具有可调的亲和力的免疫调节蛋白制造技术

本文提供了免疫调节蛋白和编码这类蛋白质的核酸。免疫调节蛋白对多种免疫性和肿瘤性病症提供治疗效用。本文提供了制作和使用这类蛋白质的组合物和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有可调的亲和力的免疫调节蛋白相关申请的交叉引用本申请要求2015年4月17日提交的题为“具有可调的亲和力的免疫调节蛋白”的美国临时申请号62/149,437，以及2015年9月14日提交的题为“具有可调的亲和力的免疫调节蛋白”的美国临时申请号62/218,534的优先权，其各自内容通过引用其全文纳入本文。通过引用纳入序列表本申请与电子格式的序列表一同提交。所提供的序列表名称为761612000140SEQLIST.TXT，创建于2016年4月15日，其文件大小为377kb。序列表的电子格式的信息通过引用其全文纳入本文。
本专利技术涉及用于癌症和免疫性疾病治疗中调整免疫应答的治疗性蛋白质。
技术介绍
通过对发生在由抗原呈递细胞(APC)或靶细胞和淋巴细胞之间形成的免疫突触(IS)中的过程进行干扰来调整免疫应答受到越来越多的医学关注。当前，用于增强或抑制免疫应答的生物制剂通常限于免疫球蛋白(例如，抗-PD-1mAb)或可溶性受体(例如，Fc-CTLA4)。可溶性受体具有许多缺陷。尽管其有助于拮抗蛋白质之间的相互作用，但是可溶性受体常常缺少激动这种相互作用的能力。抗体经证实在这一方面受到本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种免疫调节蛋白，其含有至少一个非免疫球蛋白亲和力修饰的免疫球蛋白超家族(IgSF)结构域，所述免疫球蛋白超家族结构域含有在野生型IgSF结构域中的一个或多个氨基酸取代，其中：所述至少一个亲和力修饰的IgSF结构域相较于所述野生型IgSF结构域具有对至少两个关联结合伴侣增强的结合；并且所述至少一个亲和力修饰的IgSF结构域特异性地非竞争性结合所述至少两个关联结合伴侣。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.04.17 US 62/149,437;2015.09.14 US 62/218,5341.一种免疫调节蛋白，其含有至少一个非免疫球蛋白亲和力修饰的免疫球蛋白超家族(IgSF)结构域，所述免疫球蛋白超家族结构域含有在野生型IgSF结构域中的一个或多个氨基酸取代，其中：所述至少一个亲和力修饰的IgSF结构域相较于所述野生型IgSF结构域具有对至少两个关联结合伴侣增强的结合；并且所述至少一个亲和力修饰的IgSF结构域特异性地非竞争性结合所述至少两个关联结合伴侣。2.如权利要求1所述的免疫调节蛋白，其中所述至少两个关联结合伴侣是表达在哺乳动物细胞表面上的细胞表面分子。3.如权利要求2所述的免疫调节蛋白，其中所述细胞表面分子以顺式构型或反式构型表达。4.如权利要求2或权利要求3所述的免疫调节蛋白，其中所述哺乳动物细胞是形成免疫突触(IS)的两个哺乳动物细胞中的一个，并且所述细胞表面分子各自表达在形成所述IS的所述两个哺乳动物细胞中至少其一上。5.如权利要求2至4中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述哺乳动物细胞中至少其一是淋巴细胞。6.如权利要求5所述的免疫调节蛋白，其中所述淋巴细胞是NK细胞或T细胞。7.如权利要求5至6中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述亲和力修饰的IgSF结构域的结合调整所述淋巴细胞的免疫活性。8.如权利要求7所述的免疫调节蛋白，其中所述免疫调节蛋白相较于含有所述野生型IgSF结构域的所述野生型蛋白质能够产生增强的免疫活性。9.如权利要求7所述的免疫调节蛋白，其中所述免疫调节蛋白相较于含有所述野生型IgSF结构域的所述野生型蛋白质能够产生减弱的免疫活性。10.如权利要求2至9中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述哺乳动物细胞中至少其一是肿瘤细胞。11.如权利要求2至10中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述哺乳动物细胞是人细胞。12.如权利要求4至11中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述亲和力修饰的IgSF结构域能够特异性地结合形成IS的两个哺乳动物细胞。13.如权利要求1至12中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述野生型IgSF结构域来自IgSF家族成员，所述IgSF家族成员选自家族：信号调节蛋白(SIRP)家族、表达在骨髓细胞样上的触发受体(TREML)家族、癌胚抗原相关细胞粘附分子(CEACAM)家族、唾液酸结合Ig样凝集素(SIGLEC)家族、嗜乳脂蛋白家族、B7家族、CD28家族、包含V-集和免疫球蛋白结构域(VSIG)家族、V-集跨膜结构域家族(VSTM)家族、主要组织相容性复合物(MHC)家族、信号传导淋巴细胞活化分子(SLAM)家族、白细胞免疫球蛋白样受体(LIR)、连接蛋白(Nec)家族、连接蛋白样(NECL)家族、脊髓灰质炎病毒受体相关(PVR)家族、天然细胞毒性触发受体(NCR)家族、T细胞免疫球蛋白和粘蛋白(TIM)家族或杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)家族。14.