待测金属卟啉样品的色谱图，选用外标法定量分析待测金属卟啉样品的含量。作为本专利技术的优选实施方案，所述的金属卟啉优选为锌卟啉或钴卟啉或两者的混合物。作为本专利技术的优选实施方案，所述的锌卟啉优选为原卟啉锌(PPZn)或八乙基卟啉锌(OEPZn)或两者的混合物，钴卟啉优选为原卟啉氯化钴(PPCoCl2)。作为本专利技术的优选实施方案，所述的第一有机溶剂优选为二甲基甲酰胺(DMF)或氯仿或两者的混合物。作为本专利技术的优选实施方案，所述的第二有机溶剂优选为甲醇或乙腈或两者的混合物。作为本专利技术的优选实施方案，步骤(2)中所述的乙腈和甲醇的体积比优选为1：1.5～9。作为本专利技术的优选实施方案，所述锌卟啉样品流动相中乙腈和甲醇的体积优选为1：2.3～9，甲醇中含甲酸的体积分数为0.02～0.08％；所述钴卟啉样品流动相中乙腈和甲醇的体积比优选为1：1.5～4，甲醇中含甲酸的体积分数优选为0.05～0.12％。由于采用上述技术方案，本专利技术具有如下有益效果：1、准确、高效、灵敏度高、重现性好和操作简单，分析时间小于15min，可为烷烃氧化和烯烃环氧化工艺研究中金属卟啉仿生催化剂的筛选与性能评价提供重要的参考依据，具有重要的实用价值；2、仪器设备成本低、普及率高，有利于方法的推广与应用。附图说明图1为本专利技术的实施例1的同时分析PPZn和OEPZn的标准曲线；图2为本专利技术的实施例1的同时分析待测样品中PPZn和OEPZn的色谱图；图3为本专利技术的实施例4的分析PPCoCl2标准样品的色谱图。具体实施方式为了使本领域的技术人员更好的理解本专利技术的技术方案，下面结合具体实施例及附图对本专利技术所述方案作进一步的详细说明。实施例1高效液相色谱法快速定量分析原卟啉锌(PPZn)和八乙基卟啉锌(OEPZn)1.1标准样品溶液的配制分别准确称取10.0mgPPZn和OEPZn标准品于样品瓶中，加入1.0mLDMF，充分振荡10min，用色谱级甲醇定容至100mL，配制成浓度均为100.0μg/mL的PPZn和OEPZn混合标准样品储备液,然后逐级稀释成浓度分别为10.0、5.0、1.0、0.5、0.1μg/mL的PPZn和OEPZn标准样品混合溶液，采用0.22μm有机相一次性针头式过滤器过滤标准样品溶液，待测。1.2仪器设备和色谱分析条件的选择色谱仪：Agilent1260型液相色谱仪；色谱柱：AgilentEcilipseXDB-C18柱；柱长250mm，内径4.6mm，填料粒径5μm；柱温：40℃；流动相：乙腈和甲醇(含体积百分比为0.05％的甲酸)体积比为20:80；流速：1.0mL/min；检测器：VWD检测器，检测波长403n本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速分析非水溶性金属卟啉的高效液相色谱方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)配制金属卟啉标准样品溶液准确称取金属卟啉标准样品于样品瓶中，加入第一有机溶剂，振荡5～10min，用第二有机溶剂定容，得50.0～100.0μg/mL金属卟啉标准样品储备液，准确移取适量体积上述金属卟啉标准样品储备液，用第二有机溶剂稀释定容，配制浓度为0.1～10.0μg/mL的金属卟啉标准样品溶液；(2)设置高效液相色谱分析条件采用C18反相色谱柱，柱温为25～45℃，以乙腈和甲醇的混合溶剂为流动相，所述甲醇中含有体积分数为0.02～0.12％的甲酸，流速为0.5～1.5mL/min，采用二极管阵列检测器或可变波长检测器，所述二极管阵列检测器波长扫描范围为380～600nm，可变波长检测器的检测波长为400～424nm，分析时间为10～15min；(3)制作金属卟啉标准曲线采用步骤(2)中的分析条件，对步骤(1)配制得到的金属卟啉标准样品溶液进行逐一分析，得到金属卟啉标准样品的色谱图，以其质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，制作标准曲线，确定标准曲线回归方程，并测定线性相关系数；(4)分析待测金属卟啉样品(a)待测金属卟啉样品试液的配制：准确称取待测金属卟啉样品于样品瓶中，加入第一有机溶剂，振荡5～10min，用第二有机溶剂将其稀释定容得到浓度为2.0～10.0μg/mL的待测金属卟啉样品试液；(b)定性分析：采用步骤(2)中的色谱条件，分别检测金属卟啉标准样品溶液和待测金属卟啉样品试液的色谱峰相对保留时间与峰形；(c)定量分析：采用步骤(2)中的色谱条件，得到待测金属卟啉样品的色谱图，选用外标法定量分析待测金属卟啉样品的含量。...

【技术特征摘要】
1.一种快速分析非水溶性金属卟啉的高效液相色谱方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)配制金属卟啉标准样品溶液准确称取金属卟啉标准样品于样品瓶中，加入第一有机溶剂，振荡5～10min，用第二有机溶剂定容，得50.0～100.0μg/mL金属卟啉标准样品储备液，准确移取适量体积上述金属卟啉标准样品储备液，用第二有机溶剂稀释定容，配制浓度为0.1～10.0μg/mL的金属卟啉标准样品溶液；(2)设置高效液相色谱分析条件采用C18反相色谱柱，柱温为25～45℃，以乙腈和甲醇的混合溶剂为流动相，所述甲醇中含有体积分数为0.02～0.12％的甲酸，流速为0.5～1.5mL/min，采用二极管阵列检测器或可变波长检测器，所述二极管阵列检测器波长扫描范围为380～600nm，可变波长检测器的检测波长为400～424nm，分析时间为10～15min；(3)制作金属卟啉标准曲线采用步骤(2)中的分析条件，对步骤(1)配制得到的金属卟啉标准样品溶液进行逐一分析，得到金属卟啉标准样品的色谱图，以其质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，制作标准曲线，确定标准曲线回归方程，并测定线性相关系数；(4)分析待测金属卟啉样品(a)待测金属卟啉样品试液的配制：准确称取待测金属卟啉样品于样品瓶中，加入第一有机溶剂，振荡5～10min，用第二有机溶剂将其稀释定容得到浓度为2.0～10.0μg/mL的待测金属卟啉样品试液；...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭慧，钟军，张庆华，叶林，
申请(专利权)人：衢州氟硅技术研究院，
类型：发明
国别省市：浙江,33