雌激素受体ER-α36抗原多肽及其单克隆抗体制造技术

本发明专利技术提供了雌激素受体ER‑α36的一种新的鼠源单克隆抗体，其是以ER‑α36受体的高度保守蛋白序列为基础，设计合成4种不同多肽，与载体蛋白偶联作为免疫原，将上述4种免疫原混合后免疫小鼠，制备筛选得到一株杂交瘤细胞株4E11。该细胞株分泌的单克隆抗体能够特异性识别ER‑α36蛋白，为开发ER‑α36免疫诊断产品提供了新的候选抗体。

Estrogen receptor ER- alpha 36 antigen polypeptides and monoclonal antibodies

The invention provides a new mouse derived monoclonal antibody of the estrogen receptor ER alpha 36, which is based on the highly conservative protein sequence of the ER receptor alpha 36 receptor, designed and synthesized 4 different peptides, coupled with the carrier protein as the immunogen, and mixed the above 4 immunogens to immunize mice to obtain a hybridoma cell. Strain 4E11. The monoclonal antibody secreted by the cell line specifically recognizes ER alpha 36 protein, and provides a new candidate antibody for the development of immunodiagnostic products of ER alpha 36.

【技术实现步骤摘要】
雌激素受体ER-α36抗原多肽及其单克隆抗体
本专利技术涉及细胞工程
，具体涉及4种ER-α36特异性抗原多肽和1种特异抗ER-α36蛋白的单克隆抗体。
技术介绍
雌激素受体ER-α36是新发现的一种雌激素受体亚型主要表达在细胞膜上，介导非基因组雌激素信号通路，并且能抑制传统的雌激素信号通路，在细胞的正常生理和疾病发生及发展过程中起到至关重要的作用。其表达水平与癌症的一些生物学指标如淋巴结转移、肿瘤细胞分化和肿瘤分期及分级有着密切联系。在临床回顾性研究中发现，709例乳腺癌样本中，约70％都检测到ER-α36的表达，更重要的是，在因缺少ER-α66表达而归属于雌激素受体阴性的乳腺癌样本中，有41％检测出ER-α36的表达。此外，ER-α36在白血病、子宫内膜癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌和结肠癌中都有所表达。因此，ER-α36及其介导的信号通路在这些癌症，尤其是乳腺癌的发生和发展过程中，可能发挥着重要作用。显示出开发针对ER-α36的检测试剂和抗肿瘤药物的迫切性和重要性。ER-α36主要表达在细胞膜上和细胞质中，不同于ER-α66主要存在于细胞核中。这种表达模式将有利于针对ER-α本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种特异性地识别ER‑α36蛋白的单克隆抗体，其轻链可变区的氨基酸序列如SEQ NO.9所示，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ NO.10所示。

【技术特征摘要】
1.一种特异性地识别ER-α36蛋白的单克隆抗体，其轻链可变区的氨基酸序列如SEQNO.9所示，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQNO.10所示。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其是以ER-α36特异的高度保守蛋白序列为基础，设计合成4种不同抗原多肽，与载体蛋白偶联作为免疫原，将上述4种免疫原混合后免疫小鼠制备获得，所述多肽选自ER-α36特异的氨基酸序列SEQNO.13。3.根据权利要求2所述的单克隆抗体，所述载体蛋白为KLH。4.根据权利要求2所述的单克隆抗体，所述4种抗原多肽为：SEQNO.4，SEQNO.6，SEQNO.7，SEQNO.8。5.根据权利要求1所述的单克隆抗体，重链恒定区选自鼠的IgG2b。6.根据权利要求1所述的单克隆抗体，轻链恒定区选自鼠Kappa链。7.权利要求1-6任一权利要求所述的ER-α36蛋白的单克隆抗体的制备方法，包括步骤：(1)ER-α36抗原多肽化学合成，与KLH(keyholelimpethemocyanin，血蓝蛋白)偶联后混合免疫BALB/c小鼠；(2)杂交瘤细胞株制备与筛选：取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：林庆聪，张靖，王兆一，孟坤，
申请(专利权)人：青岛珅奥基生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37