The invention discloses a CK MB detection kit, which includes a calibration product, a cleaning solution, a substrate solution, a pretreatment solution, an enzyme conjugate working liquid and a magnetic bead binding agent. The pretreatment fluid contains imidazole, and the enzyme binding fluid contains an enzyme labeled CK MB anti body in the enzyme binding solution, and the magnetic bead binding fluid contains a working liquid. CK magnetic beads labeled with MB antibody. The above CK MB detection kit can accurately detect CK MB in whole blood samples, simplify the detection steps and improve the detection efficiency. The minimum detection limit of the kit is 1ng/ml, with a linear range of 1 to 300ng/ml. The detection sensitivity is high, the linear range is wide, and the detection result is accurate. The invention also discloses a method for the use of the CK MB detection kit, which has simple steps, effectively shortens the detection time of the CK MB, and is conducive to the rapid and sensitive detection of the CK MB.
【技术实现步骤摘要】
一种CK-MB检测试剂盒及其使用方法
本专利技术属于免疫化学检测
,具体涉及一种CK-MB检测试剂盒及其使用方法。
技术介绍
心血管疾病是危害我国人民健康和生命的重大致死性疾病,根据卫生部统计,在我国城市中,每十万人中就有二百三十五人死于心脑血管疾病,占各类疾病引起的死亡的首位,且每年以2%的速度递增。急性心肌梗死(AcuteMyocardialInfarction,AMI)则是造成心血管病人死亡的主要原因。AMI是临床上一种突发性疾病,其发病时常伴有胸痛、恶心、发热、心律失常,血清标志物升高等一系列症状,如能及早确诊并介入治疗,对挽救濒死心肌、改善预后、降低急性期病死率等具有重要意义。肌酸激酶(CreatineKinase,CK)广泛存在于各种组织中,与三磷酸腺苷(ATP)的再生有关。肌酸激酶是由M和B两种亚单位组成的二聚体,在细胞质内共有三种同工酶:即CK-MM、CK-MB和CK-BB。在细胞线粒体内还有另一种同工酶,称为CK-Mt。这几种同工酶虽然相对分子质量相同,但是免疫特性不同。肌酸激酶的同工酶在临床诊断中有十分重要的意义,在各种病变包括肌肉萎缩和心肌梗塞发生时,人的血清中肌酸激酶水平迅速提高,目前认为在心肌梗塞的诊断中测定肌酸激酶的活性比做心电图更为可靠。心肌梗死时,肌酸激酶在起病6小时内升高,24小时达高峰,3-4日内恢复正常。其中肌酸激酶的同工酶CK-MB诊断的特异性最高,临床上主要用于心肌梗死、病毒性心肌炎的辅助诊断。CK-MB测定的方法有电泳法、离子交换柱层析法、ELISA法和放射免疫法等。常规应用电泳法和ELISA法较多,但电泳 ...
【技术保护点】
一种CK‑MB检测试剂盒,其特征在于,包括:校准品、清洗液、底物溶液、预处理液、酶结合物工作液和磁珠结合物工作液;所述预处理液中含有咪唑,所述酶结合物工作液中含有酶标记的CK‑MB抗体,所述磁珠结合物工作液中含有CK‑MB抗体标记的磁珠。
【技术特征摘要】
1.一种CK-MB检测试剂盒,其特征在于,包括:校准品、清洗液、底物溶液、预处理液、酶结合物工作液和磁珠结合物工作液;所述预处理液中含有咪唑,所述酶结合物工作液中含有酶标记的CK-MB抗体,所述磁珠结合物工作液中含有CK-MB抗体标记的磁珠。2.根据权利要求1所述的CK-MB检测试剂盒,其特征在于,所述清洗液是含有SBS、Tween-20和Proclin-300的Tris缓冲液,所述底物溶液是酶促化学发光底物溶液,所述校准品是用校准品稀释液配制的CK-MB的HEPES缓冲液。3.根据权利要求1或2所述的CK-MB检测试剂盒,其特征在于,所述咪唑的浓度为0.4~1.3mM,所述酶标记的CK-MB抗体的浓度为0.5~0.8μg/ml,所述磁珠标记的CK-MB抗体的浓度为0.3~0.5mg/ml。4.根据权利要求1-3任一项所述的CK-MB检测试剂盒,其特征在于,还包括:质控品,所述质控品是用校准品稀释液配制的CK-MB的HEPES缓冲液。5.根据权利要求1-4任一项所述的CK-MB检测试剂盒,其特征在于,所述预处理液还包括:25~100mM的Tris、150mM的NaCl、1~5%的蔗糖、1~5%的甘油、0.1%的BSA、0.05~0.2%的Tween-20和0.05~0.2%的Proclin-300,所述预处理液的pH为7.0~7.5;所述酶结合物工作液还包括:20~50mM的MES、150~300mM的NaCl、1%的BSA、5%的蔗糖、5%的甘油、0.1%的Tween-20、0.02~5mM的ZnCl2、0.02~5mM的MgCl2和0.05~0.2%的Proclin300,所述酶结合物工作液的pH为6.0~6.5;所述磁珠结合物工作液还包括:20~50mM的MOPS,150~300mM的NaCl、1%的BSA、1%的蔗糖、1%的明胶、0.1%的Tween-20、1%的PVP360和0.05~0.2%的Proclin300,所述磁珠结合物工作液的pH为7.0~8.0。6.根据权利要求1-5任一项所述的CK-MB检测试剂盒,其特征在于,所述磁珠的粒径为3μm。7.根据权利要求2或4所述的CK-MB检测试剂盒,其特征在于,所述校准品稀释液包括:20~50mM的HEPES、150~300mM的NaCI、1%的牛血清、0.5~5mM的Proclin-300和1%的甘露醇,所述校准品稀释液的pH为6.5~7.5。8.根据权利要求1-7任一项所述的CK-MB检测试剂盒,其特征在于,所述酶标记的CK-MB抗体为碱性磷酸酶标记的CK-MB抗体。9.根据权利要求8所述的CK-MB检测试剂盒,其特征在于,所述碱性磷酸酶标记的CK-MB抗体通过以下方法制备:A.活化CK-MB抗体①向CK-MB抗体中加入pH8.5、100mM的三乙醇胺缓冲液,至抗体的终浓度为2~5mg/ml;②向步骤①中的抗体溶液中加入1.376mg/ml的Traut′s溶液,混匀,室温静置反应;其中,Traut′s溶液是将Traut′s试剂溶于pH8.5、100mM的三乙醇胺缓冲液配制...
【专利技术属性】
技术研发人员:王保君,汤双双,欧卫军,沙海,邵志燕,
申请(专利权)人:南通伊仕生物技术股份有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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