如权利要求1至13中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述野生型IgSF结构域来自IgSF成员，其选自：CD80、CD86、PD-L1、PD-L2、ICOS配体、B7-H3、B7-H4、CD28、CTLA4、PD-1、ICOS、BTLA、CD4、CD8-α、CD8-β、LAG3、TIM-3、CEACAM1、TIGIT、PVR、PVRL2、CD226、CD2、CD160、CD200、CD200R或Nkp30。15.如权利要求1至14中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述野生型IgSF结构域是人IgSF成员。16.如权利要求1至15中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述野生型IgSF结构域是IgV结构域、IgC1结构域、IgC2结构域或其特异性结合片段。17.如权利要求1至16中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述亲和力修饰的IgSF结构域是亲和力修饰的IgV结构域、亲和力修饰的IgC1结构域或亲和力修饰的IgC2结构域或其含有一个或多个氨基酸取代的特异性结合片段。18.如权利要求1至17中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述免疫调节蛋白含有至少两个非免疫球蛋白亲和力修饰的IgSF结构域。19.如权利要求18所述的免疫调节蛋白，其中所述至少两个非免疫球蛋白亲和力修饰的IgSF结构域各自含有在相同野生型IgSF结构域中的一个或多个不同的氨基酸取代。20.如权利要求19所述的免疫调节蛋白，其中所述至少两个非免疫球蛋白亲和力修饰的IgSF结构域各自含有在不同野生型IgSF结构域中的一个或多个氨基酸取代。21.如权利要求20所述的免疫调节蛋白，其中所述不同野生型IgSF结构域来自不同的IgSF家族成员。22.如权利要求1至17中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述免疫调节蛋白只含有一个非免疫球蛋白亲和力修饰的IgSF结构域。23.如权利要求1至22中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述亲和力修饰的IgSF含有与野生型IgSF结构域或其特异性结合片段至少85％的序列同一性，所述特异性结合片段包含SEQIDNO:1-27中任一项所示的氨基酸序列。24.如权利要求23所述的免疫调节蛋白，其中还含有第二亲和力修饰的IgSF，其中所述第二亲和力修饰的IgSF结构域含有与野生型IgSF结构域或其特异性结合片段至少85％的序列同一性，所述特异性结合片段包含SEQIDNO:1-27中任一项所示的氨基酸序列。25.如权利要求1至24中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述野生型IgSF结构域是B7家族的成员。26.如权利要求1至25中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述野生型IgSF结构域是CD80、CD86或ICOSLG的结构域。27.如权利要求1至26中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述野生型IgSF结构域是CD80的结构域。28.一种免疫调节蛋白，其含有至少一个亲和力修饰的CD80免疫球蛋白超家族(IgSF)结构域，所述CD80免疫球蛋白超家族结构域含有在野生型CD80IgSF结构域中的一个或多个氨基酸取代，其中所述至少一个亲和力修饰的CD80IgSF结构域相较于野生型CD80IgSF结构域具有对至少两个关联结合伴侣增强的结合。29.如权利要求27或权利要求28所述的免疫调节蛋白，其中所述关联结合伴侣是CD28和PD-L1。30.如权利要求27至29中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述野生型IgSF结构域是IgV结构域和/或所述亲和力修饰的CD80结构域是亲和力修饰的IgV结构域。31.如权利要求27至30中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述亲和力修饰的结构域含有与野生型CD80结构域或其特异性结合片段至少85％的序列同一性，所述特异性结合片段包含SEQIDNO:1中所示的氨基酸序列。32.如权利要求1至31中任一所述免疫调节蛋白，其中所述至少一个亲和力修饰的IgSF结构域含有在野生型IgSF结构域中的至少1个且不超过20个氨基酸取代。33.如权利要求1至32中任一所述免疫调节蛋白，其中所述至少一个亲和力修饰的IgSF结构域含有在野生型IgSF结构域中的至少1个且不超过10个氨基酸取代。34.如权利要求1至33中任一所述免疫调节蛋白，其中所述至少一个亲和力修饰的IgSF结构域含有在野生型IgSF结构域中的至少1个且不超过5个氨基酸取代。35.如权利要求1至34中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述亲和力修饰的IgSF结构域所具有的结合亲和力是其野生型IgSF结构域与所述至少两个关联结合伴侣各自的结合亲和力的至少120％。36.如权利要求1至35中任一项所述的免疫调节蛋白，还包含非亲和力修饰的IgSF结构域。37.如权利要求1至36中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述免疫调节蛋白是可溶的。38.