【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物工程领域，特别涉及重组蛋白的异源表达。
技术介绍
通过异源基因在宿主细胞，包括细菌、酵母菌、哺乳动物细胞以及昆虫细胞等中进行表达，是目前生产蛋白和/或多肽产品最为常用的方法。使用异源表达系统获得具有生物学活性的均一蛋白，在功能基因组学的研究中也广泛应用。大肠杆菌等原核系统由于菌体细胞简单，表达蛋白成本低廉，得到了更广泛的应用。然而，不同的异源基因，在同样的宿主细胞，尽管使用相同的表达载体，获得同样的转录和翻译信号，但重组蛋白表达水平可以有很大差别。某些重组蛋白在宿主细胞中不能高效表达有很多原因，包括宿主细胞的密码子偏好引起异源基因转录和翻译水平低下；重组蛋白由于自身不稳定性，易于被宿主蛋白酶切降解；错误折叠的重组蛋白对宿主细胞 酶切降解的易感性提高等等。为提高重组蛋白的表达水平，可以采取一些策略。例如，在蛋白酶缺失的大肠杆菌菌株中进行表达，以增加重组蛋白的稳定性(Gottesman et al. J Bacteriol 1978. 133 844-51);将宿主蛋白片段与目标重组多肽/蛋白融合，也可以增加外源蛋白在宿主细胞中的稳定性(Itaku...
【技术保护点】
一个在宿主细胞中提高重组目的蛋白表达水平的方法，包括1)将编码一种原核来源的泛素样分子，或其结构上的类似物或衍生物、或其部分片段的核苷酸序列，连接到所述目的蛋白的核苷酸序列上，由此构建出编码一个融合蛋白的核酸序列；2)将该核酸序列连接在合适的表达载体内；3)将含所述核酸序列的表达载体转入所述的宿主细胞，通过所述的融合蛋白中出现所述的原核来源的泛素样分子，或其结构上的类似物或衍生物、或其部分片段，来提高所述的目的蛋白在所述宿主细胞中的表达水平。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王楠，许建，葛莹，
申请(专利权)人：威志兰斯医学科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：
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