含有靶蛋白的外来体的制备方法及利用由所述制备方法制备的外来体来将靶蛋白传递至细胞质的方法技术

本发明专利技术涉及大量制备含有靶蛋白的外来体的方法，能够用于制备所述外来体的外来体制备用载体，由所述方法制备的含有靶蛋白的外来体及利用制得的外来体将靶蛋白传递至细胞质的方法。利用本发明专利技术提供的制备含有靶蛋白的外来体的方法，能够以高收率制备含有靶蛋白的外来体，从而能够在利用外来体来治疗疾病方面广泛地使用。

Preparation method of foreign body containing target protein and method for transferring target protein to cytoplasm by extraneous body prepared by said preparation method

The present invention relates to a large number of methods for preparing foreign bodies containing target proteins, which can be used to prepare foreign institutional backup carriers of the foreign bodies, foreign bodies containing target proteins prepared by the method and a method to transfer the target proteins to the cytoplasm by using the obtained foreign bodies. Using the method provided by the present invention to prepare foreign bodies containing target proteins, foreign bodies containing target proteins can be prepared in high yield, so that they can be widely used in the treatment of diseases by using foreign bodies.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】含有靶蛋白的外来体的制备方法及利用由所述制备方法制备的外来体来将靶蛋白传递至细胞质的方法
本专利技术涉及利用光特异性结合蛋白来制备含有靶蛋白的外来体的方法，以及利用由所述制备方法制备的外来体将靶蛋白传递至细胞质的方法。
技术介绍
人体大致由200多种的100万亿个细胞组成，生理活性通过细胞内的各种蛋白质的作用来调节，以维持生命。细胞被由磷脂组成的双层膜结构的细胞膜所包围，细胞膜阻止异物进入细胞。迄今为止开发的蛋白质治疗剂仍不能透过细胞膜进入细胞质内，而是作用于细胞外部，或者作用于细胞膜上的受体(receptor)以将信号传递至细胞内，从而显示出生理效果。细胞质中存在大量的蛋白质，它们通过相互作用来调节生理活性，如果能够将蛋白质治疗剂直接放入细胞内，即放入细胞质内，则细胞活性将能够得到更有效的控制。最近，正在积极展开对于使靶蛋白通过细胞膜而直接流入细胞内的方法的研究。当制备通过细胞膜的作为肽的细胞膜通过区域(蛋白转导离子区域(ProteinTransductionDomains，PTDs))和靶蛋白的重组蛋白(recombinantprotein)而进行施用时，则可以通过细胞膜进入到细本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大量制备靶蛋白附着在外来体膜上的外来体的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：a)向外来体生产细胞内导入编码融合蛋白的多核苷酸，从而获得转化细胞，所述融合蛋白为外来体特异性标记物和靶蛋白结合的形态；b)培养所述转化细胞。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.05.04 KR 10-2015-0062604;2015.08.27 KR 10-2011.一种大量制备靶蛋白附着在外来体膜上的外来体的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：a)向外来体生产细胞内导入编码融合蛋白的多核苷酸，从而获得转化细胞，所述融合蛋白为外来体特异性标记物和靶蛋白结合的形态；b)培养所述转化细胞。2.一种大量制备靶蛋白从外来体膜分离出来从而存在于外来体内部的外来体的方法，所述方法包括权利要求1。3.根据权利要求1或2所述的大量制备外来体的方法，其特征在于，所述外来体生产细胞选自B-淋巴细胞、T-淋巴细胞、树突细胞、巨核细胞、巨噬细胞、干细胞及肿瘤细胞中的任意一种以上。4.根据权利要求1所述的大量制备外来体的方法，其特征在于，所述外来体特异性标记物为CD9、CD63、CD81或CD82。5.一种大量制备包含靶蛋白的外来体的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：a)向外来体生产细胞内导入编码融合蛋白(第一融合蛋白)的多核苷酸，以及编码融合蛋白(第二融合蛋白)的多核苷酸；所述第一融合蛋白为外来体特异性标记物和第一光特异性结合蛋白结合的形态；所述第二融合蛋白为第二光特异性结合蛋白和靶蛋白结合的形态，所述第二光特异性结合蛋白能够与所述第一光特异性结合蛋白进行结合；b)向所述外来体生产细胞照射能够诱发所述第一光特异性结合蛋白和所述第二光特异性结合蛋白进行结合的光。c)在所述外来体生产细胞生产外来体之后，停止照射所述光。6.根据权利要求5所述的大量制备外来体的方法，其特征在于，所述第一光特异性结合蛋白选自CIB、CIBN、PhyB、PIF、FKF1、GIGANTEA、CRY及PHR中的任意一种以上。7.根据权利要求5所述的大量制...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔哲熙，任男彬，许元道，柳承旭，崔皓竣，崔暻善，
申请(专利权)人：赛尔莱克斯生命科学公司，
类型：发明
国别省市：韩国,KR