如权利要求1至37中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述免疫调节蛋白缺少跨膜结构域或细胞质结构域。39.如权利要求1至38中任一项所述的免疫调节蛋白，其只含有细胞外结构域(ECD)或其含有亲和力修饰的IgSF结构域的特异性结合片段。40.如权利要求1至39中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述免疫调节蛋白是糖基化或PEG化的。41.如权利要求1至40中任一项所述的免疫调节蛋白，其连接多聚化结构域。42.如权利要求1至41中任一项所述的免疫调节蛋白，其连接Fc结构域或其效应功能降低的变体。43.如权利要求42所述的免疫调节蛋白，其中所述Fc结构域是IgG1结构域、IgG2结构域或其效应功能降低的变体。44.如权利要求39至41中任一项所述的免疫调节蛋白，其中：所述Fc结构域是哺乳动物的、可以是人的；或所述变体Fc结构域相较于未修饰的哺乳动物的、可以是人的Fc结构域含有一个或多个氨基酸修饰。45.如权利要求42至44中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述Fc结构域或其变体含有SEQIDNO:226或SEQIDNO:227所示的氨基酸序列，或与SEQIDNO:226或SEQIDNO:227至少85％序列同一性的氨基酸序列。46.如权利要求38至41中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述免疫调节蛋白通过接头间接地连接。47.如权利要求41至46中任一项所述的免疫调节蛋白，其是二聚体。48.如权利要求1至47中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述免疫调节蛋白附着于脂质体膜。49.一种免疫调节蛋白，其含有至少两个非免疫球蛋白免疫球蛋白超家族(IgSF)结构域，其中：非免疫球蛋白修饰的IgSF结构域中至少其一是亲和力修饰的，以显示与其关联结合伴侣改变的结合；并且所述至少两个非免疫球蛋白修饰的IgSF结构域各自独立地特异性地结合至少一个不同的关联结合伴侣。50.如权利要求49所述的免疫调节蛋白，其中所述至少两个非免疫球蛋白IgSF结构域各自是亲和力修饰的IgSF结构域，其中第一非免疫球蛋白修饰的IgSF结构域含有在第一野生型IgSF结构域中的一个或多个氨基酸取代，并且第二非免疫球蛋白修饰的IgSF结构域含有在第二野生型IgSF结构域中的一个或多个氨基酸取代。51.如权利要求50所述的免疫调节蛋白，其中：所述第一非免疫球蛋白修饰的IgSF结构域相较于所述第一野生型IgSF结构域与其关联结合伴侣中至少其一显示出改变的结合；并且所述第二非免疫球蛋白修饰的IgSF结构域相较于所述第二野生型IgSF结构域与其关联结合伴侣中的至少其一显示出改变的结合。52.如权利要求49至51中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述不同关联结合伴侣是表达在哺乳动物细胞表面上的细胞表面分子。53.如权利要求52所述的免疫调节蛋白，其中所述不同细胞表面分子以顺式构型或反式构型表达。54.如权利要求52或权利要求53所述的免疫调节蛋白，其中所述哺乳动物细胞是形成免疫突触(IS)的两个哺乳动物细胞中的一个，并且所述不同细胞表面分子表达在形成所述IS的所述两个哺乳动物细胞中至少其一上。55.如权利要求52至54中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述哺乳动物细胞中至少其一是淋巴细胞。56.如权利要求55所述的免疫调节蛋白，其中所述淋巴细胞是NK细胞或T细胞。57.如权利要求55或权利要求56所述的免疫调节蛋白，其中所述免疫调节蛋白与细胞的结合调整所述淋巴细胞的免疫活性。58.如权利要求57所述的免疫调节蛋白，其中所述免疫调节蛋白相较于含有所述野生型IgSF结构域的所述野生型蛋白质能够产生增强的免疫活性。59.如权利要求57所述的免疫调节蛋白，其中所述免疫调节蛋白相较于含有所述野生型IgSF结构域的所述野生型蛋白质能够产生减弱的免疫活性。60.如权利要求52至59中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述哺乳动物中至少其一是肿瘤细胞。61.如权利要求52至60中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述哺乳动物细胞是人细胞。62.如权利要求54至61中任一所述的免疫调节蛋白，其中所述免疫调节蛋白能够特异性地结合形成IS的两个哺乳动物细胞。63.如权利要求49至62中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述第一和第二修饰的IgSF结构域各自含有在不同野生型IgSF结构域中的一个或多个氨基酸取代。64.如权利要求63所述的免疫调节蛋白，其中所述不同野生型IgSF结构域来自不同的IgSF家族成员。65.如权利要求49至64中任一项所述的免疫调节蛋白，所述第一和第二修饰的IgSF结构域是非野生型组合。66.如权利要求49至65中任一项所述的免疫调节蛋白，所述第一野生型IgSF结构域和第二野生型IgSF结构域各自独立地来自IgSF家族成员，所述IgSF...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·斯旺森，M·科纳克，
申请(专利权)人：高山免疫科学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US