蛋白质和多肽的制备制造技术

一种制备期望的非拖丝蛋白的蛋白质或多肽的方法包含以下步骤：在合适的宿主中表达融合蛋白，获得包含该融合蛋白的混合物，并任选地分离该融合蛋白。该融合蛋白包含衍生自蜘蛛丝蛋白的N端(NT)片段的至少一个溶解度增强部分。其还包含是期望的非拖丝蛋白的蛋白质或多肽的至少一个部分。每个溶解度增强部分与所述期望的蛋白质或多肽部分直接或间接连接。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及制备蛋白质和多肽，且更具体地涉及制备蜘蛛丝蛋白(拖丝蛋白)和其他非拖丝蛋白的蛋白质和多肽的领域。本专利技术提供了制备期望的蛋白质的方法，该期望的蛋白质可以是拖丝蛋白的蛋白质/多肽或非拖丝蛋白的蛋白质/多肽。还提供了用于制备期望的蛋白质和多肽的新型融合蛋白中间体以及编码这些中间体的多核酸(polynucleic acid)分子。
技术介绍
由DNA制备蛋白质和多肽可在多种宿主中实现，但常见的问题是不溶性蛋白质/ 多肽聚集体的形成。这可严重地妨碍或甚至阻止功能性蛋白质/多肽的产生。针对该问题的一个解决方案是将期望的蛋白质或多肽与提供所需要的溶解度的蛋白质或多肽表达成融合蛋白。该融合蛋白可被裂解，从而分离期望的蛋白质。对于低溶解度蛋白质和多肽例如膜相关蛋白质和多肽，该问题通常加重。例如，肺表面活性蛋白C(SP-C ;表6)是由肺泡II型细胞产生的跨膜蛋白并且是防止肺泡在呼气结束时萎陷所需要的表面活性物质的成分。新生儿经常因表面活性物质的量不足而患呼吸窘迫。如今，用从动物的肺部提取的表面活性物质制剂治疗该病症。SP-C-33是SP-C的变体，其中跨膜螺旋中的残基(通常主要是缬本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.03.18 EP 10156927.5;2010.04.21 SE PCT/SE2010/1.一种融合蛋白，包含 (i)衍生自蜘蛛丝蛋白的N端(NT)片段的至少一个溶解度增强部分；和 ( )是期望的非拖丝蛋白的蛋白质或多肽的至少一个部分， 其中每个溶解度增强部分与所述期望的蛋白质或多肽部分直接或间接连接。2.根据权利要求I所述的融合蛋白，其中每个溶解度增强部分与SEQID NO 6具有至少80%的同一性或与SEQ ID NO 8具有至少50%的同一性。3.根据任一项前述权利要求所述的融合蛋白，其中每个溶解度增强部分包含100至160个氨基酸残基。4.根据任一项前述权利要求所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含至少两个溶解度 增强部分，所述溶解度增强部分的每一个衍生自蜘蛛丝蛋白的N端(NT)片段。5.根据权利要求4所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含至少两个连续的溶解度增强部分，所述溶解度增强部分的每一个衍生自蜘蛛丝蛋白的N端(NT)片段。6.根据任一项前述权利要求所述的融合蛋白，其中至少一个溶解度增强部分与至少一个期望的蛋白质或多肽部分的氨基末端或羧基末端直接或间接连接。7.根据权利要求6所述的融合蛋白，其中至少一个溶解度增强部分构成所述融合蛋白的氨基末端和/或羧基末端。8.根据任一项前述权利要求所述的融合蛋白，还包含 (iii)设置在至少一个期望的蛋白质或多肽部分与至少一个溶解度增强部分之间的至少一个裂解位点。9.根据任一项前述权利要求所述的融合蛋白，其中所述期望的蛋白质或多肽与SEQIDNO 6-10中的任何一个具有小于30%的同一性。10.根据权利要求9所述的融合蛋白，其中所述期望的蛋白质或多肽衍生自海绵动物、栉水母、水母、珊瑚、海葵、扁虫、轮虫、蛔虫、纽虫、蛤、蜗牛、章鱼、节肢虫、甲壳动物、昆虫、苔藓动物、腕足动物、帚虫类、海星、海胆、被囊动物、文昌鱼、包括人类的脊椎动物、植物、真菌、酵母、细菌、古细菌或病毒或是人工蛋白质或多肽。11.根据权利要求10所述的融合蛋白，其中所述期望的蛋白质或多肽衍生自软体动物、昆虫、包括人类的脊椎动物、植物、真菌、酵母、细菌、古细菌或病毒或是人工蛋白质或多肽。12.根据权利要求11所述的融合蛋白，其中所述期望的蛋白质或多肽衍生自包括人类的脊椎动物、植物、真菌、酵母、细菌、古细菌或病毒或是人工蛋白质或多肽。13.根据权利要求9-12中任一项所述的融合蛋白，其中所述期望的蛋白质或多肽选自由淀粉样形态的蛋白质和多肽、含二硫键的蛋白质和多肽、载脂蛋白、膜蛋白和多肽、蛋白质和多肽药物及药靶、易于聚集的蛋白质和多肽及蛋白酶组成的组。14.根据权利要求13所述的融合蛋白，其中所述期望的蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：扬·约翰松，安娜·里辛，麦·赫德哈马尔，谢斯廷·努德林，
申请(专利权)人：思百博技术股份公司，
类型：
国别省市：